一株具有α-葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株具有α

【技术实现步骤摘要】
一株具有
α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，更具体地说是涉及一株具有α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌。

技术介绍

[0002]高糖高脂饮食常引起肥胖、高血糖、高血脂等慢性病，严重危害人们健康。国内外科学研究已证实益生菌在缓解和防治高血脂、高血糖等慢性病方面具有显著效果，且相较于传统药物治疗，益生菌对机体无副作用，不会引起并发症。当前认为益生菌调节血糖水平主要作用机理包括：(1)调节肠道微生态平衡，增强肠道黏膜屏障功能；(2)调节机体免疫功能；(3)修复机体氧化损伤；(4)抑制或推迟肠道对葡萄糖的吸收。其中，基于抑制或推迟肠道对葡萄糖的吸收成为体外筛选降糖益生菌的主要依据。食物中的碳水化合物在肠道内主要以单糖的形式被吸收。人体摄入的淀粉等多糖物质被唾液和胰α
‑
淀粉酶降解生成寡糖及二糖后，还需要在肠道α
‑
葡萄糖苷酶的作用下酶解生成葡萄糖后才能被吸收。α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂主要通过可逆性竞争α
‑
葡萄糖苷酶与糖的结合位点，限制或延缓碳水化合物在肠内的分解和吸收，有效推迟并减轻糖尿病人餐后血糖升高的时间及进程，进而发挥降糖作用。另外，有文献报道体外抗氧化活性较高的活性成分不仅具有较高的体内自由基清除能力，而且还能提高小鼠体内的超氧化物歧化酶的酶活，改善肝内的糖代谢紊乱，提高小鼠的肝糖原代谢水平，降低血糖值，即其抗氧化活性与与降血糖活性具有一定的相关性。
[0003]虽然目前已经分别筛选了多株具有α
‑
糖苷酶抑制活性的乳酸菌，但是，尚未见到具有α
‑
糖苷酶抑制活性短乳杆菌的报道。
[0004]因此，如何提供一种具有抑制α
‑
糖苷酶活性功能的短乳杆菌并对其进行应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一株具有α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌，该菌株可以有效抑制α
‑
糖苷酶活性，进而抑制葡萄糖的生成及肠道对葡萄糖的吸收，以达到降糖的效果。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一株具有α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌，所述菌株为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)117
‑
3，于2021年09月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23335，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为短乳杆菌Lactobacillus brevis。
[0008]所述的具有α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌在制备具有辅助降血糖和降血脂功能食品中的应用。
[0009]经由上述技术方案可知，本专利技术记载的短乳杆菌菌株具备α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性，细胞表面疏水性51.65％，自聚合达75％，可以和食源性肠道病原菌共聚合，可以在
Caco
‑
2细胞表面粘附，表明该菌株在肠道中定殖能力强。该菌株还具有良好的降胆固醇能力，体外实验表明，其胆固醇吸收率为23.51％(13.77
±
0.46mg/L)，并具有较强的ABTS+和DPPH清除能力。本菌株可用于制备各种调节血糖血脂的食品、保健品、食品添加剂或药品。
附图说明
[0010]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0011]图1附图为菌株117
‑
3的菌落形态图；
[0012]图2附图为菌株117
‑
3的革兰氏染色镜检图；
[0013]图3附图为菌株117
‑
3的系统发育树。
具体实施方式
[0014]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0015]本专利技术实施例公开了一种具有α
‑
糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)117
‑
3，于2021年09月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23335，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为短乳杆菌Lactobacillus brevis。
[0016]以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。
[0017]实施例1菌株117
‑
3的分离与鉴定
[0018](1)菌株分离纯化：取陕西西安地区手工发酵蔬菜0.5g，用无菌剪刀将样品剪成0.3
×
0.3cm小块，加入10ml无菌生理盐水涡旋振荡3min梯度稀释至10
‑7，分别吸取10
－4
～10
－7
稀释液100μL涂布于加有2％碳酸钙的MRS固体培养基上，37℃静置培养48h，见图1；挑取有溶钙圈的菌落，在MRS固体培养基上划线纯化革兰氏染色并在显微镜下观察，见图2；选取革兰氏染色阳性且显微形态为杆状的菌株，25％甘油，
‑
80℃冷冻保存备用。
[0019](2)菌株鉴定：使用细菌基因组提取试剂盒(TaKaRa MiniBEST Bacterial Genomic DNA Extraction kit ver2.0)提取菌株117
‑
3的DNA，使用细菌16S rDNA通用引物进行PCR扩增：上游引物27F:AGAG TTTG ATCM TGGC TCAG；下游引物1492R：GGTT ACCT TGTT ACGA CTT。PCR扩增反应体系(50μL)：5.0μL10
×
Taq酶缓冲液，0.4μmol/L引物，4μL 200mmol/L dNTP，40ng DNA模板,1U Taq酶(TaKaRa)，34μL ddH2O。
[0020]PCR反应按下述程序进行扩增：95℃预变性5min；95℃变性30s，55℃退火1min，72℃延伸1min，35个循环；最后72℃延伸5min。反应在Bio
‑
Rad PCR仪上进行，并通过l％琼脂糖凝胶电泳检测16S rDNA扩增片段，送交深圳华大基因科技有限公司进行测序。将测序结果与GenBank中序列进行Blast比对，结果表明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株具有α
‑
葡萄糖苷酶高抑制活性的短乳杆菌，其特征在于，所述菌株为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)117
‑
3，于2021年09月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为C...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛文娇，刘晨，丁浩，安超，马赛箭，刘瑶，
申请(专利权)人：陕西省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：