一种二萜类化合物的应用制造技术

本发明专利技术属于生物化学医药领域，公开了一种二萜类化合物的应用，所述的二萜类化合物其结构如下所示：该化合物从野甘草中提取分离得到，细胞实验证实上述化合物可显著抗胰岛细胞凋亡，在T2DM的治疗上具有重要的应用前景。重要的应用前景。重要的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种二萜类化合物的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种二萜类化合物的应用。

技术介绍

[0002]2型糖尿病(T2DM)已成为严重危害人类健康和社会经济发展的重大卫生问题。中国是世界上糖尿病患者人数最多的国家，总数已超1亿。糖尿病的大流行不仅严重危害公众健康，也给患者家庭及社会造成极大的经济负担。2015年全球糖尿病经济负担约为1.31万亿美元，到2030年预测会增加至每年2.5万亿美元。胰岛素抵抗是T2DM早期发生发展的根源，随着病程的延长，胰岛β细胞数量逐渐减少，其功能也呈进行性下降。胰岛β细胞凋亡(Pancreatic IsletβCells Apoptosis，PIβCA)是胰岛β细胞数量减少的最终形式，也是导致胰岛素分泌不足进而引起血糖逐渐升高的原因。尽管市售药物能够降低T2DM患者的血糖水平，但随着胰岛β细胞的凋亡导致其功能的衰退，致使患者病情逐渐加重，药物也随之失效。因此，除控制好血糖以外，使用可减少β细胞凋亡的药物是现代T2DM治疗的新核心，临床上使用的抗糖尿病药物尚无直接针对胰岛细β胞凋亡起效的药物。因此，寻找安全有效的抗胰岛β细胞凋亡药物可有效解决T2DM的治疗问题。
[0003]野甘草(Scoparia dulcis L.)系玄参科(Scrophulariaceae)野甘草属(Scoparia)植物，其枝叶嚼之有甜味而得名“冰糖草”。野甘草在我国主产于海南、广东等地区，具有清热解毒的功效，在海南黎族地区作为黎药使用。课题组调研发现，野甘草在海南全岛均有分布，资源丰富，被当地黎医用于糖尿病的防治。

