小鼠杂交瘤细胞及用于区分检测恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断试条制造技术

本发明专利技术提供了八个小鼠杂交瘤细胞。同时提供了一种快速诊断试条，由样品垫、胶体金探针垫、纤维素膜和吸水垫组成，胶体金上含有胶体金标记抗体，纤维素膜上设有四条检测线、一条质控线，胶体金探针垫包含由胶体金标记的特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体和胶体金标记的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶、三日疟原虫乳酸脱氢酶、卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体，四条检测线包括特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体、特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体、特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体和特异性结合四种疟原虫的乳酸脱氢酶的单克隆抗体。本发明专利技术具有简便性、敏感性、特异性和快速性的优点。优点。优点。

【技术实现步骤摘要】
小鼠杂交瘤细胞及用于区分检测恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断试条


[0001]本专利技术属于生物工程领域，涉及一种胶体金免疫层析试纸条，具体来说是一种小鼠杂交瘤细胞和基于检测循环抗原的可以快速检测四种人体疟原虫(恶性疟、间日疟、三日疟和卵形疟)的免疫试纸条。

技术介绍

[0002]疟疾是严重危害人类健康的寄生虫病之一，是世界卫生组织列为的全球三大公共卫生问题之一。2019年，全球仍有87个国家流行疟疾，累计报告病例2.29 亿例，较2018年增加约100万例，40.9万人死于疟疾。中国自古以来一直都是疟疾流行区，严重危害了人民生命和健康安全，制约了社会经济发展。2011～2016年我国报告的输入性疟疾病例数累计近2万例，平均每年3000例以上。非洲和东南亚是我国输入性疟疾的主要来源地，输入性病例虫种多样，4种人体疟原虫(恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫)均有发现。输入性疟疾不仅严重危害我国人民的身体健康和生命安全，同时存在很大的继发传播风险，对我国巩固消除疟疾工作提出了挑战。
[0003]利用免疫层析技术发展起来的免疫层析试纸条(Immunochromatographictrips；ICT，又简称Dipstick)，优点是操作简便，耗时短，判断直观明确，不依赖专门仪器设备和专业技术经验。目前已有多种疟疾诊断的免疫试纸条产品问世并广泛在实验室和现场使用，如CareStart、Wondfo、Binax NOW等。但这些产品都只能区分恶性疟和非恶性疟，不能区分其他三种人体疟原虫(间日疟、卵形疟、三日疟)，给基层现场的诊断带来了不便，不利于病人的对症治疗和流行病控制策略的及时制定和实施。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种小鼠杂交瘤细胞及用于区分检测恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断试条，所述的这种小鼠杂交瘤细胞及用于区分检测恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断试条要解决现有疟疾快诊技术不能有效区分疟疾感染各病原体种属的技术问题。
[0005]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17412。
[0006]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体。
[0007]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17411。
[0008]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体。
[0009]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17410。
[0010]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0011]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17409。
[0012]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0013]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22399。
[0014]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0015]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22398。
[0016]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0017]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22400。
[0018]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0019]本专利技术提供了一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22397。
[0020]本专利技术还提供了上述的小鼠杂交瘤细胞产生的特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。
[0021]本专利技术还提供了上述的用于区分检测恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断免疫试条，包括一个样品垫、纤维素膜和吸水垫，所述的样品垫和纤维素膜之间设置有一个胶体金探针垫，所述的胶体金探针垫和样品垫、纤维素膜之间紧密连接，所述的纤维素膜的另外一侧设置有吸水垫，所述的纤维素膜的另外一侧和所述的吸水垫紧密连接，所述的胶体金探针垫上设置有胶体金标记探针，所述胶体金探针是由胶体金标记的特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体、胶体金标记的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体、胶体金标记的特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体和胶体金标记的特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体的混合物组成，胶体金标记的特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.17412的小鼠杂交瘤细胞产生，胶体金标记的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体由保藏号为 CGMCC No.17410的小鼠杂交瘤细胞产生，胶体金标记的特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.22399的小鼠杂交瘤细胞产生，胶体金标记的特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体由保藏号为 CGMCC No.22400的小鼠杂交瘤细胞产生，所述纤维素膜上从靠近胶体金探针垫的一端开始依次设置有第1检测线、第2检测线、第3检测线和第4检测线，其中，第1检测线为特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.17411的小鼠杂交瘤细胞产生；第2检测线为特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.22398的小鼠杂交瘤细胞产生；第3检测线为特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体，由保藏号为 CGMCC No.22397的小鼠杂交瘤细胞产生；第4检测线为特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.17409的小鼠杂交瘤细胞产生；在第4检测线和吸水垫之间的纤维素膜上设置一条质控线，由可以结合胶体金标记探针的二抗或链球菌G蛋白或金黄色葡萄球菌A蛋白组成。
[0022]具体的，上述胶体金标记的恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ单抗、疟原虫乳酸脱氢酶单抗、三日疟原虫乳酸脱氢酶单抗和卵形疟原虫乳酸脱氢酶单抗探针的体积比为1:1:1:1。
[0023]进一步的，所述的免疫层析试条背面设置一个起支撑作用的背板。
[0024]进一步的，将所述带有背板的免疫层析试条装入一个盒体中，所述的盒体对应于样品垫的部位设有加样孔，所述的盒体对应于检测线和质控线的部位设有观测窗以及检测线和质控线的位置标识。
[0025]具体的，所述纤维素膜可以是硝酸纤维素膜(NC膜)或醋酸纤维素膜或混合膜；所述胶体金探针垫为玻璃纤维膜或聚脂纤维膜；所述样品垫可以是玻璃纤维或聚酯纤维或混合纤维；所述吸水垫由吸水材料制备，如吸水纸。
[0026]具体的，所述纤维素膜宽度控制在20～30mm；所述吸水垫可宽度为20～40mm，所述胶体金探针垫的宽度为5～10mm；所述样品垫宽度为10～40mm。
[0027]进一步的，第1、第2、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17412。2.权利要求1所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体。3.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17411。4.权利要求3所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体。5.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17410。6.权利要求5所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。7.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.17409。8.权利要求7所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。9.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22399。10.权利要求9所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。11.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22398。12.权利要求11所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合三日疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。13.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22400。14.权利要求13所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。15.一种小鼠杂交瘤细胞，其保藏号为CGMCC No.22397。16.权利要求15所述的小鼠杂交瘤细胞产生的可以特异性结合卵形疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体。17.一种用于区分检测四种恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟的快速诊断试条，其特征在于：包括一个样品垫、纤维素膜和吸水垫，所述的样品垫和纤维素膜的一侧之间设置有一个胶体金探针垫，所述的胶体金探针垫和样品垫、纤维素膜之间紧密连接，所述的纤维素膜的另外一侧设置有吸水垫，所述的纤维素膜的另外一侧和所述的吸水垫紧密连接，所述的胶体金探针垫上设置有胶体金标记探针，所述胶体金探针是由胶体金标记的特异性结合恶性疟原虫的富组蛋白Ⅱ的单克隆抗体、胶体金标记的特异性结合疟原虫乳酸脱氢酶的单克隆抗体、胶体金标记的特异性结合...

【专利技术属性】
技术研发人员：石锋，汪俊云，高春花，杨玥涛，贾孝凯，危芙蓉，王颖，张璟，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心，
类型：发明
国别省市：