一种靶向P2X7R的小分子抑制剂及其在治疗结肠癌中的应用制造技术

本发明专利技术属于药物化学技术领域，具体涉及一种靶向P2X7R的小分子抑制剂及其在治疗结肠癌中的应用。通过对P2X7R蛋白和化合物库中小分子进行预处理，经虚拟对接后，分析结合模式获得本发明专利技术的小分子抑制剂。本发明专利技术筛选获得的靶向P2X7R的小分子抑制剂特异性高，安全性好，没有任何毒性，副作用低，能够应用于结肠癌的防治。治。治。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向P2X7R的小分子抑制剂及其在治疗结肠癌中的应用


[0001]本专利技术属于药物化学
，具体涉及一种靶向P2X7R的小分子抑制剂及其在治疗结肠癌中的应用。

技术介绍

[0002]结肠癌是一种较为常见的消化道恶性肿瘤，多发生于直肠与结肠的交界处，向多个内脏器官、组织侵犯，对患者身体造成较为严重的损伤，致死率较高。因此，揭示结肠癌发生、发展、侵袭和转移的分子机制，以及寻找新的标记物来靶向结肠癌的治疗具有重要意义。这些步骤将提高结肠癌治疗预后，降低疾病死亡率。
[0003]嘌呤受体P2X配体门控的离子通道7(P2X7R)是ATP门控的离子通道受体，在不同类型的细胞中均有表达，有助于调节炎症、细胞增殖和凋亡、代谢和吞噬作用。在人类癌症中P2X7R的异常表达已得到确定，包括胃癌、神经内分泌癌、肾癌、卵巢癌、子宫癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、皮肤癌和脑癌等。此外，多项研究表明P2X7R表达的增加与包括结直肠癌在内的多种肿瘤疾病预后恶化相关。虽然P2X7R在癌症生长和代谢中的作用尚不完全清楚，研究发现P2X7R参与几个肿瘤发生的关键途径和过程，并且P2X7R介导的炎症机制在癌细胞分裂和肿瘤侵袭中起关键作用。因此，P2X7R有望成为结肠癌治疗的新靶点，其抑制剂可能促进新一代抗肿瘤药物的开发，但是目前尚没有关于拮抗P2X7R治疗结肠癌的研究。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种靶向P2X7R的小分子抑制剂及其在治疗结肠癌中的用途。
[0005]本专利技术的第一个方面，提供一种靶向P2X7R的小分子抑制剂，所述小分子抑制剂的结构式如式I所示：
[0006][0007]本专利技术的第二个方面，提供所述的靶向P2X7R的小分子抑制剂在制备治疗结肠癌的药物中的用途。
[0008]本专利技术的第三个方面，提供一种治疗结肠癌的药物，所述药物的活性成分为所述的小分子抑制剂。
[0009]进一步的，所述药物还包括药用辅料。
[0010]更进一步的，所述药物的制剂形式包括注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、控释或缓释剂或纳米制剂。
[0011]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0012]1、本专利技术提供的靶向P2X7R的小分子抑制剂特异性高，安全性好，没有任何毒性，副作用低，具有开发与P2X7R信号通路相关疾病的靶向药的巨大潜力。
[0013]2、本专利技术提供的靶向P2X7R的小分子抑制剂能够在体内有效抑制肿瘤细胞的生长，具有研发为结肠癌治疗药物的巨大前景，为后续临床试验奠定基础，为临床治疗提供新的思路与方法。
附图说明
[0014]图1为本专利技术中小分子抑制剂与P2X7R蛋白的对接构象图。
[0015]图2为本专利技术中小分子抑制剂与P2X7R蛋白的对接结构结合模式图。
[0016]图3为本专利技术中小分子抑制剂的结构式。
[0017]图4为本专利技术中小分子抑制剂对ATP诱导转染野生型人P2X7R的HEK
‑
293T细胞的通道功能影响效果图。
[0018]图5为本专利技术中小分子抑制剂对细胞活力的影响。
[0019]图6为本专利技术中小分子抑制剂对人结肠癌细胞SW620荷瘤后肿瘤影响。
[0020]图7为本专利技术中小分子抑制剂治疗前后裸鼠体重变化。
[0021]图8为本专利技术中小分子抑制剂治疗前后肿瘤体积变化。
具体实施方式
[0022]下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0023]实施例1：靶向P2X7R的小分子抑制剂的筛选
[0024]初步筛选靶向P2X7R小分子变构抑制剂
[0025]虚拟筛选使用商业软件Schordinger软件的Glide模块进行。首先，我们从PBD数据库中下载P2X7R晶体5U1X，蛋白的处理采用Glide蛋白预处理流程中的加氢
→
去水
→
蛋白结构优化。小分子的虚拟筛选采用陶素化学提供的虚拟筛选小分子库(个数200万+)，然后交由上海宇道生物技术有限公司操作，移除其中包含PAINS结构的分子，最终进行对接计算的分子个数为180万+。然后我们使用薛定谔中的LigPrep模块(Epik模式)对小分子进行预处理和构象生成。格点文件由F108为中心选取，选取其周围18埃的残基作为对接口袋。使用Glide进行对接获取对接构象，其对接打分为：
‑
9.33985，其对接构象(图1)，对小分子抑制剂与P2X7R蛋白的结合模式进行分析(图2)，结合模式分析提示，小分子抑制剂与ASP，LYS之间形成了氢键作用。
[0026]按照上述方法继续筛选，筛选打分在前2000名的小分子。然后对这2000个小分子再使用XP精度(最高精度对接)筛选出其中排名在前30名的小分子，分析其结合模式，最终得到的可进行对接的小分子抑制剂，该小分子抑制剂编号为Z1514785417，以下或称为Z1514785417，所述的小分子抑制剂的结构式如图3所示。
[0027]所述小分子抑制剂的分子组成为：
[0028]CCC＝1N＝CSC1NC(＝O)NC(C)C2COC＝3C＝CC＝CC23。
[0029]结合图2分析的具体结果记录于表1
‑
表4中。
[0030]表1疏水相互作用
[0031][0032]表2氢键相互作用
[0033][0034]表3π
‑
堆积作用
[0035][0036]表4π
‑
阳离子相互作用
[0037][0038]实施例2：Z1514785417对ATP诱导转染野生型P2X7R的HEK
‑
293T细胞的通道功能的影响
[0039](1)构建过表达P27XR慢病毒载体：
[0040]h
‑
P2RX7(野生型)过表达慢病毒载体均由上海汉恒生物科技有限公司直接合成。主要流程：选择慢病毒载体，并进行设计目的片段PCR引物，包括上游引物LV
‑
h
‑
P2RX7
‑
E/B
‑
F，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物LV
‑
h
‑
P2RX7
‑
E/B
‑
R，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；选用限制性内切酶EcoRI和BamHI进行酶切载体，琼脂糖凝胶回收得到纯化的线
性化载体；根据设计的引物进行目的片段PCR，琼脂糖凝胶回收得到正确大小的目的片段；将线性化载体和目的片段按照同源重组或者T4连接的方法进行连接；转化感受态DH5a，菌液涂板，培养12
‑
16h；挑选单克隆行进菌落验证本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向P2X7R的小分子抑制剂，其特征在于，所述小分子抑制剂的结构式如式I所示：2.权利要求1所述的靶向P2X7R的小分子抑制剂在制备治疗结肠癌的药物中的用途。3.一种治疗结肠癌的药物，其特征在于，所述药物的活性成分为权利要求1所述的小分子抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶金辉，李晓玲，
申请(专利权)人：陶金辉，
类型：发明
国别省市：