一种睾酮及睾酮异构体的分离方法技术

本发明专利技术公开一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，以多次析晶回收后残留的含睾酮异构体的睾酮母液物为原料，通过酯化、柱层析分离、水解、纯化得到高纯度的睾酮和睾酮异构体，分离所得睾酮及睾酮异构体，纯度≥99%，睾酮可以提供产品总收率，异构体可以作为异构体工作对照品，实现睾酮中杂质的精准检测。本发明专利技术操作简便，易于实现，制备效率高。制备效率高。

【技术实现步骤摘要】
一种睾酮及睾酮异构体的分离方法


[0001]本专利技术属于甾体药物制备
，具体涉及一种睾酮及睾酮异构体的分离方法。

技术介绍

[0002]睾酮，英文名称：17β
‑
hydroxyandrost
‑4‑
ene
‑3‑
one，化学名：17α
‑
羟基雄甾
‑4‑
烯
‑3‑
酮，分子式为C
19
H
28
O2；又称睾丸素，雄激素类药，是睾丸间隙细胞分泌的一种雄性激素，也是活性最强的雄激素，能促进人和动物雄性器官和副性征的正常发育、精子成熟以及促进机体的蛋白质合成代谢，使肌肉发达。国内厂家以4
‑
AD为原料，经醚化，还原水解得到睾酮，其反应方发如下：睾酮的生产过程中，睾酮异构体是由于还原反应过程产生的异构体杂质，在现阶段生产睾酮的厂家中，睾酮异构体是主要单杂之一。
[0003]在对睾酮异构体进行研究中，其制备纯化往往都是通过对睾酮母液反复精制，富集得到含睾酮异构体较高的样品，再通过制备液相分离才能得到含量高的异构体，制备杂质成本较高；本专利技术提供一种简便，有效的合成方法，合成量大，纯度高，由此合成的睾酮异构体可作为标准品使用，也可以为睾酮的工艺优化提供理论支持。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种简便、高效的睾酮及睾酮异构体的分离方法。该方法工艺简单快速，成本低，产品纯度高，且产品可以作为标准品使用，有利于睾酮生产工艺的优化以及产品质量的提升。
[0005]为此本专利技术的技术方案为：一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，其特征在于：以多次析晶回收后残留的含睾酮异构体的睾酮母液物为原料，经过酯化、柱层析分离、水解、纯化，分别得到纯度≥99%的睾酮及睾酮异构体；具体分离方法包括以下步骤：步骤A：在1#反应瓶中加入睾酮母液物，加入二氯甲烷，三乙胺，搅拌均匀，开始滴加十一烷酰氯，滴加完毕，保温反应，TLC监控至原料反应完全；原料反应完后，加入盐酸溶液搅拌均匀，静置分层；水洗二氯甲烷层至中性，负压浓缩二氯甲烷至无溶剂浓缩出，得到物料Ⅰ；步骤B：将步骤A中得到的物料Ⅰ用二氯甲烷溶解，再上样柱层析，洗脱液进行洗脱分离，TLC监控下分段收集，浓缩干洗脱液，烘干物料，分别得到十一酸睾酮和十一酸睾酮异
构体；步骤C：将步骤B中得到的十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体分别放入2#反应瓶、3#反应瓶中，在2#反应瓶、3#反应瓶中加入甲醇、水、氢氧化钠，控温反应，TLC监控至原料反应完全；原料反应完后，加冰乙酸调pH至中性；浓缩反应液至剩余少量甲醇，降温析晶，抽滤，烘干物料，分别得到睾酮及睾酮异构体。
[0006]所述步骤A中的睾酮母液物中所含睾酮占比为30~50%，睾酮异构体占比为60%~40%；二氯甲烷与睾酮母液物的重量比为5~6:1，三乙胺与睾酮母液物的重量比为1~1.5:1，十一烷酰氯与睾酮母液物的重量比为2~3:1，反应温度为0~5℃，反应时间为1~2h；所述盐酸溶液为6N盐酸溶液，其与睾酮母液物的重量比为1.0~1.2:1，搅拌时间为30~40min，静置时间为15~20min，水洗次数为2~3次，每次水洗水与睾酮母液物的重量比为2~3:1，浓缩温度为35~40℃。
[0007]所述步骤B中层析柱的吸附剂采用200~300目的层析硅胶，所述二氯甲烷与睾酮母液物的重量比为3~4:1，洗脱液采用石油醚、与二氯甲烷体积比为3~4:1，浓缩温度为35~40℃，干燥温度为30~35℃。
[0008]所述步骤C中甲醇与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为8~10:1，水与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.3~0.4:1，氢氧化钠与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.4~0.5:1，反应温度为35~40℃，反应时间为4~5h，冰乙酸与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.3~0.35；浓缩剩余甲醇与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为1.0~1.5:1，浓缩温度为35~40℃，降温析晶温度为10~15℃，析晶时间为2~4h，干燥温度为60~65℃，所得睾酮及睾酮异构体的纯度均≥99%。
[0009]有益效果：本专利技术提供的一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，易于操作、有效，该方法优点如下：1）产物纯度高，所得的睾酮异构体纯度≥99%；2）合成成本低，制备效率高。
附图说明
[0010]图1是本专利技术的睾酮核磁图谱。
