α-苦瓜素在制备抗炎药物中的用途制造技术

本发明专利技术提供了α

【技术实现步骤摘要】
α
‑
苦瓜素在制备抗炎药物中的用途


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及α
‑
苦瓜素在制备抗炎药物中的用途。

技术介绍

[0002]细胞因子风暴是近些年备受关注的一种病理性免疫现象，是指机体免疫细胞特别是巨噬细胞被细菌或病毒感染激活后过度表达促炎细胞因子并引发严重炎症反应的病理过程。当机体的抗炎免疫反应不能减弱这种炎症趋势时，则会引发感染部位器官的严重病理损伤并诱发多器官功能衰竭而导致病人死亡。如冠状病毒肺炎(COVID
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19)，骤然升高的细胞因子引发炎症风暴是导致感染者出现急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和呼吸衰竭的重要原因。除了急性感染，细胞因子风暴也是类风湿和系统性红斑狼疮等自身免疫病以及肿瘤和艾滋病等疾病的共同终点。因此，抑制“细胞因子风暴”的治疗措施是降低机体过度炎症反应的关键。抗炎药物可以抑制炎症反应，减轻患者相应症状。
[0003]α
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苦瓜素(Alpha
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momorchain,α
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MMC)，是一种从苦瓜种籽中分离的I型核糖体失活蛋白。目前尚未见α
‑
苦瓜素作为抗炎药物。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供α
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苦瓜素在制备抗炎药物中的用途。
[0005]本专利技术提供了α
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苦瓜素在制备抗炎药物中的用途。
[0006]进一步地，所述α
‑
苦瓜素的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]进一步地，所述药物为抑制THP
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1单核细胞和/或巨噬细胞增殖活性的药物。
[0008]进一步地，所述药物为治疗肺炎的药物。
[0009]进一步地，所述药物是以α
‑
苦瓜素为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
[0010]进一步地，所述制剂为外用制剂、口服制剂、注射制剂。
[0011]进一步地，所述制剂为注射制剂。
[0012]本专利技术还提供了一种药物，它是以α
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苦瓜素为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
[0013]进一步地，所述制剂为外用制剂、口服制剂、注射制剂。
[0014]进一步地，所述制剂为注射制剂。
[0015]本专利技术研究发现α
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苦瓜素具有优异的抗炎活性，可用于制备抗炎的药物，如制备治疗肺炎的药物，具有优异的应用前景。
[0016]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0017]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0018]图1为α
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MMC的三级结构图和α
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MMC蛋白样品的质量检测结果；其中，A为α
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MMC的三级结构示意图；B为α
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MMC蛋白样品的HPLC色谱图，分析验证纯度>97％；C为α
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MMC通过天然PAGE的均匀性；D为α
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MMC纯度和相对大小的SDS
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PAGE分析，Lane1是蛋白质分子量Marker；泳道2、3、4和5是连续四批α
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MMC样品，分子量约为28KDa。
[0019]图2为通过蛋白质印迹和CCK
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8测定确定LRP1受体密度结果；其中，A为正常WIL2
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S B细胞、正常H9 T细胞、THP
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1单核细胞和M0巨噬细胞中LRP1受体蛋白密度的蛋白质印迹分析结果；B为用0μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml和64μg/ml的α
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MMC剂量处理后四种细胞系的CCK
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8测定存活率；显示的数据是平均值
±
SEM的单个值，n＝5；*P<0.05与对照组显著不同；#P<0.05与α
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MMC 0μg/ml组有显著差异；n.s.:与对照无显著差异；单向方差分析，Tukey的多重比较检验。
[0020]图3为LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的组织病理学评估(H&E染色)；其中，A为阴性对照组(sham组)；B为LPS诱导模型组；C为LPS和地塞米松治疗组；D为LPS和α
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MMC治疗组(0.1mg/kg)；E为LPS和α
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MMC治疗组(0.3mg/kg)；F为肺损伤评分；显示的数据是平均值
±
SEM的单个值，n＝8；*P<0.05与假手术组显著不同；#P<0.05与LPS诱导模型组有显著差异；n.s.:与对照无显著差异；单向方差分析，Tukey的多重比较检验；比例尺，200μm用于5倍缩放级别的图像和10μm用于10倍缩放级别的图像。
具体实施方式
[0021]除另有说明外，本专利技术具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
[0022]实施例1、α
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苦瓜素的制备
[0023]α
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苦瓜素(α
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MMC)的制备方法如下：在冷的50mM HAC
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NaAC缓冲液(pH5.0)中研磨去皮干燥成熟苦瓜种子并均质化。形成的浆液在48℃下搅拌12小时，然后在48℃下以15000g离心30分钟。用粗棉布过滤后，用硫酸铵溶液(浓度为30～60％)沉淀，分离上清液。将沉淀溶解于水中，并在48℃下用50mM磷酸钠溶液(pH7.0)透析12小时。透析后的样品通过用透析缓冲液平衡的SP
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Sepharose FF柱。保留的蛋白质用0.1M NaCl的50mM磷酸钠溶液洗脱，pH7.0，流速1ml/min。通过紫外检测器在280nm处监测、级分并通过12％SDS
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PAGE进行分析。收集并适当浓缩含有显著30kDa的级分。将浓缩的样品进一步加到Superdex75柱上，并用含有0.15M NaCl的50mM磷酸钠(pH7.0)以1.5ml/min的流速洗脱。通过12％SDS
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PAGE分析的含有核糖体失活蛋白的级分被合并、浓缩，然后使用50mM磷酸钠溶液，pH7.0进行透析。浓缩的核糖体失活蛋白通过0.22mm滤膜后，得到α
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苦瓜素，4～8℃保存备用。
[0024]α
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苦瓜本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.α
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苦瓜素在制备抗炎药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述α
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苦瓜素的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物为抑制THP
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1单核细胞和/或巨噬细胞增殖活性的药物。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物为治疗肺炎的药物。5.根据权利要求1～4任一项所述的用途，其特征在于：所述药物是以α
‑
苦瓜素为...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈富兵，彭克军，邓念华，刘梦铃，魏茹妍，康悦，
申请(专利权)人：成都医学院，
类型：发明
国别省市：