【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株沙福芽孢杆菌及其在废水、土壤的治理修复领域的应用，属于环境微生物。
技术介绍
1、石油烃是石油中最主要的成分之一，主要由烷烃、芳香烃构成，也含有少量的含硫、含氮化合物。石油在勘探、开采、冶炼、运输、使用和储存等过程中的管理不当或突发渗漏事故，不可避免地会造成周边环境的石油烃污染问题，石油烃中的烷烃逐渐沉积到土壤、地下水与海洋中，极易造成持久性环境污染，芳香烃中的多环芳烃难以降解且具有致癌性，会通过食物链进入人体，威胁人类的生命健康。
2、含油废水的来源非常广泛，除了石油开采及加工工业排出大量的含油废水外，固体燃料热加工、纺织工业中的洗毛废水、轻工业中的制革废水、铁路及交通运输业、屠宰及食品加工业以及机械工业中车削工艺产生乳化液等均会排放含油废水。
3、当前，针对石油烃污染的处理方法主要分为物理法、化学法和生物法。其中生物处理技术具有二次污染小、去除效率高且污染物去除彻底、经济性能高等多个优点，因而成为现代废水处理技术的研究热点，受到越来越多的关注。
4、目前，科学家们已经筛选出多种具有石油烃降解功能的菌株，如不动杆菌(acinetobacter sp.)、假单胞菌(pseudomonas sp.)、棒杆菌(corynebacterium sp.)、微球菌(micrococcus sp.)、节杆菌(arthrobacter sp.)、产碱杆菌(alcaligenes sp.)等常见的石油烃降解细菌。但这些菌株对于石油烃的降解效果仍不够突出，因而需要筛选或构建出对石油烃降解效果更
技术实现思路
1、本专利技术针对现有的石油烃降解菌株效果不够突出的现状，提供一株沙福芽孢杆菌及其在废水、土壤的治理修复领域的应用，该菌株能够利用石油烃作为碳源加以利用，进而降解水体和土壤中的石油烃。
2、一株沙福芽孢杆菌(bacillus safensis)cy1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：cgmcc no.27876，保藏日期为：2023年7月13日，其16s rdna如seq id no:1所示，在没有特别说明的情况下，本专利技术中所述的沙福芽孢杆菌均是指沙福芽孢杆菌cy1菌株。
3、本专利技术提供的沙福芽孢杆菌的有益效果是：
4、1)该菌株对于柴油的降解效率高，在30℃条件下，针对评价培养基中1％以下的柴油含量，72h的柴油降解率达到99％以上；
5、2)该菌株具有高效的石油烃降解能力，针对初始含油量为110mg/l的蜡染废水，五天的石油烃降解率为96％，针对初始含油量为2％的石化油泥污染土壤，五周的石油烃降解率为98％；
6、3)该菌株中度耐盐，在5％以下的盐度条件下生长时，活菌数几乎不受影响，但不能耐受6％以上的盐度；
7、4)该菌株的培养方法简单，生长速度快且环境适应性强，安全性高且不破坏原始环境，无二次污染。
8、本专利技术中所述的石油烃包含但不限于正烷烃、支链烷烃、环烷烃和芳烃。
9、本专利技术还要求保护包含上述沙福芽孢杆菌的微生物菌剂。
10、优选的，所述沙福芽孢杆菌的发酵方法包括如下步骤：
11、(1)一级种子培养：无菌条件下，取沙福芽孢杆菌接种于富集培养基中，于25-35℃、150-300rpm的条件下培养12-48h，得到沙福芽孢杆菌的一级种子培养液；
12、(2)二级种子培养：无菌条件下，将沙福芽孢杆菌的一级种子培养液按照1-10vol％的接种量接种于富集培养基中，于25-35℃、150-300rpm的条件下培养12-48h，得到沙福芽孢杆菌的二级种子培养液；
13、(3)发酵：待发酵罐内的发酵培养基消毒完毕后，将步骤(2)所得的沙福芽孢杆菌的二级种子培养液按照5-10vol％的接种量接种于发酵培养基中，控制温度为25-35℃、转速150-300rpm，在通气比为1:(1-2)的条件下发酵，待溶氧开始上升时停止发酵，得到沙福芽孢杆菌的发酵液。
14、本专利技术中所述的通气比是指每分钟内通入发酵罐的空气体积与发酵液总体积之比。
15、其中所述富集培养基的组成为：蛋白胨5-15g/l，酵母提取物或酵母粉3-8g/l，氯化钠5-15g/l，溶剂为水，ph＝6-8。
16、优选的，所述富集培养基的组成为：胰蛋白胨10g/l，酵母提取物5g/l，氯化钠10g/l，溶剂为水，ph＝7-7.5。
17、进一步，所述发酵培养基的组成为：碳源10-30g/l、氮源5-20g/l、po43-0.8-1.5g/l、k+0.5-1.0g/l、mg2+0.05-0.5g/l、na+0.1-0.5g/l、mn2+0.03-0.2g/l、ca2+0.01-0.05g/l，溶剂为水，ph＝6～8。
18、优选的，所述po43-的来源为磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二铵中的一种或多种，所述k+的来源为磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸钾、氯化钾、硝酸钾中的一种或多种，所述mg2+的来源为硫酸镁、氯化镁中的一种或多种，所述na+的来源为氯化钠、硝酸钠或硫酸钠中的一种或多种，所述mn2+的来源为一水硫酸锰、四水硫酸锰、硝酸锰或氯化锰中的一种或多种，所述ca2+的来源为氯化钙、硝酸钙中的一种或多种的复配。
