一种快速提取生物核酸的样品处理方法技术

本发明专利技术提供一种快速提取生物核酸的样品处理方法——浓缩酶解法、生物核酸提取方法以及试剂盒。该方法具有下列优点：1、操作简单，细胞酶解更彻底；2、极大缩短提取时间，提高工作效率；3、提高生物核酸的产量；4、室温。室温。室温。

【技术实现步骤摘要】
一种快速提取生物核酸的样品处理方法


[0001]本专利技术属于生物工程
，具体地涉及一种生物核酸快速提取的样品处理方法、核酸提取方法及提取试剂盒。

技术介绍

[0002]随着基因组测序技术的发展，生物基因组的序列、结构和功能研究飞速发展，而获得高纯度、高含量和高完整度的生物基因组DNA是基因组测序技术得以应用的首要前提。随着生物学的发展，基因的转录产物RNA的研究也越来越受到研究者们的青睐。
[0003]越来越多的DNA、RNA以及两者共提的提取方法被开发出来。具体来说，传统的生物基因组DNA提取方法主要有CTAB和SDS法，常见的生物RNA提取方法主要有Trizol法、硫氰酸胍/酚法、SDS/酚法、盐酸胍法等。
[0004]对于生物样品核酸提取的质和量不仅与提取配方有关还与生物样品的处理方式和/或处理方法有关。于是一些生物样品的处理方法不断的涌现出来，如：机械方法，包括高速组织捣碎机、玻璃匀浆器等；物理方法，包括反复冻融法、冷热变替法、超声波法、加压破碎法等；化学及生物学法，包括有机溶剂提取法，水溶液提取法和酶法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速提取生物核酸的样品处理方法，其特征在于包括以下步骤：a)处理生物样品，包含但不限于液氮冷冻研磨法、机械研磨法、高速离心法和/或加入防止核酸降解的抑制剂等，以获得小体积的细胞和/或极细小生物组织聚集体；b)加入小体积高浓度的蛋白酶，包含但不限于，蛋白酶K，蛋白酶，消解酶，无色肽酶，溶细胞酶，溶葡萄球菌酶，溶菌酶和核酶等。2.根据权利要求1a)所述，其特征在于：对固态生物样品，加入和/或核酸降解抑制剂和/或再加入高浓度的酶，经过包含但不限于液氮冷冻研磨法、机械研磨法等，获得极细小的生物样品组织；对于液体中含有细胞的生物样品，和/或加入防止核酸降解的抑制剂，离心去除上清，获得生物样品细胞。3.根据权利要求1b)所述，其特征在于：和/或加入高浓度蛋白酶，具体来说大于0.2mg/ml，优选在2mg/ml～50mg/ml，更有选在5mg/ml～30mg/ml；所用高浓度蛋白酶体积在1ul～100ul，优选在5ul～50ul，更优选在10ul～30ul；把酶和经过步骤a)处理后的生物样品混匀，放置一段时间，优选1分钟～10分钟。更优选1分钟～3分钟。4.根据权利1实施方式，处理后的生物样品核酸提取方法包含以下步骤：A)把酶解后的生物样品与裂解液混匀；B)在含有核酸的裂解液和/或溶液和/或支化或非支化链烷醇的存在下，将释放的核酸固定到基于一种基质或一种以上基质混合物上，包含但不限于离心柱、磁球等；C)任选地洗涤固定在基质上的核酸；D)任选地洗脱结合在基质上的核酸。5.根据权利要求4B)所述，其特征在于，所述的结合试剂包含但不限于支化或非支化的链烷醇，具体说，具有1～5个碳原子的短链支化或非支化链烷醇。支化或非支化丁醇包括正丁醇、异丁醇、仲丁醇、和叔丁醇；支化或非支化戊醇包括例如正戊醇和异戊醇。优选使用选自下组的醇：甲醇、乙醇、异丙...

【专利技术属性】
技术研发人员：张怀远，丁玮云，李海文，
申请(专利权)人：汉远化生医国际科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：