H1-pHSP65纳米疫苗及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及疫苗制备技术领域，具体公开了H1

【技术实现步骤摘要】
H1
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pHSP65纳米疫苗及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于疫苗制备
，具体涉及H1
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pHSP65纳米疫苗及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]DNA疫苗在肿瘤疫苗中占有重要地位，是近年研究的热点之一。肿瘤DNA疫苗是利用基因工程技术将肿瘤相关抗原的基因负载到质粒载体上，借助载体或者人体基因表达系统，能持续引起较强的体液免疫和细胞免疫，达到预防和治疗疾病的目的。
[0003]HSP65(heat shock protein 65kD)是来源于卡介苗的热休克蛋白，是卡介苗的主要抗原之一，国际基因库登录号是M17705。卡介苗早在60年代即通过BCG膀胱内灌注用于浅表性膀胱癌的临床治疗，不仅可消灭原位癌，还可以预防肿瘤复发。但是，BCG的成分复杂，会引起一系列的毒副作用。许多肿瘤会过量表达和分泌HSP60蛋白，HSP60与肿瘤的发生、发展、转移有关，可以作为肿瘤靶标之一，但是内源性HSP60的免疫原性较差。HSP65是HSP60家族成员，与HSP60具有高度同源性(高于55％)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.H1
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pHSP65纳米疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，pHSP65质粒的构建：根据HSP65序列设计引物，以pET28a
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HSP65质粒为模板扩增得HSP65序列，以pcDNA3.1为真核表达载体，NcoI和EcoRI为酶切位点、插入HSP65序列，构建得pHSP65质粒；S2，H1
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pHSP65纳米疫苗的制备：将质粒pHSP65转化入DH5a大肠杆菌感受态细胞，培养后提取质粒，将pHSP65质粒和H1纳米载体分别溶于PBS，静置5分钟后混合，静置10分钟后即得H1
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pHSP65纳米疫苗。2.根据权利要求1所述的H1
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pHSP65纳米疫苗的制备方法，其特征在于，S1中，所述引物包括F引物和R引物；所述F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.根据权利要求1所述的H1
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【专利技术属性】
技术研发人员：杨洁，柴大飞，郑骏年，姚宏，刘玲，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：