多瘤病毒中和抗体制造技术

本发明专利技术涉及抗VP1抗体、抗体片段及其在预防和治疗多瘤病毒感染和相关疾病中的用途。防和治疗多瘤病毒感染和相关疾病中的用途。防和治疗多瘤病毒感染和相关疾病中的用途。

【技术实现步骤摘要】
多瘤病毒中和抗体
[0001]本申请是申请日为2016年9月8日的、专利技术名称为“多瘤病毒中和抗体”的中国专利申请201680053963.5(PCT/IB2016/055339)的分案申请。


[0002]本公开涉及抗VP1抗体、抗体片段及其在降低多瘤病毒感染可能性或治疗多瘤病毒感染中的用途。

技术介绍

[0003]BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)是人多瘤病毒中首先被鉴定出的两种。这两种多瘤病毒分离自免疫抑制患者，并在1971年公开于同一期的Lancet 中(Gardner等,Lancet 1971 1:1253
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1527和Padgett等,Lancet 19711:1257
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1260)。多瘤病毒是二十面体、无包膜、双链DNA病毒。它们直径为40
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45nm，由88％蛋白质和12％DNA组成。
[0004]BKV基因组是长度约为5Kb的环状双链DNA，包含三个主要分区：早期编码区、晚期编码区和非编码控制区。早期编码区编码三种调节蛋白 (大肿瘤抗原[TAg]、小肿瘤抗原[tAg]和截短肿瘤抗原[truncTAg])，这三种调节蛋白是新感染的细胞中表达的首批病毒蛋白质，负责便于病毒DNA 复制和建立有利的细胞环境。晚期编码区编码构成病毒壳体的三种结构蛋白质(VP1、VP2和VP3)，以及在病毒复制期间的作用尚不明确的未知蛋白质(agnoprotein)。非编码控制区包含复制起点，以及驱动病毒基因产物表达的早期和晚期启动子。
[0005]在许多不同细胞类型中检测到了BKV，包括肾、膀胱和输尿管(持续感染的典型部位)上皮细胞、扁桃体组织及淋巴细胞(所提出的原发感染和传播部位)(Chatterjee等,J.Med.Virol.2000；60:353
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362,Goudsmit等,J. Med.Virol.1982；10:91
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99,Heritage等,J.Med.Virol.1981；8:143
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150, Shinohara等,J.Med.Virol.1993；41(4):301
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305)。BKV的主要细胞表面受体是神经节苷脂GT1b、GD1b和GD3，这些神经节苷脂全都具有α2,8连接唾液酸，且非常普遍，允许感染多种细胞类型(Neu等,PLos Patholog. 2013；9(10):e1003714和e1003688，还参见O
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Hara等,Virus Res.2014； 189:208
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285)。BKV的无包膜二十面体病毒粒子由三种不同病毒蛋白质组成：360个拷贝排列为72个五聚体的主要病毒壳体蛋白质VP1及72个拷贝次要病毒壳体蛋白质VP2和VP3的组合，每个VP1五聚体结合一个VP2 或VP3分子。仅VP1在进入时暴露于病毒粒子表面，每个五聚体具有神经节苷脂受体的五个低亲和力结合部位。VP1五聚体与细胞表面神经节苷脂受体的结合通过胞膜窖介导的胞吞途径起始内化，随后将病毒运输至内质网，最终运输至细胞核(Tsai and Qian,J.Virol 2010；84(19):9840
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9852)。
[0006]人多瘤病毒BK(BKV)感染基本无处不在，估计全球80％至90％之间的人群受感染(Knowles W.A.,Adv.Exp.Med.Biol.2006；577:19
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45)。原发感染最常发生在儿童期(即10岁之前)，引起轻度、非特异性、自限性疾病或完全无症状。持续感染在肾小管、输尿管和膀胱上皮细胞中建立，并被免疫系统有效控制。具有免疫能力的成人尿中偶发暂时性无症状
性病毒脱落，但不引起疾病或后果。但是，免疫功能受损，尤其是肾或造血干细胞移植后免疫抑制可导致不受控的BKV复制，最终引起BKV相关肾病 (BKVAN)或出血性膀胱炎(HC)、膀胱疼痛疾病。还没有针对BKV的有效抗病毒治疗，目前的标准治疗是降低免疫抑制，而降低免疫抑制提高了急性排斥的风险。即使用目前更激进的方法来监测和干预，也有至多10％的肾移植受体将发展BKVAN，那些患者中的15
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30％将由于BKVAN而遭受移植物丢失。在检测到BKV病毒血症(viremia)时进行免疫抑制方案降低的那些患者中，至多30％将因此而出现急性排斥发作。
[0007]虽然BKV最先描述于1971年(上文)，但直到20世纪90年代，文献中才将BK相关肾病(BKVAN)报道为肾移植损伤的原因(Purighalla等,Am. J.Kidney Dis.1995；26:671
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673和Randhawa等,Transplantation 1999； 67:103
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109)。在BKVAN的早期治疗中，BK测试阳性具有严重后果，超过50％的患者具有移植物功能障碍和移植物丢失(Hirsch等,New Engl.J. Med.2002；347:488
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496)。BK病毒复活可始于移植后，移植后3个月在约30％
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50％的患者中可见(Bressollette
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Bodin等,Am J.Transplant.2005； 5(8):1926
