一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法，以马棘为原料,用有机溶剂对马棘进行提取，获得羽扇豆醇，其工艺简单、生产成本低、提取效率高，羽扇豆醇作为环三萜羽扇豆烷型具有重要的药理作用，本发明专利技术从马棘中分离提取羽扇豆醇并体外试验用于抑制人乳腺癌MCF

【技术实现步骤摘要】
一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种从马棘中提取羽扇豆醇的制备方法，及其用于抑制人乳腺癌MCF
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7细胞的用途。

技术介绍

[0002]乳腺癌是乳腺腺体上皮组织中的恶性肿瘤，其在临床治疗的难度在于早期难以发现，待发现已是晚期，手术切除难以完全切除病灶，且大部分患者容易复发。化疗药物虽在乳腺癌的治疗中广泛应用，但其副作用及耐用性对患者的治疗进程及治疗效果带来的影响也不可忽视。因此，寻找毒性较低的治疗药物成为研究治疗的必然趋势。天然产物是抗肿瘤药物的重要来源，三萜化合物是植物体内重要的次生代谢产物，具有广泛的生物活性，其中五环三萜羽扇豆烷型对多种肿瘤细胞生长均表现出很强地抑制活性，同时由于毒性较低且作用机制独特，使其成为优秀的抗肿瘤先导化合物。
[0003]马棘为豆科多年生植物马棘Indigofera pseudotinctoria Matsum.的嫩枝。夏秋季采收。药材马棘(Indigogera pseudotinctoria Mats.)在《中华人民共和国药典》里没有收录，属于草药。为豆科木蓝属(Indigogera)半灌木植物，以根或全株入药，又名铁扫帚、夜关门、一味药、马胡梢、野绿豆、一味草、野绿豆、马料梢、山皂角、野蓝枝子等。其株高60～150cm，总株花序腋生，花开后较叶长，花冠淡红色或紫红色，荚果线状圆柱形，种子长圆形，花期8～9月，果期11～12月；生于海拔100～1 300m的山坡林缘及灌木丛中，广泛分布于我国江苏、安徽、浙江、江西、福建、湖南、湖北、陕西、四川、广西、贵州和云南等地。
[0004]【主要成分】胡泽华等报道，马棘枝叶中石油醚部分提取了6个成分:羽扇豆
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20(29)
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烯
‑3‑
酮、木栓酮、3，β
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乙酰氧基－齐墩果
‑
12
‑
烯
‑
11
‑
酮、3β
‑
羟基
‑5‑
烯－欧洲桤木烷醇、β
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谷甾醇和正三十烷醇。
[0005]【性味归经】味苦、涩，性平。归肺、脾、胃经。
[0006]【功效主治】清热解表、散瘀消积的功效。主治感冒发热，疔疮、毒蛇咬伤等。
[0007]羽扇豆醇作为环三萜羽扇豆烷型具有重要的药理作用，研究证实，羽扇豆醇在抗氧化、抗炎及促进皮肤伤口愈合等方面发挥重要作用。同时，羽扇豆醇在一些恶性肿瘤中表现出较好的抗癌活性。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于一种工艺简单、生产成本低、提取效率高的从马棘中提取羽扇豆醇的制备方法。
[0009]本专利技术的另一目的在于提供该提取物用于抑制人乳腺癌MCF
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7细胞的用途。
[0010]一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法：取马棘用10倍液料比的95％乙醇，浸提15天，烘干溶剂即得。
[0011]本专利技术的一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分用于抑制人乳腺癌MCF
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7细胞的用途。
[0012]本专利技术与现有技术相比，具有明显的有益效果，从以上技术方案可知：本专利技术以马棘为原料,用有机溶剂对马棘进行提取，获得羽扇豆醇，其工艺简单、生产成本低、提取效率高，羽扇豆醇作为环三萜羽扇豆烷型具有重要的药理作用，本专利技术从马棘中分离提取羽扇豆醇并体外试验用于抑制人乳腺癌MCF
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7细胞。为开发利用马棘天然活性物质开发新的抗乳腺癌药物提供了方法。
附图说明
[0013]图1为羽扇豆醇GC
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MS出峰位置图。
具体实施方式
[0014]实施例
[0015]一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法：取马棘种子用10倍液料比的95％乙醇，浸提15天，烘干溶剂即得。
[0016]试验例
[0017]1材料与方法
[0018]1.1材料与仪器
[0019]马棘种子(遵义绿普森农业科技开发有限公司提供)；羽扇豆醇标准品(≥98.0％，成都普思生物科技股份有限公司)；LC
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MS(AB SCIEX 4000Q trap LC
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MS/MS)；LC色谱柱(AcclaimTM 120C18 4.6x150mm 5μm)；GC
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MS(Thermo Scientific
TM ISQ
TM 7000单四极杆GC
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MS)；GC色谱柱(TG
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5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm)；其他所用试剂均为分析级。
[0020]1.2单因素试验
[0021]选取溶剂与时间两个因素，进行马棘种子提取单因素试验，烘干溶剂得浸膏。通过LC
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MS检测计算羽扇豆醇含量。
[0022]1.2.1LC
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MS含量检测
[0023]标准品及样品制备：精密称取4.0mg样品，溶解于1ml甲醇中，超声溶解，过0.22μm滤膜，4℃保存备用。精密称取1.0mg标准品，溶解于1ml甲醇中，配成1mg/ml浓度，过0.22μm滤膜。并依次稀释至320μg/ml、32μg/ml、16μg/ml、8μg/ml、4μg/ml、2μg/ml、1μg/ml，4℃保存备用。
[0024]LC
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MS条件：流动相：0.1％甲酸甲醇：0.1％甲酸水＝90：10、进样量：1μl、流速：0.8ml/min。羽扇豆醇的准确分子质量：426.4、母离子：453.2、子离子：435.4、DP：102、CE：32。
[0025]1.3正交试验
[0026]以单因素试验为基础，设计三因素三水平正交试验见表1，并进行全面试验。烘干样品后通过GC
‑
MS检测分析羽扇豆醇最佳提取方案及影响。
[0027]表1羽扇豆醇浸提工艺因素水平表
[0028][0029][0030]1.3.1GC
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MS成分检测
[0031]标准品及样品制备：精密称取各样品20mg，溶于1mL乙醚中，震荡溶解后过0.45μm滤膜，4℃保存备用。精密称取1.0mg标准品，溶解于1ml乙醚中，过0.45μm滤膜，4℃保存备用。
[0032]GC
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MS条件：根据唐超
[3]试验方法稍作调整，初始温度40℃，保持1min，以30℃/min升温至260℃，保持1min，再以15℃/min升温至280℃，保持10min；气化室温度；离子源温度；进样口温度；载气为高纯度氦气；体积流量：1.0mL/min；离子化模式：EI；电子能量：；溶剂延迟：12min。质谱扫描范围：m/z 40
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500。
[0033]1.3.2羽扇豆醇定性及半定量分析
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从马棘中提取含有羽扇豆醇的草药组分的制备方法：取马棘用10倍液料比的95%乙醇，浸提15天，烘干溶剂即得。2.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘年松，罗俊，江兴菊，任天和，
申请(专利权)人：遵义医药高等专科学校，
类型：发明
国别省市：