技术实现思路

[0004]本专利技术提出一种二萜类化合物在制备抗胰岛细胞凋亡药物上应用。
[0005]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0006]一种二萜类化合物在制备治疗2型糖尿病药物上的应用，所述二萜类化合物的结构如式I所示：
[0007][0008]一种二萜类化合物在制备抗胰岛细胞凋亡药物上应用，所述二萜类化合物的结构
如式I所示：
[0009][0010]进一步，所述的二萜类化合物从野甘草中提取得到。
[0011]进一步，所述的胰岛细胞为MIN-6细胞。
[0012]进一步，所述的应用中，所述的二萜类化合物的浓度为25-50μM。
[0013]上述应用中，所述的二萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：
[0014](1)野甘草全株，干燥；使用乙醇加热回流提取；过滤得到野甘草总提取液，减压浓缩至无醇味，得总提取液；取所得总提取液，加入适量水溶解后，加入石油醚萃取，回收上层有机相，水层用二氯甲烷萃取后，回收下层有机相，减压浓缩，得二氯甲烷萃取物；
[0015](2)取所得二氯甲烷萃取物，使用硅胶柱层析，用石油醚和丙酮混合溶液进行梯度洗脱，按照所使用的不同梯度的洗脱液收集流份；
[0016](3)将步骤(2)中使用石油醚和丙酮体积比为100：16得到的流份上样至硅胶色谱柱上，以石油醚和二氯甲烷和丙酮的混合液为洗脱剂，以V石油醚/V二氯甲烷/V丙酮＝50:1:1-2:1:1的混合液进行梯度洗脱，将石油醚和二氯甲烷和丙酮体积比为10:1:1洗脱下来的流份进一步通过Sephadex LH-20(MeOH)柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱分离，用甲醇和水体积比为60:40的混合溶液进行洗脱，得到化合物Ⅰ。
[0017]进一步，所述步骤(2)中，所述硅胶柱层析使用硅胶干法拌样，所用硅胶粒径为200-300μM。
[0018]进一步，所述步骤(2)中，所述的梯度洗脱中，所述石油醚-丙酮体积比为依次为100:0、100:2、100:5、100:10、100:16、100:25。
[0019]进一步，所述步骤(3)中所述半制备高效液相色谱柱为ZORAX SB-phenyl。
[0020]本专利技术的有益效果：
[0021]本专利技术的化合物属于二萜类化合物，通过细胞实验表明，其具有显著的抗胰岛细胞凋亡的功效，在T2DM的治疗上具有重要的应用前景。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1为化合物Ⅰ的核磁共振碳谱；
[0024]图2为化合物Ⅰ的核磁共振氢谱；
[0025]图3为本专利技术所述的二萜类化合物Ⅰ的抗胰岛细胞凋亡图。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1本专利技术化合物的制备
[0028]取野甘草10kg，采用乙醇回流提取，提取液浓缩后，将提取物溶解于水中，然后石油醚萃取，回收上层有机相，剩下水层用二氯甲烷萃取后，回收下层有机相，减压浓缩，得二氯甲烷萃取物(180g)。
[0029]取所得二氯甲烷萃取物，使用硅胶干法拌样，加入有机溶剂使二氯甲烷萃取物溶解，与硅胶颗粒拌匀，待有机溶剂挥发干后，磨细，使用硅胶柱层析(硅胶200-300目，粒径为200-300μM)，用石油醚和丙酮混合溶液进行梯度洗脱，使用石油醚和丙酮体积比为100：16得到的流份上样至硅胶色谱柱上，以石油醚和二氯甲烷和丙酮的混合液为洗脱剂，以V石油醚/V二氯甲烷/V丙酮＝50:1:1-2:1:1的混合液进行梯度洗脱，将石油醚和二氯甲烷和丙酮体积比为10:1:1洗脱下来的流份进一步通过Sephadex LH-20(MeOH)柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱分离，用甲醇和水体积比为60:40的混合溶液进行洗脱，得到化合物Ⅰ；
[0030]本专利技术所述化合物Ⅰ的核磁共振波谱图如附图1至附图2。其波谱数据见表1。
[0031]表1本专利技术所述化合物Ⅰ的波谱数据
[0032][0033][0034]1H-NMR测试条件为600MHz，CD3OD；
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C-NMR测试条件为150MHz，CD3OD。
[0035]实施例2：本专利技术化合物抗MIN-6细胞凋亡活性实验
[0036]方法：(1)MIN6细胞复活及培养：经-80℃冰箱中取出，离心弃去上层冻存液，加入含10％胎牛血清、1％双抗的1640培养基重悬细胞，相对湿度为95％，37℃，5％CO2的孵箱中培养；视细胞生长情况，每24～36h更换新鲜培养基，待细胞生长至75％～85％，予以传代或冻存。(2)二萜类化合物干预模型组(PA)培养：MIN6细胞增值的分组：将生长良好的MIN6细胞，均匀接种到96孔板中，按5
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二萜类化合物在制备治疗2型糖尿病药物上的应用，其特征在于，所述二萜类化合物的结构如式I所示：2.一种二萜类化合物在制备抗胰岛细胞凋亡药物上应用，其特征在于，所述二萜类化合物的结构如式I所示：3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的胰岛细胞为MIN-6细胞。4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的应用中，所述的二萜类化合物的浓度为25-50μM。5.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的二萜类化合物从野甘草中提取得到。6.如权利要求1、2或者5所述的应用，其特征在于，所述的二萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：(1)野甘草全株，干燥；使用乙醇加热回流提取；过滤得到野甘草总提取液，减压浓缩至无醇味，得总提取液；取所得总提取液，加入适量水溶解后，加入石油醚萃取，回收上层有机相，水层用二氯甲烷萃取后，回收下层有机相，减压浓缩，得二氯甲烷萃取物；(2)取所得二氯甲烷萃取物，使用硅胶柱层析，用石油醚和丙酮混合溶液进行梯度洗脱，按照所使用的不同梯度的洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：董琳，孙万莹，张勇，张小坡，张彩云，
申请(专利权)人：海南医学院，
类型：发明
国别省市：