抗α-突触核蛋白的单克隆抗体的制备及其应用制造技术

本发明专利技术公开了抗α

【技术实现步骤摘要】
抗
α
‑
突触核蛋白的单克隆抗体的制备及其应用


[0001]本专利技术属于细胞生物技术、免疫学领域，涉及抗α
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突触核蛋白的单克隆抗体的制备及其应用。

技术介绍

[0002]α
‑
突触核蛋白(α
‑
synuclein，SNCA) 是位于4号常染色体上长臂 q21
‑
23 上的 SNCA 基因所编码形成的蛋白，是一种由140 个氨基酸残基组成单体小分子可溶性蛋白，呈囊泡结合型或膜结合型状态，主要存在于突触前神经末梢（MAROTEAUX L, CAMPANELLI JT, SCHELLER RH. Synuclein: a neuron
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specific protein localized to the nucleus and presynaptic nerve terminal [J]. J Neurosci, 1988, 8(8): 2804
‑
2815.）。α
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突触核蛋白(α
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synuclein，SNCA) 是一种结构高度保守且具有一定神经特异性的蛋白质家族。α
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突触核蛋白是最先报道的与家族性帕金森病(Parkinson's disease，PD)有关的基因，大量表达于PD患者脑内的黑质、丘脑、海马、杏仁核、胼胝体和尾状核中，占脑内可溶性蛋白的0.05%；SNCA 基因的翻译产物α
‑
突触核蛋白结构是一种天然的非折叠蛋白，在正常生理状况下可形成稳定的α
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螺旋结构，具有特定的生理功能，参与了突触的发育形成、突触功能、突触可塑性及突触囊泡的分泌，在多巴胺能神经元中参与多巴胺神经递质的调节。而在病理条件下，可选择性在神经元的胞体中形成路易小体，进一步损害一些神经元，但在其附近的神经元并未显示出有包涵体形成的迹象（SURMEIER DJ, GUZMAN JN, SANCHEZ
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PADILLA J. Calcium, cellular aging, and selective neuronal vulnerability in Parkinson's disease [J]. Cell Calcium, 2010, 47(2): 175
‑
182）。
[0003]α
‑
突触核蛋白构成的病理性包涵体常见于帕金森病（Parkinson s disease，PD）、路易体痴呆（dementia with Lewy bodies，DLB）、 多系统萎缩（multiple systematrophy，MSA）以及一些罕见疾病，由于这些疾病中突触核蛋白的异常聚集，因此它们统称为α
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突触核蛋白病。
[0004]α
ꢀ‑
突触核蛋白是开发α
ꢀ‑
突触核蛋白病(例如帕金森病)的治疗剂的靶标。主要的开发策略包括抑制聚集体形成、基因沉默和去除聚集体。目前针对α
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syn的抗体有针对不同聚集状态的α
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syn的抗体(抗单体，抗寡聚体，抗纤维化抗体)；α
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syn分为三个结构域，N端，NAC区及C端，所以也有针对识别α
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syn不同区域的抗体(抗N端，抗C端，抗NAC区抗体)，但是目前均没有应用到临床上。

技术实现思路

[0005]为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于制备抗α
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突触核蛋白的单克隆抗体及其应用。
[0006]本专利技术的第一方面提供了一种抗α
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突触核蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体包含重链互补决定区和/或轻链互补决定区；所述重链互补决定区包含：SEQ ID NO.1的氨基酸序列的CDR
‑
H1、SEQ ID NO.2的氨基酸序列的CDR
‑
H2以及SEQ ID NO.3的氨基酸序列的
CDR
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H3；所述轻链互补决定区包含：包含SEQ ID NO.11的氨基酸序列的CDR
‑
L1、包含SEQ ID NO.12的氨基酸序列的CDR
‑
L2以及包含SEQ ID NO.13的氨基酸序列的CDR
‑
L3。
[0007]进一步，所述单克隆抗体还包含重链框架区和/或轻链框架区，所述重链框架区包含：SEQ ID NO.4的氨基酸序列的FR1、SEQ ID NO.5的氨基酸序列的FR2、SEQ ID NO.6的氨基酸序列的FR3、SEQ ID NO.7的氨基酸序列的FR4；所述轻链框架区包含：SEQ ID NO.14的氨基酸序列的FR1、SEQ ID NO.15的氨基酸序列的FR2、SEQ ID NO.16的氨基酸序列的FR3、SEQ ID NO.17的氨基酸序列的FR4。
[0008]进一步，所述单克隆抗体包含：（a）与SEQ ID NO.9的氨基酸序列具有至少90%，优选95%序列同一性的重链可变区序列；（b）与SEQ ID NO.19的氨基酸序列具有至少90%，优选95%序列同一性的轻链可变区序列；或者（c）如（a）中的重链可变区序列和如（b）中的轻链可变区序列。
[0009]进一步，所述单克隆抗体包含抗体重链恒定区和/或抗体轻链恒定区的全部或者部分。
[0010]本专利技术的第二方面提供了核酸分子，所述核酸分子编码本专利技术第一方面所述的单克隆抗体或其功能片段。
[0011]进一步，编码重链可变区的CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3核酸分子具有与SEQ ID NO.21
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23至少90%，优选95%序列的同一性的序列；编码轻链可变区的CDR
‑
L1、CDR
‑
L2、CDR
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L3核苷酸序列如SEQ ID NO.31
‑
33至少90%，优选95%序列的同一性的序列。
[0012]进一步，编码重链可变区框架区FR1、FR2、FR3和FR4的核酸分子具有与SEQ ID NO.24、25、26、27所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列；编码轻链可变区框架区FR1、FR2、FR3和FR4的核酸分子具有与SEQ ID NO.34、35、36、37所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列。
[0013]进一步，编码重链可变区的核酸分子具有与SEQ ID NO.29所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列同一性的序列；编码轻链可变区的核酸分子具有与SEQ ID NO.39所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列同一性的序列。
[0014]进一步，编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示，编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗α
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突触核蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包含重链互补决定区和/或轻链互补决定区；所述重链互补决定区包含：SEQ ID NO.1的氨基酸序列的CDR
‑
H1、SEQ ID NO.2的氨基酸序列的CDR
‑
H2以及SEQ ID NO.3的氨基酸序列的CDR
‑
H3；所述轻链互补决定区包含：包含SEQ ID NO.11的氨基酸序列的CDR
‑
L1、包含SEQ ID NO.12的氨基酸序列的CDR
‑
L2以及包含SEQ ID NO.13的氨基酸序列的CDR
‑
L3。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体还包含重链框架区和/或轻链框架区，所述重链框架区包含：SEQ ID NO.4的氨基酸序列的FR1、SEQ ID NO.5的氨基酸序列的FR2、SEQ ID NO.6的氨基酸序列的FR3、SEQ ID NO.7的氨基酸序列的FR4；所述轻链框架区包含：SEQ ID NO.14的氨基酸序列的FR1、SEQ ID NO.15的氨基酸序列的FR2、SEQ ID NO.16的氨基酸序列的FR3、SEQ ID NO.17的氨基酸序列的FR4。3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包含：（a）与SEQ ID NO.9的氨基酸序列具有至少90%序列同一性的重链可变区序列；（b）与SEQ ID NO.19的氨基酸序列具有至少90%序列同一性的轻链可变区序列；或者（c）如（a）中的重链可变区序列和如（b）中的轻链可变区序列。4.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：马咏翔，庞晓静，
申请(专利权)人：北京凯祥弘康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：