[0011]图2是本专利技术的睾酮异构体核磁图谱。
具体实施方式
[0012]下面通过具体实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，但该实施例不应理解为对本专利技术的限制。
[0013]需要说明的是：如图2所示，以下实施例中所述睾酮异构体的核磁氢谱数据为：1H
‑
NMR（600 MHz，CDCl3）δ ：0.714（3H，s，H
‑
19），0.955~0.999（1H，m，H
‑
14），1.07~1.14（1H，m，H
‑7’
），1.18~1.25（4H，m，H
‑
11
’
，H
‑
18），1.39~1.45（1H，m，H
‑
9），1.46~1.60（6H，m，
‑
OH，H
‑
8，H
‑
12
’
，H
‑
15
’
，H
‑
16，H
‑
16
’
），1.63~1.66（1H，m，H
‑
15），1.69~1.74（1H，m，H
‑1’
），1.77~1.82（1H，m，H
‑
11）,1.87~1.89（1H，m，H
‑
7），2.02~2.06（1H，m，H
‑
1），2.15~2.21（1H，m，H
‑
12），2.26~2.29（1H，m，H
‑6’
），2.32~2.38（1H，m，H
‑2’
），2.39~2.45（2H，m，H
‑
2，H
‑
6），3.76~3.77（1H，d，
H
‑
17），5.73（1H，s，H
‑
4）。
[0014]实施例一：（1）在1#反应瓶中加入50g二氯甲烷，10g三乙胺，再加入10g睾酮母液物（含睾酮30%、睾酮异构体60%），搅拌均匀，开始滴加20g十一烷酰氯，滴加完毕，0℃保温反应2h，TLC监控至原料反应完全；加入10g 6N盐酸溶液，搅拌30min，静置15min，分层；每次加入20g水，水洗二氯甲烷层3次至中性，35℃负压浓缩二氯甲烷至无溶剂浓缩出，得到物料Ⅰ；（2）将（1）中得到的物料Ⅰ用30g二氯甲烷溶解，上样柱层析本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，其特征在于：以多次析晶回收后残留的含睾酮异构体的睾酮母液物为原料，经过酯化、柱层析分离、水解、纯化，分别得到纯度≥99%的睾酮及睾酮异构体；具体分离方法包括以下步骤：步骤A：在1#反应瓶中加入睾酮母液物，加入二氯甲烷，三乙胺，搅拌均匀，开始滴加十一烷酰氯，滴加完毕，保温反应，TLC监控至原料反应完全；原料反应完后，加入盐酸溶液搅拌均匀，静置分层；水洗二氯甲烷层至中性，负压浓缩二氯甲烷至无溶剂浓缩出，得到物料Ⅰ；步骤B：将步骤A中得到的物料Ⅰ用二氯甲烷溶解，再上样柱层析，洗脱液进行洗脱分离，TLC监控下分段收集，浓缩干洗脱液，烘干物料，分别得到十一酸睾酮和十一酸睾酮异构体；步骤C：将步骤B中得到的十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体分别放入2#反应瓶、3#反应瓶中，在2#反应瓶、3#反应瓶中加入甲醇、水、氢氧化钠，控温反应，TLC监控至原料反应完全；原料反应完后，加冰乙酸调pH至中性；浓缩反应液至剩余少量甲醇，降温析晶，抽滤，烘干物料，分别得到睾酮及睾酮异构体。2.根据权利要求1所述的一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，其特征在于：所述步骤A中的睾酮母液物中所含睾酮占比为30～50%，睾酮异构体占比为60%～40%；二氯甲烷与睾酮母液物的重量比为5～6:1，三乙胺与睾酮母液物的重量比为1～1.5:1，十一烷酰氯与睾酮母液物的重量比为2～3:1，反应温度为0～5℃，反应时间为1～2h；所述盐酸溶液为6N盐酸溶液，其与睾酮母液物的重量比为1.0～1.2:1，搅拌时间为30～40min，静置时间为15～20min，水洗次数为2～3次，每次水洗水与睾酮母液物的重量比为2～3:1，浓缩温度为35～40℃。3.根据权利要求1或2所述的一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，其特征在于：所述步骤B中层析柱的吸附剂采用200～300目的层析硅胶，所述二氯甲烷与睾酮母液物的重量比为3～4:1，洗脱液采用石油醚、与二氯甲烷体积比为3～4:1，浓缩温度为35～40℃，干燥温度为30～35℃。4.根据权利要求1或2所述的一种睾酮及睾酮异构体的分离方法，其特征在于：所述步骤C中甲醇与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为8～10:1，水与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.3～0.4:1，氢氧化钠与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.4～0.5:1，反应温度为35～40℃，反应时间为4～5h，冰乙酸与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为0.3～0.35；浓缩剩余甲醇与十一酸睾酮、十一酸睾酮异构体的重量比均为1.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯海波，郑承刚，朱保林，郑建雄，刘林，左权，付浩，
申请(专利权)人：湖北竹溪人福药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：