使用改进的氧化方案制备寡核苷酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种用于产生混合的P＝O/P＝S主链寡核苷酸的方法，所述方法包括使用通过将碘、有机溶剂和水混合得到的氧化溶液，根据方案使式I的中间体亚磷酸三酯化合物选择性地氧化成式II的磷酸二酯化合物，其特征在于，所述氧化溶液已经熟化一个时间段，所述时间段足以使所述式I的亚磷酸三酯化合物选择性地氧化成所述式II的磷酸二酯化合物而不氧化硫代磷酸酯核苷酸间键合。酯核苷酸间键合。酯核苷酸间键合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用改进的氧化方案制备寡核苷酸的方法
[0001]本专利技术涉及一种生产混合的P＝O/P＝S主链寡核苷酸的新方法，包括根据方案将式I的中间体亚磷酸三酯化合物氧化成式II的磷酸二酯化合物
[0002][0003]其中氧化遵循特定的氧化方案。
[0004]寡核苷酸合成在原理上是将核苷酸残基逐步添加到生长链的5'
‑
末端，直到组装出所需的序列。
[0005]通常，每次添加都称为合成循环，且在原理上由化学反应组成
[0006]a1)将固相支持物上受保护的羟基基团解封，
[0007]a2)将作为活化亚磷酰胺的第一个核苷与固相支持物上的游离羟基偶联，
[0008]a3)氧化或硫化相应的P
‑
连接核苷(亚磷酸三酯)以形成相应的磷酸二酯(P＝O)或相应的硫代磷酸酯(P＝S)；
[0009]a4)任选地，将固相支持物上的任何未反应的羟基封端；
[0010]a5)使附着在固相支持物上的第一个核苷的5'羟基解封；
[0011]a6)将作为活化的亚磷酰胺的第二个核苷偶联以形成相应的P
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于产生混合的P＝O/P＝S主链寡核苷酸的方法，所述方法包括使用通过将碘、有机溶剂和水混合得到的氧化溶液，根据方案使式I的中间体亚磷酸三酯化合物氧化成式II的磷酸二酯化合物，其特征在于，所述氧化溶液已经熟化一个时间段，所述时间段足以使所述式I的亚磷酸三酯化合物选择性地氧化成所述式II的磷酸二酯化合物而不氧化硫代磷酸酯核苷酸间键合。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述有机溶剂是吡啶或C1‑6烷基取代的吡啶。3.根据权利要求2所述的方法，其中吡啶或C1‑6烷基取代的吡啶与水的体积比为从1:1至20:1，优选地从5:1至15:1，更优选地为9:1。4.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述氧化溶液中的碘浓度为10mM至100mM，更优选地为20mM至50mM。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的方法，其中所述氧化溶液的熟化在20℃至100℃的温度发生，优选地在30℃至60℃的温度发生。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：