19、进一步，所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、淀粉、醋酸钠或柠檬酸钠中的一种或多种。
20、进一步，所述氮源选自酵母浸粉、蛋白胨、玉米浆干粉、硫酸铵、磷酸氢二铵或硝酸钾中的一种或多种。
21、在实际应用过程中，可根据实际的使用和存储需要来确定最终的沙福芽孢杆菌产品的形态，当需要使用液态产品时，将发酵液稀释至所需要的浓度即可直接使用，当需要使用固态产品时，可将发酵液离心后获得菌泥，然后采用喷雾干燥或冷冻干燥工艺制得固态菌粉。
22、本专利技术还要求保护使用上述沙福芽孢杆菌的活化液或微生物菌剂净化污废水或土壤的方法，包括向污废水或土壤中施加沙福芽孢杆菌的活化液或包含沙福芽孢杆菌的微生物菌剂的步骤。
23、进一步，所述污废水中的石油烃浓度为1％以下，优选0.5％以下。
24、进一步，所述污废水的盐度为5％以下，优选3％以下，最优选2％以下。
25、进一步，所述沙福芽孢杆菌的活化液或微生物菌剂的接种量为1000ppm以上，优选1000-20000ppm，最优选1000-10000ppm。
26、进一步，所述土壤中石油烃的浓度为10％以下，优选5％以下，最优选2％以下。
27、本专利技术还要求保护上述的沙福芽孢杆菌和微生物菌剂在污废水或土壤的治理修复领域的应用。
28、优选的，所述沙福芽孢杆菌和微生物菌剂用于降解污废水或土壤中的石油烃类；更优选的，所述沙福芽孢杆菌和微生物菌剂用于降解污废水或土壤中的柴油。
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1.一株沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.27876。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，有效成分包含权利要求1所述的沙福芽孢杆菌。
3.权利要求1所述沙福芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述富集培养基的组成为：蛋白胨5-15g/L，酵母提取物或酵母粉3-8g/L，氯化钠5-15g/L，溶剂为水，pH＝6-8；
5.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在于，所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、淀粉、醋酸钠或柠檬酸钠中的一种或多种；
6.一种净化污废水或土壤的方法，其特征在于，包括向污废水或土壤中施加权利要求1所述沙福芽孢杆菌的活化液或权利要求2所述微生物菌剂的步骤。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述污废水中石油烃的浓度为1％以下，优选0.5％以下。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述土壤中石油烃的浓度为10％以下，优
9.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述污废水的盐度为5％以下，优选3％以下，最优选2％以下。
10.权利要求1所述的沙福芽孢杆菌和权利要求2所述的微生物菌剂在污废水或土壤的治理修复领域的应用；优选的，所述沙福芽孢杆菌和微生物菌剂用于降解污废水或土壤中的石油烃类；更优选的，所述沙福芽孢杆菌和微生物菌剂用于降解污废水或土壤中的柴油。
...【技术特征摘要】
1.一株沙福芽孢杆菌(bacillus safensis)，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmccno.27876。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，有效成分包含权利要求1所述的沙福芽孢杆菌。
3.权利要求1所述沙福芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述富集培养基的组成为：蛋白胨5-15g/l，酵母提取物或酵母粉3-8g/l，氯化钠5-15g/l，溶剂为水，ph＝6-8；
5.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在于，所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、淀粉、醋酸钠或柠檬酸钠中的一种或多种；
6.一种净化污废水或土壤的方法，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑素娟，赵琬玫，闫明英，王锦梅，温胜国，王文红，仲伟华，刘圣鹏，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝赛德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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