刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品技术

本发明专利技术涉及刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品。刺梨抗氧化寡肽具有如SEQ ID NO：1、2或3所示的氨基酸序列；制备方法包含：将刺梨鲜果进行打浆和第一离心处理，收集第一上清液，将所述第一上清液进行蛋白沉降处理及第二离心处理，收集沉淀，将所述沉淀进行纯化处理，以得到上述刺梨抗氧化寡肽；上述寡肽或上述方法制备的寡肽在制备抗氧化制品中的应用；抗氧化制品包括：刺梨抗氧化寡肽。本发明专利技术制备的抗氧化寡肽抗氧化能力强，益于人体健康。康。

【技术实现步骤摘要】
刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品。

技术介绍

[0002]刺梨(Rosa roxburghii Tratt)是蔷薇科多年生落叶灌木缫丝花的果实，是我国西南地区特有的水果，主要富含SOD、V
C
、黄酮、多糖、多酚、微量元素等都种活性成分。每100g刺梨鲜果中V
C
含量3730mg，是苹果的550倍，猕猴桃的6
‑
10倍；每100g刺梨鲜果中黄酮含量2909mg，超过氧化物歧化酶SOD含量32.1mg，SOD活性为4500～5500U/g，被誉为“三王水果”。研究表明：刺梨具有抗氧化、延缓衰老、抑菌、健胃消食、调节机体免疫功能、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗动脉粥样硬化、解毒、解酒护肝等功效，如何合理利用刺梨开发抗氧化产品成为研究热点。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本专利技术提供了一种刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品，本专利技术制备的刺梨抗氧化寡肽的抗氧化能力强，益于人体健康；该制备方法产量高，可进行工业化大批量生产。在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种刺梨抗氧化寡肽。根据本专利技术的实施例，所述刺梨抗氧化寡肽具有如SEQ ID NO：1、2或3所示的氨基酸序列。
[0004]在研究过程中，专利技术人发现，刺梨中具有超高含量及活性的SOD，在刺梨贮藏过程中，无法从刺梨中分离纯化刺梨SOD，但是却检测出较高的SOD活性，进而，推测刺梨SOD可能降解为具有SOD活性的肽段。进一步地，专利技术人通过对刺梨中的寡肽进行提取，获得上述刺梨抗氧化寡肽，其抗氧化能力强，且具有的较高的超氧阴离子、羟自由、DPPH自由基清除能力。
[0005]在本专利技术的另一方面，本专利技术提出了一种制备上述刺梨抗氧化寡肽的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包含如下步骤：将刺梨鲜果进行打浆和第一离心处理，收集第一上清液；将所述第一上清液进行蛋白沉降及第二离心处理，收集沉淀；将所述沉淀进行纯化处理，以便得到上述刺梨抗氧化寡肽。上述制备方法操作简单，生产成本低，可进行工业化大批量生产。
[0006]根据本专利技术的实施例，所述打浆处理之前，将缓冲液与所述刺梨鲜果进行混合。
[0007]根据本专利技术的实施例，所述刺梨鲜果与所述缓冲液的质量体积比为1：(0.5～2)，单位为g/mL，所述缓冲液的pH值为8.5
‑
9.5，打浆时间为2～5min。
[0008]根据本专利技术的实施例，进行所述第一离心处理之前，将所述打浆处理所得浆液于0～25℃放置2～6h，再将所得浆液进行过滤处理，收集滤液。
[0009]根据本专利技术的实施例，所述第一离心处理的离心力为10000～12000g，时间为10～20min，温度为0～4℃。
[0010]根据本专利技术的实施例，所述蛋白沉降处理采用的沉降剂选自硫酸铵，所述硫酸铵的饱和度为60～80％，反应温度为0～4℃，时间为6～12h。
[0011]根据本专利技术的实施例，所述第二离心处理的离心力为10000～12000g，时间为10～20min，温度为0～4℃。
[0012]根据本专利技术的实施例，所述纯化处理包括：将所述沉淀进行复溶和透析处理，收集透过液；将所述透过液进行除杂、酶解和超滤离心处理，收集过滤液，得到含有刺梨抗氧化寡肽的混合物。
[0013]根据本专利技术的实施例，所述复溶处理采用的复溶剂选自Tris
‑
Hcl溶液，pH值为8.5
‑
9.5。
[0014]根据本专利技术的实施例，所述透析处理采用的滤膜孔径为1
‑
10KDa。
[0015]根据本专利技术的实施例，所述除杂处理包括将活性炭与所述透过液进行混合，所述活性炭与所述透过液的重量体积比为(0.05～0.1):1，混合时间为2～4h，再将所得混合液于0～4℃、5000～10000g的条件下离心10～20min，收集上清液。
[0016]根据本专利技术的实施例，所述酶解处理采用的酶选自木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的至少之一，酶活力为50～100U/g。
[0017]根据本专利技术的实施例，所述酶解处理的反应温度为40～55℃，反应时间为2～6h。
