一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法技术

本发明专利技术公开了一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法，首先将积雪草原料粉末加入酸水溶液中进行加热回流提取，过滤后的提取液用碱水溶液中和，然后采用聚酰胺树脂上柱，水洗后用乙醇溶液洗脱，收集的洗脱液经浓缩、干燥后得到产品。本发明专利技术的益处在于酸水提取可以避免提取过程中使用大量的有机溶剂，且酸水提取得到的提取液颜色较浅，避免积雪草中大量的叶绿素等色素成分被提取出来，有利于提取液的后续处理和分离纯化，并且进过一步柱层析即可得到高含量的积雪草苷产品，明显优化了现有文献报道的工艺流程。了现有文献报道的工艺流程。了现有文献报道的工艺流程。

【技术实现步骤摘要】
一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法。

技术介绍

[0002]积雪草以其显著的药用价值和广泛的地理分布，越来越受到市场的关注。2020版中国药典中收录了积雪草药材，并规定其积雪草总苷含量不低于0.8％(按干燥品计)。大众接触到积雪草相关的产品多涉及到皮肤护理和烫伤手术伤口恢复等方面，这些产品中主要活性成分就是来自于积雪草中的积雪草总苷等三萜类成分，积雪草苷是其主要成分之一，积雪草苷具有神经保护、抗肿瘤、抗缺血再灌注损伤、抗支架再狭窄、保护肺脏等多方面作用。
[0003]目前关于积雪草中积雪草苷提取分离的研究很多，但基本上都用到有机溶剂提取，并采用两种或两种以上的大孔树脂等分离材料进行分离，或者用到制备色谱、膜分离等先进设备等等，这些方法涉及到的一次性投入成本较大，且现有的柱层析分离积雪草苷时，洗脱所需要的有机溶剂用量较大，还会存在生产周期较长、溶剂残留、环保等问题。
[0004]经专利技术人研究发现，积雪草中积雪草苷成分直接用水很难提取出来，这一点与文献报道的差异大，但是改用一定浓度的酸水后就可以很好地将积雪草苷成分提取出来。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于针对
技术介绍
提出一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法。
[0006]为了实现本专利技术的目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0007]一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法，包括如下步骤：
[0008]步骤一、将采摘的积雪草鲜草洗净去除杂草和泥土，晒干或烘干后粉碎，得到积雪草粉末；
[0009]步骤二、将得到的积雪草粉末，加入氢离子浓度为0.01mol/L
‑
0.08mol/L的无机酸水溶液进行加热回流提取1
‑
3次，每次提取1
‑
3h，得到的提取液合并，过滤得到总提取液；积雪草粉末与无机酸水溶液的质量体积比为1：10
‑
33g/mL；
[0010]步骤三、将总提取液的pH值调节至7，得到中和后的提取液；
[0011]步骤四、将中和后的提取液装入聚酰胺树脂柱中以0.5BV/h
‑
2.0BV/h的流速进行上柱，积雪草粉末与聚酰胺树脂的质量体积比为3:5g/mL；
[0012]步骤五、将聚酰胺树脂以纯水进行水洗，洗至流出液澄清无色，得到水洗过后的聚酰胺树脂；
[0013]步骤六、将水洗过后的聚酰胺树脂用2BV
‑
4BV的30％的乙醇水溶液进行洗脱，并收集洗脱液；
[0014]步骤七、将洗脱液浓缩，干燥，得到白色的固体或粉末状的积雪草苷产品。
[0015]进一步的，步骤二中积雪草粉末与无机酸水溶液的料液比为1:33。
[0016]进一步的，无机酸水溶液中氢离子浓度为0.03mol/L。
[0017]进一步的，步骤二中的无机酸水溶液为硫酸水溶液、盐酸水溶液或磷酸水溶液任意一种。
[0018]进一步的，步骤二中加热回流提取次数为2次，每次提取1h。
[0019]进一步的，步骤三中调节总提取液pH值的方式为：向总提取液中加入3％
‑
4％的碱水溶液进行中和直至总提取液pH值为7。
[0020]进一步的，碱水溶液为氢氧化钠水溶液或氨水溶液。
[0021]进一步的，步骤四中的聚酰胺树脂为规格为60
‑
300目的聚酰胺树脂。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0023]1、本专利技术采用的酸水提取工艺，积雪草中积雪草苷总苷的提取率可以达到70％以上，与传统的乙醇水提取的效果相当，说明采用酸水提取并不会对积雪草中积雪草苷成分造成明显的水解破坏，同时用酸水提取避免了乙醇水提取后处理比较麻烦和成本较高的弊端，本专利技术用的酸水浓度较低，也避免了对设备产生比较强的腐蚀作用。
