一株改善肉鸡生产性能和免疫水平的乳酸片球菌及其筛选方法与应用技术

本发明专利技术公开了一株改善肉鸡生产性能和免疫水平的乳酸片球菌及其筛选方法与应用。本发明专利技术通过改良筛选程序，并采用“体外+体内”结合策略，提供了一种新的乳酸片球菌的筛选方法以及通过该方法筛选获得的乳酸片球菌LC

【技术实现步骤摘要】
一株改善肉鸡生产性能和免疫水平的乳酸片球菌及其筛选方法与应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株改善肉鸡生产性能和免疫水平的乳酸片球菌及其筛选方法与应用。

技术介绍

[0002]在家禽饲养过程中，肠道功能尚未发育完善的雏鸡，免疫性能机能低下，极易受到致病菌、营养和环境等外部因素的干扰，是造成生长性能不佳和高死淘率的重要原因。抗生素(AGPs)曾作为促生长型添加剂被广泛应用到动物饲料中，在家禽养殖业中用以治疗和预防致病菌感染，有效提高了生产效率。然而，越来越多的研究表明，AGPs的滥用会导致耐药性问题的加剧并且造成环境中抗生素的残留，通过食物链传播进而危及人类健康，如耐药性大肠杆菌和沙门氏菌等，特别是家禽和水产养殖抗生素依赖性强的行业。欧盟成员国于2006年禁止了AGPs的使用；中国也在2020年7月1日起禁止了AGPs在动物饲料中的添加。然而，短期内也对养殖行业带来了巨大的挑战，如动物疾病感染增加、养殖生产效益降低。无抗养殖是今后畜禽业发展的必然趋势，开发寻找AGPs替代产品、减免使用已成为当务之急。
[0003]乳酸片球菌作为乳酸菌类，已被证实是一种可靠的细菌素生产菌，具有独特的抑菌性、抗炎性和抗癌性。然而目前针对乳酸片球菌在体外和体内的筛选存在“脱节”问题，具体体现为：
①
体外抑菌效能高并不一定在体内发生益生作用；
②
大部分乳酸菌的抗逆性较差；
③
鲜见该菌在肉鸡生产中的研究应用，且针对肉鸡有积极效果的乳酸片球菌菌株更为鲜见。如专利CN112226389A公开了一种三黄肉雏鸡肠道益生菌群定植培养方法，其中在筛选乳酸菌流程主要包括耐受性、产酶和产酸能力，但并未进行体外抗致病菌评价和体内评价。专利CN111011590A公开了一种含乳酸片球菌的复合益生菌制剂，可改善蛋鸡输卵管炎、提高蛋品质，但未明确对生产性能的效果评价。Wajda(Wajda S et al.The efficacy of lactic acid bacteria Pediococcus acidilactici,lactose and formic acid as dietary supplements for turkeys[J].Pol J Vet Sci,2010)将其筛选的乳酸片球菌应用于火鸡，发现提高了前12周的平均日增重，但并未见对免疫性能和肠道健康进一步评价。王利红(鸡源乳酸菌的分离筛选及其对肉鸡生产性能的影响[D].2014)曾分离筛选出一株乳酸片球菌，发现菌株显著降低了肉鸡的平均日增重和饲料转化率。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是：提供一种从健康动物肠道食糜中筛选得到具有如下性能：(a)高产有机酸、抗菌效果显著，(b)安全性高、抗逆性强，(c)提高肉鸡生长性能，(d)提高肉鸡免疫水平、改善肉鸡健康状况、降低死淘率的乳酸片球菌的方法、以及通过该方法筛选得到的菌株。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术首先提供了一株乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1。
[0006]本专利技术提供的乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1的保藏编号为CGMCC No.21345。该菌株已于2020年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；邮编：100101)。本专利技术提供的乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
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1经过了复杂的体外筛选和体内评价流程，具备安全可靠、实用高效的特性。试验结果显示，该菌株在体外具有良好的抗逆性和产酸能力，对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌具有显著的抑制效果。此外，在肉鸡试验中该菌株表现出良好的抗逆性及定植能力，具备改善菌群结构及肠道发育，修复肝脏及脾脏的病理性损伤，提升肉鸡免疫水平和生长性能的益生功能。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了一种菌剂。
[0008]本专利技术提供的菌剂的活性成分为上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或其菌悬液或其培养物或其培养液或其发酵液。
[0009]上述菌剂中，所述菌悬液的浓度为1.0
×
107～1.0
×
109CFU/mL，优选为1.0
×
108CFU/mL。