[0018]根据本专利技术的实施例，所述超滤离心处理采用的超滤膜孔径为1
‑
3KDa。
[0019]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种如上述刺梨抗氧化寡肽或上述方法制备的寡肽在制备抗氧化制品中的应用。本专利技术的刺梨抗氧化寡肽的抗氧化能力强，可应用于医疗卫生行业、食品保健、化妆品等众多行业。
[0020]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种抗氧化制品。根据本专利技术的实施例，所述包括：上述寡肽或上述方法制备的寡肽。上述的抗氧化制品可为但不限于口服液、饮料、药剂、化妆品。
[0021]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0022]本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
[0023]图1为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽的流程图；
[0024]图2为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽的总离子流图；
[0025]图3为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽SEQ ID NO：1的液相色谱及质谱图；
[0026]图4为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽SEQ ID NO：2的液相色谱及质谱图；
[0027]图5为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽SEQ ID NO：3的液相色谱及质谱图；
[0028]图6为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽SEQ ID NO：4的液相色谱及质谱图；
[0029]图7为实施例1制备刺梨抗氧化寡肽SEQ ID NO：5的液相色谱及质谱图。
具体实施方式
[0030]下面详细描述本专利技术的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发
明，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0031]需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本专利技术的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
[0032]本专利技术提出了一种刺梨抗氧化寡肽及其制备方法、应用和抗氧化制品，下面将分别对其进行详细描述。
[0033]刺梨抗氧化寡肽
[0034]在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种刺梨抗氧化寡肽。根据本专利技术的实施例，该刺梨抗氧化寡肽具有如SEQ ID NO：1、2或3所示的氨基酸序列。在研究过程中，专利技术人发现，刺梨中具有超高含量及活性的SOD，在刺梨贮藏过程中，无法从刺梨中分离纯化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种刺梨抗氧化寡肽，其特征在于，所述刺梨抗氧化寡肽具有如SEQ ID NO：1、2或3所示的氨基酸序列。2.一种制备权利要求1所述刺梨抗氧化寡肽的方法，其特征在于，包含如下步骤：将刺梨鲜果进行打浆和第一离心处理，收集第一上清液；将所述第一上清液进行蛋白沉降及第二离心处理，收集沉淀；将所述沉淀进行纯化处理，以便得到权利要求1所述刺梨抗氧化寡肽。3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述打浆处理之前，将缓冲液与所述刺梨鲜果进行混合；任选地，所述刺梨鲜果与所述缓冲液的质量体积比为1：(0.5～2)，单位为g/mL，所述缓冲液的pH值为8.5
‑
9.5，打浆时间为2～5min；任选地，进行所述第一离心处理之前，将所述打浆处理所得浆液于0～25℃放置2～6h，再将所得浆液进行过滤处理，收集滤液。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一离心处理的离心力为10000～12000g，时间为10～20min，温度为0～4℃。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述蛋白沉降处理采用的沉降剂选自硫酸铵，所述硫酸铵的饱和度为60～80％，反应温度为0～4℃，时间为6～12h；任选地，所述第二离心处理的离心力为10000～12000g，时间为10～20min，温度为0～4℃。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述纯化处理...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖小军，王永涛，杨焕治，赵靓，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：