[0024]2、用酸水提取可以避免提取过程中使用大量的有机溶剂，且酸水提取得到的提取液颜色较浅，避免积雪草中大量的叶绿素等色素成分被提取出来，有利于提取液的后续处理和分离纯化。
[0025]3、采用聚酰胺树脂进行上柱，聚酰胺树脂对于积雪草苷的吸附度较低，只需低浓度的乙醇溶液就能轻易的洗脱下来，可以避免更多其他杂质成分被洗脱出来，提高了所得产品的纯度。
[0026]4、本专利技术采用酸水提取后的提取液中和后即可直接上聚酰胺树脂柱进行分离纯化，避免了提取液的比较繁琐的中间处理，明显缩短工艺时间。且经聚酰胺树脂纯化后得到的积雪草苷产品品质好，为白色固体或粉末。
附图说明
[0027]图1为积雪草总苷的对照品色谱图；
[0028]图2为积雪草原料的色谱图；
[0029]图3为积雪草原料酸水提取液的色谱图；
[0030]图4为聚酰胺柱纯化后的积雪草苷样品色谱图；
[0031]其中：a.羟基积雪草苷；b.积雪草苷。
具体实施方式
[0032]为更进一步阐述本专利技术为达成预定目的所采用的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实例，对依据本专利技术提出的一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法，详细说明如下：
[0033](一)不同溶剂对积雪草中积雪草总苷的提取效果
[0034]称取同一积雪草原料6份，每份3g，分别加入甲醇、50％乙醇、95％乙醇、纯水、β
‑
环糊精水溶液、0.08mol/L盐酸水溶液100mL，进行回流提取1次，提取2h后过滤得到提取液，然后将各提取液分别加入质量分数3％
‑
4％的氢氧化钠溶液进行中和，并置于100mL容量瓶中
分别定容至刻度，混匀后观察溶液颜色，溶液经0.45μm滤膜过滤后，再运用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)进行定量定性分析，以积雪草总苷(积雪草苷、羟基积雪草苷)成分为参照，筛选得到更适合积雪草中积雪草总苷成分提取的溶剂体系。
[0035]经试验得到的结果如下：
[0036](1)提取液外观颜色：水提液、β
‑
环糊精水提液和50％乙醇水提液颜色相近，呈棕色或棕黄色澄清液；95％乙醇提取液与甲醇提取液均呈草绿色澄清液，其中95％乙醇提取液颜色更深；酸水提取液呈浅褐色微浑浊液。
[0037](2)薄层色谱(TLC)结果：经与积雪草总苷提取物作对照，发现水提液、β
‑
环糊精水提液几乎没有积雪草总苷成分，50％乙醇水提液、95乙醇提取液、甲醇提取液和酸水提取液均具有明显的积雪草总苷成分。
[0038](3)高效液相色谱(HPLC)检测：
[0039]1)色谱条件为：色谱柱：InertSustain色谱柱(4.6mm
×
250mm，5μm)；流动相：乙腈：甲醇：水＝26:24:50；流速：0.8mL/min；检测波长：204nm；进样量：1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从积雪草原料出发快速制备高含量积雪草苷的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一、将采摘的积雪草鲜草洗净去除杂草和泥土，晒干或烘干后粉碎，得到积雪草粉末；步骤二、将得到的积雪草粉末，加入氢离子浓度为0.01mol/L
‑
0.08mol/L的无机酸水溶液进行加热回流提取1
‑
3次，每次提取1
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3h，得到的提取液合并，过滤得到总提取液；积雪草粉末与无机酸水溶液的质量体积比为1：10
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33g/mL；步骤三、将总提取液的pH值调节至7，得到中和后的提取液；步骤四、将中和后的提取液装入聚酰胺树脂柱中以0.5BV/h
‑
2.0BV/h的流速进行上柱，积雪草粉末与聚酰胺树脂的质量体积比为3:5g/mL；步骤五、将聚酰胺树脂以纯水进行水洗，洗至流出液澄清无色，得到水洗过后的聚酰胺树脂；步骤六、将水洗过后的聚酰胺树脂用2BV
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4BV的30％的乙醇水溶液进行洗脱，并收集洗脱液；步骤七、将洗脱液浓缩，干燥，得到白色的固体或粉末状的积雪草苷产品。2.如权利要求1所述的一种从积雪草原料出发速制备高含量...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄建华，王俊杰，方会龙，谭显青，刘青，刘芳，陈小平，刘思妤，张远芳，刘泽，彭群龙，
申请(专利权)人：王俊杰，
类型：发明
国别省市：