[0010]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂的新用途。
[0011]本专利技术提供了上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂在如下1)
‑
6)中任一种中的应用：
[0012]1)抑制致病菌；
[0013]2)提高动物生长性能；
[0014]3)提高动物免疫性能；
[0015]4)促进动物肠道组织发育或维持动物肠道粘膜屏障功能的完整性；
[0016]5)缓解或修复动物肝脏和/或脾脏组织的病理性损伤或保护动物肝脏和/或脾脏组织；
[0017]6)优化或改善动物肠道菌群结构。
[0018]为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了如下d1)
‑
d5)任一所述的方法：
[0019]d1)一种抑制致病菌的方法，包括如下步骤：用上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂处理病原菌，实现抑制病原菌；
[0020]d2)一种提高动物生长性能或免疫性能的方法，包括如下步骤：用上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂饲喂动物，实现动物生长性能或免疫性能的提高；
[0021]d3)一种促进动物肠道组织发育或维持动物肠道粘膜屏障功能的完整性的方法，包括如下步骤：用上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂饲喂动物，实现促进动物肠道组织发育或维持动物肠道粘膜屏障功能的完整性；
[0022]d4)一种缓解或修复动物肝脏和/或脾脏组织的病理性损伤或保护动物肝脏和/或脾脏组织的方法，包括如下步骤：用上述乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
‑9‑
1或菌剂饲喂动物，实现缓解或修复动物肝脏和/或脾脏组织的病理性损伤或保护动物肝脏和/或脾脏组织；
[0023]d5)一种优化或改善动物肠道菌群结构的方法，包括如下步骤：用上述乳酸片球菌
(Pediococcus acidilacticii)LC<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
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1，其保藏编号为CGMCC No.21345。2.一种菌剂，其活性成分为权利要求1所述的乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
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1或其菌悬液或其培养物或其培养液或其发酵液。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：所述菌悬液的浓度为1.0
×
107～1.0
×
109CFU/mL。4.权利要求1所述的乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)LC
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1或权利要求2或3所述的菌剂在如下1)
‑
6)中任一种中的应用：1)抑制致病菌；2)提高动物生长性能；3)提高动物免疫性能；4)促进动物肠道组织发育或维持动物肠道粘膜屏障功能的完整性；5)缓解或修复动物肝脏和/或脾脏组织的病理性损伤或保护动物肝脏和/或脾脏组织；6)优化或改善动物肠道菌群结构。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述致病菌包括大肠埃希氏菌、沙门氏菌、奇异变形杆菌和金黄色葡萄球菌。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述提高动物生长性能体现在如下a1)
‑
a3)中的任一种：a1)增加动物体重；a2)降低料重比；a3)降低死淘率；或，所述提高动物免疫性能体现在提高动物脾脏指数。7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述促进动物肠道组织发育和/或维持动物肠道粘膜屏障功能的完整性体现在如下b1)
‑
b5)中的任一种：b1)提高动物肠道上皮细胞排列的整齐度；b2)增加动物空肠和/或回肠的绒毛高度；b3)增加动物空肠和/或回肠的绒隐比；b4)增加动物空肠和/或回肠的肠壁厚度；b5)增加动物回肠的杯状细胞数量。8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述优化或改善动物肠道菌群结构体现在如下c1)
‑
c3)中任一种：c1)增加动物肠道的菌群丰度；c2)增加动物肠道中有益菌的比例；c3)降低动物肠道中有害菌的比例。9.如下d1)
‑
d5)任一所述的方法：d1)一种抑制致病菌的方法，包括如下步骤：用权...

【专利技术属性】
技术研发人员：李冲，邓雪娟，蔡辉益，李爽，王少龙，王腾飞，
申请(专利权)人：天津博菲德科技有限公司，
类型：发明
国别省市：