CS1靶向性嵌合抗原受体修饰的T细胞制造技术

描述了用于治疗恶性黑素瘤和其它表达CS1的癌症的嵌合抗原受体。的癌症的嵌合抗原受体。的癌症的嵌合抗原受体。

【技术实现步骤摘要】
CS1靶向性嵌合抗原受体修饰的T细胞
[0001]本申请是申请日2015年12月7日，申请号201580075401.6，专利技术名称“CS1靶向性嵌合抗原受体修饰的T细胞”的中国专利技术专利申请的分案申请。
[0002]对相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求2014年12月5日提交的题为“USE OF CENTRAL MEMORY DERIVED
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CS1 CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORMODIFIED T CELLS TO TREAT MULTIPLE MYELOMA”的美国非临时申请No.62/088,423的权益，其内容完整并入本文。

技术介绍

[0004]已经研究了基于肿瘤特异性T细胞的免疫疗法，包括采用工程化T细胞的疗法用于抗肿瘤治疗。在某些情况下，此类疗法中使用的T细胞在体内未保持有活性达足够长的时段。在某些情况下，T细胞的抗肿瘤活性相对较低。因此，本领域中需要具有较长期的抗肿瘤功能的肿瘤特异性癌症治疗。
[0005]利用嵌合抗原受体(CAR)工程化T细胞的过继性T细胞疗法(ACT)可以提供安全且有效的方式来降低各种癌症的复发率，因为CART细胞可以工程化为以不依赖于MHC的方式特异性识别抗原性独特的肿瘤群体。
[0006]多发性骨髓瘤(MM)是以浆细胞克隆扩增为特征的B细胞恶性。MM占所有癌症的约1％，并且在美国略微超过10％的血液恶性。仅在美国，今年将诊断出约20,000例新病例，并且超过11,000人将死于此疾病。MM目前的疗法通常会诱导消退，但几乎所有的患者最终复发并死亡。
[0007]CS1是信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM)受体家族的细胞表面糖蛋白，其在正常浆细胞和MM细胞上高度且选择性表达，在NK细胞上较低表达，并且在正常组织上很少表达或无表达。在复发性MM患者中与硼替佐米(bortezomib)一起给予的人源化CS1单克隆抗体Elotuzumabc(HuLuc63)在48％的患者中产生≥PR。MM细胞上的CS1高表达以及其限于正常组织中的浆细胞使CS1成为CAR T细胞疗法的合理靶物(Hsi et al.2008Clin Cancer Res 14:2775)。

技术实现思路

[0008]本文描述了包含胞外域、跨膜域和胞内信号传导域的CAR。胞外域包含CS1特异性scFv区或其变体以及任选地间隔物，其包含例如人Fc域的部分。胞外域使得CAR在T细胞表面上表达时能够将T细胞活性引导至表达CS1(在MM表面上的受体)的细胞。跨膜域包含例如CD4跨膜域、CD8跨膜域、CD28跨膜域、或CD3跨膜域。胞内信号传导域包含来自人CD3复合物的zeta链(CD3ζ)的信号传导域和一个或多个共刺激域，例如4
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1BB共刺激域。在胞内区中包含与CD3ζ串联的共刺激域，如4
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1BB(CD137)共刺激域使得T细胞能够接受共刺激信号。T细胞，例如，患者特异性的自体T细胞可以工程化为表达本文所述的CAR，并且可以扩充工程化细胞并且在ACT中使用。可以使用各种T细胞亚组，包括αβT细胞和γδT细胞两者。此外，CAR可以在其它免疫细胞如NK细胞中表达。在用表达本文所述的CAR的免疫细胞治疗患者的情
况下，细胞可以是自体T细胞或同种异体T细胞。在一些情况下，使用的细胞是包括CD4+和CD8+中央记忆T细胞(T
CM
)的细胞群体，其是CD62L+，CCR7+，CD45RO+和CD45RA
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。细胞群体也可以包含其它类型的T细胞。
[0009]本文描述的CS1 CAR具有某些有益的特征，例如过继转移后的持久性和增强的抗肿瘤活性。
[0010]表达靶向CS1的CAR的T细胞可用于治疗癌症诸如MM以及表达CS1的其它癌症。因此，本公开内容包括使用表达本文所述的CAR的T细胞治疗表达CS1的癌症的方法。
[0011]本文描述了编码CAR的核酸分子，所述CAR包含CS1 scFv(例如，EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSRYWMSWVRQAPGKGLEWIGEINPDSSTINYAPSLKDKFIISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARPDGNYWYFDVWGQGTLVTVSSGSTSGGGSGGGSGGGGSSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGIAVAWYQQKPGKVPKLLIYWASTRHTGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQQYSSYPYTFGQGTKVEIK；SEQ ID NO:1)或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如，取代)的变体；选自以下的跨膜域：CD4跨膜域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如取代)的变体，CD8跨膜域或其具有1
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5个(例如1或2个)氨基酸修饰(例如取代)的变体，CD28跨膜域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如取代)的变体和CD3ζ跨膜域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如，取代)的变体；共刺激域(例如，CD28共刺激域或其具有1
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5个(例如，例如，1或2个)氨基酸修饰(例如取代)的变体；或4
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1BB共刺激域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如取代)的变体；或CD28共刺激域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如，取代)的变体和4
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1BB共刺激域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰(例如，取代)的变体两者)；和CD3ζ信号传导域或其具有1
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5个(例如，1或2个)氨基酸修饰的变体。
[0012]本公开还涉及编码本文所述的任何CAR的核酸分子(例如，包含编码CAR之一的核酸序列的载体)和表达本文所述的任何CAR的分离的T细胞。
[0013]本文描述了编码嵌合抗原受体的核酸分子，其中嵌合抗原受体包含：CS1scFv；间隔区；CD28或CD4跨膜域，CD28共刺激域或4
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1BB共刺激域，任选的GlyGlyGly接头和CD3ζ信号传导域。
[0014]在一个实施方案中，CS1 CAR由SEQ ID NO:31、34、37、40、43和46(缺乏信号序列的成熟CAR)中任一项的氨基酸序列组成或包含SEQ ID NO:31、34、37、40、43和46(缺乏信号序列的成熟CAR)中任一项的氨基酸序列，或CS1 CAR由SEQ ID NO:30、33、36、39、42和45中任一项(具有GMCSFRa信号序列的未成熟CAR)的氨基酸序列组成或包含SEQ ID NO:30、33、36、39、42和45中任一项(具有GMCSFRa信号序列的未成熟CAR)的氨基酸序列。CAR可以以包含信号序列，例如人GM本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.编码嵌合抗原受体的核酸分子，其中所述嵌合抗原受体包含：CS1scFv；任选的间隔区；跨膜域；共信号传导域；和CD3ζ信号传导域。2.权利要求1的核酸分子，其中所述嵌合抗原受体还包含位于所述共信号传导域和所述CD3ζ信号传导域之间的1至15个氨基酸的接头序列。3.权利要求1的核酸分子，其中所述共信号传导域选自CD28共信号传导域和4
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1BB共信号传导域。4.权利要求1的核酸分子，其中所述跨膜域选自CD28跨膜域和CD4跨膜域。5.权利要求1的核酸分子，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：SJ福曼，X王，
申请(专利权)人：希望之城公司，
类型：发明
国别省市：