【技术实现步骤摘要】
一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用
[0001]本专利技术涉及单克隆抗体制备领域，具体地，是一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用。
技术介绍
[0002]人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)是由585个氨基酸组成的单链无糖基化的蛋白质，分子量约66.5KD。HSA于肝脏中合成，是血浆中含量最丰富的蛋白质(血浆中的HSA下文简称pHSA)，约占血浆总蛋白的60％。其主要功能是运输脂肪酸、氨基酸等营养物质，同时能够维持血液渗透压的平衡，稳定血浆内环境。临床上用于治疗休克、烧伤以及大出血导致的血液流失，同时也是国家的储备药物之一。一直以来HSA的生产是以人血液为原料通过低温乙醇法进行提取的，但是人血来源有限，且血液可能携带乙肝、艾滋等病毒，引发病毒传染的安全性问题。
[0003]DNA重组与合成技术的发展，使重组人血清白蛋白(rHSA)的生产和应用得到实现。以毕赤酵母作为蛋白表达系统，高密度发酵生产白蛋白，不仅可以避免原料紧张和病毒污染等问题，还可以实现大规模生产。HSA的临床使用剂...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种可分泌抗人血清白蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C2020105。2.一种如权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的抗人血清白蛋白的单克隆抗体。3.一种制备如权利要求1所述的杂交瘤细胞株的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将SP2/0小鼠骨髓瘤细胞，与用人血清白蛋白作为抗原免疫的Balb/c小鼠的脾脏细胞融合，在选择培养基中进行杂交瘤细胞筛选；优选地，所述的选择培养基为HAT培养基；2)将步骤1)中筛选出的阳性杂交瘤细胞在含FBS的基础培养基中进行筛选，获得稳定分泌抗人血清白蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；优选地，所述的基础培养基为HAT培养基。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的FBS的体积分数大于等于20％；筛选的次数大于等于二次、小于等于六次；优选地，所述步骤2)中的FBS的体积分数为20％，筛选的次数为四次。5.一种纯化人血清白蛋白的免疫亲和层析方法，其特征在于，所述的免疫亲和层析方法包括以下步骤：(1)将如权利要求2所述的单克隆抗体与琼脂糖凝胶，优选CNBr-Sepharose 4B，偶联后装柱、封闭并洗涤，获得制备好的免疫亲和层析柱；(2)平衡后，将含有人血清白蛋白的上样液上样至制备好的免疫亲和层析柱，洗涤并洗脱获得含高纯度目标蛋白的洗脱液；其中，所述人血清白蛋白例如血浆人血清白蛋白或重组人血清白蛋白；(3)将获得的含高纯度目标蛋白的洗脱液用中和缓冲液调整pH为中性并浓缩即得。6.如权利要求5所述的免疫亲和层析方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述单克隆抗体优选用偶联缓冲液透析过夜；所述偶联缓冲液为0.1M NaHCO3，0....
【专利技术属性】
技术研发人员：谢丽萍，胡又佳，许人仁，徐磊，韩姝，龚桂花，张伟，
申请(专利权)人：中国医药工业研究总院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。