一种表达重组神经营养因子融合蛋白的方法、重组神经营养因子融合蛋白及其应用技术

本发明专利技术提供了一种表达重组神经营养因子融合蛋白的方法、重组神经营养因子融合蛋白及其应用，属于功能蛋白技术领域。本发明专利技术通过构建高表达载体，使用细胞表达系统，筛选高表达细胞株，获得了高生物学活性、二聚体GDNF/BDNF重组蛋白，解决了市面上重组GDNF/BDNF表达量低、价格昂贵、生物学活性低等缺点。获得的GDNF/BDNF对于后续神经生长和发育等方面的基础研究与临床级细胞培养具有非常重要的意义。础研究与临床级细胞培养具有非常重要的意义。础研究与临床级细胞培养具有非常重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种表达重组神经营养因子融合蛋白的方法、重组神经营养因子融合蛋白及其应用


[0001]本专利技术属于功能蛋白
，具体涉及一种表达重组神经营养因子融合蛋白的方法、重组神经营养因子融合蛋白及其应用。

技术介绍

[0002]1993年Lin,L F等人利用寡聚核苷酸探针从大鼠神经胶质瘤细胞系B49细胞中发现及对人的基因文库的筛选，分离克隆出一种神经营养因子，命名为胶质源性神经营养因子(GDNF)(Lin LT et al.,1993)。GDNF是由脑组织中的神经胶质细胞分泌的具有重要生物功能的神经细胞营养因子，属于TGF
‑
beta超家族的一员，具有促进神经元生长和分化的作用，对多巴胺能神经元和运动神经元显示出潜在的神经营养作用(Henderson et al.,1994)，在参与神经细胞程序性死亡、促进神经元存活、参与轴突损伤的修复等方面也有重要作用(王运良，2004)。
[0003]国内外对GDNF的功能进行了广泛的研究，胚胎期GDNF可以促进神经系统的发育，成年时，GDNF可以修复神经炎症、损伤、退行性病变。Su本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种编码重组神经营养因子的融合基因，其特征在于，包括神经营养因子基因序列、分泌信号肽TPA基因序列和Fc基因序列。2.根据权利要求1所述融合基因，其特征在于，所述重组神经营养因子的融合基因为分泌信号肽TPA基因序列
‑
Fc基因序列
‑
神经营养因子基因序列或分泌信号肽TPA基因序列
‑
神经营养因子基因序列
‑
Fc基因序列。3.根据权利要求2所述融合基因，其特征在于，所述神经营养因子为GDNF或BDNF；所述GDNF的核苷酸序列如SEQ ID NO:6，所述BDNF的核苷酸序列如SEQ ID NO:8。4.根据权利要求3所述融合基因，其特征在于，所述分泌信号肽TPA基因序列如SEQ ID NO:9，所述Fc基因序列如SEQ ID NO:10。5.根据权利要求4所述融合基因，其特征在于，重组GDNF的融合基因为TPA基因序列
‑
Fc基因序列
‑
GDNF基因序列，核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示；重组BDNF的融合基因为TPA基因序列
‑
BDNF基因序列
‑
Fc基因序列，核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。6.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求1～5任意一项所述融合基因。7.根据权利要求6所述的重组表达载体，其特征在于，骨架载体为pPBml
‑
PNCE。8.一种重组细胞，其特征在于，包含权利要求1～5任意一项所述融合基因或权利要求6或7所述重组表...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵永强，甘振磊，俞君英，张颖，胡青松，焦璐琰，
申请(专利权)人：安徽中盛溯源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：