一种6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法技术

本发明专利技术公开了一种6

【技术实现步骤摘要】
一种6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法


[0001]本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法。

技术介绍

[0002]6‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺(6
‑
Bromo
‑3‑
hydroxypyrazine
‑2‑
carboxamide)是常用的化工原料，其CAS号为：259793
‑
88
‑
9，分子式为C5H4BrN3O2，分子量为：218.01，化学结构为：
[0003][0004]6‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺作为一种常用的化工原料或医药中间体，广泛应用于化学原料药的制备与合成，可用来合成制备法匹拉韦原料药。法匹拉韦(Favipiravir)，化学名为6
‑
氟
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺，由富山化学工业株式会社开发的核苷类抗病毒药物，于2014年3月在日本批准上市，用于治疗成人新型或复发型流行性感冒。法匹拉韦的合成方法有多种，其中多以6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺或其前体作为起始物料。
[0005]为了保证合成的法匹拉韦的质量，需要建立一个比较完善的方法检测6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度和其杂质含量。目前未见公开的关于6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度及杂质含量的检测方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法，高效、快速、准确地检测6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度及杂质含量，解决未知杂质对6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的干扰，以及面积百分比法计算杂质含量不准确的缺点。
[0007]具体技术方案如下：
[0008]一种6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法，在高效液相色谱仪上，采用反相色谱柱，以酸水溶液为流动相A，有机溶剂为流动相B进行梯度洗脱，测定6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度和多个杂质的含量，其中，6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质结构如下：
[0009]6‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺：
[0010][0011]杂质1：
[0012][0013]杂质2：
[0014][0015]为了增加6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺和已知杂质的保留，所述的反相色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶或苯基硅烷键合硅胶为填充剂，优选为以苯基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱。
[0016]进一步，所述的反相色谱柱填料粒径为3μm～5μm，色谱柱长为150mm～250mm，色谱柱直径为2.0mm～4.6mm；优选填料粒径为5.0μm，柱长为250mm，直径为4.6mm的色谱柱。
[0017]为了改善峰型，更好地分离主峰和杂质峰，所述流动相A为三氟乙酸水溶液、甲酸水溶液、磷酸水溶液中的一种；优选为磷酸水溶液，更优选的是0.05％的磷酸水溶液。
[0018]进一步，所述流动相B为甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃中的一种或多种；优选为甲醇和乙腈的混合溶液，乙腈：甲醇＝1:1～78:22(V/V)；更优选的是乙腈：甲醇＝78:22(V/V)的溶液。
[0019]进一步，所述的梯度洗脱程序为：
[0020]洗脱时间(min)流动相A(％)流动相B(％)090～1000～10590～1000～102515～2575～85
[0021]优选的洗脱程序为：
[0022]洗脱时间(min)流动相A(％)流动相B(％)09555955252080
[0023]进一步，采用紫外检测器，检测波长为220nm～240nm，优选230nm；
[0024]进一步，色谱柱柱温为25～35℃，优选30℃；
[0025]进一步，流动相流速为0.8ml/min～1.2ml/min，优选1.0ml/min；
[0026]进样体积：5μl。
[0027]所述的6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的高效液相色谱分析方法，主要由以下步骤组成：
[0028](1)取6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺原料，配制成适量浓度的样品溶液；同时稀释成浓度为1％的自身对照溶液；
[0029](2)分别取样品溶液和自身对照溶液注入液相色谱仪；
[0030](3)采用反相色谱柱，以酸水溶液和有机溶剂为流动相进行梯度洗脱；
[0031](4)计算6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度，以及6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的杂质含量。
[0032]为了提高检测方法灵敏度，同时保证色谱柱的耐受性，优选样品配制成含6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺约0.5mg/ml的供试品溶液，同时定量稀释成含6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺约5μg/ml的自身对照溶液，量取5μl注入液相色谱仪。
[0033]采用的稀释剂为水和乙腈的混合溶液，水:乙腈＝95:5(V/V)。
[0034]有益效果：
[0035]1、通过本专利技术的方法，可以同时分析6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的纯度及已知杂质含量，解决未知杂质对6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺的干扰以及面积百分比法计算杂质含量不准确的缺点。
[0036]2、本专利技术操作简单、灵敏度高、重复性好，为6本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：在高效液相色谱仪上，采用反相色谱柱，以酸水溶液为流动相A，有机溶剂为流动相B进行梯度洗脱，所述的6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺及多个杂质结构如下：6
‑
溴
‑3‑
羟基吡嗪
‑2‑
甲酰胺：杂质1：杂质2：2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述的反相色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶或苯基硅烷键合硅胶为填充剂。3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述的流动相A为三氟乙酸水溶液、甲酸水溶液、磷酸水溶液中的一种；所述的流动相B为甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃中的一种或多种。4.根据权利要求3所述的分析方法，其特征在于，所述流动相A为0.05％磷酸水；所述流动相B为乙腈和甲醇，体积比为1:1～78:22。5.根据权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述流动相B为乙腈和甲醇，体积比为78:22。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪为紫外检测器，检测波长为220nm～240nm。7.根据权利要求6所述的检测方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴仲夏，邓瑜，
申请(专利权)人：苏州正济药业有限公司，
类型：发明
国别省市：