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1933和Brennan等,Am.J.Transplant.2004；4(12):2132
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2134)。 BK病毒复活可通过先是尿中、然后是血浆中、最后是肾中的病毒和病毒 DNA而观察到(Brennan等,Am.J.Transplant.2005；5(3):582
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594和Hirsch 等,N Eng.J.Med.2002；347(7):488
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496)。约80％的肾移植患者尿中有BK 病毒(BK病毒尿症(viruria))，这些患者中的5
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10％进展至BKVAN(Binet 等,Transplantation 1999；67(6):918
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922和Bressollette
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Bodin等,Am J. Transplant.2005；5(8):1926
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1933)。BKV影响肾小管上皮细胞，导致伴随基底膜剥落的坏死和溶解破坏，使肾小管液累积在间质组织中，引起间质纤维化和肾小管萎缩(Nickeleit等,J.Am.Soc.Neprol.1999； 10(5):1080
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1089)，它们全都可以影响移植物的状态。患者可出现肾功能恶化、肾小管
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间质性肾炎和输尿管狭窄(Garner等,Lancet 1971； 1(7712):1253
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1257和Hirsch Am.J.Transplant 2002；2(1)25
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30)。
[0008]BKV还可以在免疫受损宿主中引起肺炎、视网膜炎和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：(i)含有(a)SEQ ID NO:186的HCDR1(CDR
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互补决定区)、(b)SEQ ID NO:187的HCDR2、(c)SEQ ID NO:188的HCDR3的重链可变区，及含有(d)SEQ ID NO:196的LCDR1、(e)SEQ ID NO:197的LCDR2和(f)SEQ ID NO:198的LCDR3的轻链可变区。2.抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：与SEQ ID NO:192至少95％同一性的重链可变区(vH)，及与SEQ ID NO:202至少95％同一性的轻链可变区(vL)。3.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:192至少96％同一性的重链可变区(vH)或与SEQ ID NO:202至少96％同一性的轻链可变区(vL)，或与两者具有至少96％同一性。4.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:192至少97％同一性的重链可变区(vH)或与SEQ ID NO:202至少97％同一性的轻链可变区(vL)，或与两者具有至少97％同一性。5.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:192至少98％同一性的重链可变区(vH)或与SEQ ID NO:202至少98％同一性的轻链可变区(vL)，或与两者具有至少98％同一性。6.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:192至少99％同一性的重链可变区(vH)或与SEQ ID NO:202至少99％同一性的轻链可变区(vL)，或与两者具有至少99％同一性。7.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:192相同的重链可变区(vH)或与SEQ ID NO:202相同的轻链可变区(vL)，或与两者相同。8.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中VH包含SEQ ID NO:192或其修饰，其中所述修饰选自A12V,S23T,I69V,M71I和T85S；且其中VL包含SEQ ID NO:202。9.权利要求8的抗体或其抗原结合片段，其中VH包含SEQ ID NO:192及其修饰，其中所述修饰包含A12V,S23T,I69V,M71I或T85S；且其中VL包含SEQ ID NO:202。10.权利要求2的抗体或其抗原结合片段，其中VH包含SEQ ID NO:192，且VL包含SEQ ID NO:202。11.权利要求1的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人改造抗体、人抗体、单链抗体(scFv)或抗体片段。12.权利要求11的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段糖基化减少或无糖基化或低岩藻糖基化。13.药物组合物，其包含权利要求12的多种抗体或其抗原结合片段，其中组合物中至少0.5％、1％、2％、3％或5％的抗体具有α2,3连接的唾液酸残基。14.药物组合物，其包含权利要求12的多种抗体或其抗原结合片段，其中没有一种抗体包含等分GlcNAc。15.药物组合物，其包含权利要求1
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14任一项的抗体或其抗原结合片段，，并进一步包含可药用载体。16.权利要求15的药物组合物，其中可药用载体包含组氨酸、聚山梨酯和糖。17.权利要求16的药物组合物，其中糖是蔗糖。
18.药物组合物，其包含权利要求1
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14任一项的抗体或其抗原结合片段，其中将组合物制备为冻干物。19.权利要求1<...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：