一种植物组织DNA快速提取方法、提取试剂盒及提取装置制造方法及图纸

一种植物组织DNA提取方法，包括将植物组织加入研磨装置；对所述植物组织和研磨装置进行预冷，其中所述植物组织的水分在预冷后凝结，所述研磨装置在预冷后达到能够使当所述植物组织在其中研磨时水分保持凝结状态的温度；在没有液体制冷剂保护的条件下，用预冷后的研磨装置对所述植物组织进行研磨，得到植物组织粉末；对所述植物组织粉末进行DNA提取。以及用于实施该方法的提取试剂盒、提取装置。本发明专利技术提供的植物组织DNA提取方法可大大缩短操作时间，简化操作步骤，提高实验效率，且不使用有毒试剂，有利于操作者健康，减少对环境的破坏。

【技术实现步骤摘要】
一种植物组织DNA快速提取方法、提取试剂盒及提取装置
本专利技术属于生物工程
，具体地涉及一种植物组织DNA快速提取方法、提取试剂盒及提取装置。
技术介绍
随着基因组测序技术的发展，植物基因组的序列、结构和功能研究飞速发展，而获得高纯度、高含量和高完整度的植物基因组DNA是基因组测序技术得以应用的首要前提。由于植物组织中含有大量的多糖、多酚类物质以及其它结构复杂的次级代谢产物，使得植物基因组DNA的提取较微生物、动物组织或血液样品基因组提取面临更大的难度。传统的植物基因组DNA提取方法主要有CTAB和SDS法，提取步骤主要包括植物组织在液氮保护下研磨，以及之后的细胞裂解、去除杂质、DNA沉淀、漂洗和洗脱等过程。其主要是以CTAB或SDS等去污剂对细胞进行裂解后，释放出细胞中的基因组DNA；再通过氯仿和苯酚抽提或高盐沉淀的方法，去除蛋白质、多酚和多糖等杂质；然后在提取的上清液中加入适量体积的无水乙醇、异丙醇或PEG等有机溶剂将DNA沉淀或吸附在硅胶柱、离子交换柱等介质上；最后用漂洗液进行漂洗后，用低浓度盐溶液溶解或从介质上洗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物组织DNA提取方法，其特征在于包括以下步骤：/n(a)将植物组织加入研磨装置或研磨仪；/n(b)对所述植物组织和研磨装置进行预冷，其中所述植物组织的水分在预冷后凝结，所述研磨装置在预冷后达到能够使当所述植物组织在其中研磨时水分保持凝结状态的温度，在低温干燥的状态下，研磨植物组织；/n(c)在没有液体制冷剂保护的条件下，用预冷后的研磨装置对所述植物组织进行研磨，得到植物组织粉末；/n(d)用CTAB裂解法对所述植物组织粉末进行DNA提取。/n

【技术特征摘要】
1.一种植物组织DNA提取方法，其特征在于包括以下步骤：
(a)将植物组织加入研磨装置或研磨仪；
(b)对所述植物组织和研磨装置进行预冷，其中所述植物组织的水分在预冷后凝结，所述研磨装置在预冷后达到能够使当所述植物组织在其中研磨时水分保持凝结状态的温度，在低温干燥的状态下，研磨植物组织；
(c)在没有液体制冷剂保护的条件下，用预冷后的研磨装置对所述植物组织进行研磨，得到植物组织粉末；
(d)用CTAB裂解法对所述植物组织粉末进行DNA提取。


2.根据权利要求1所述的植物组织DNA提取方法，其特征在于：步骤(b)中所述预冷，是指向载有植物组织的研磨装置加入液体制冷剂；所述液体制冷剂的加入量能够使所述植物组织的水分在预冷后凝结、使所述研磨装置在预冷后达到能够使当所述植物组织在其中研磨时水分保持凝结状态的温度，且所述液体制冷剂在使植物组织和研磨装置预冷后挥发成气态而耗散。


3.根据权利要求1所述的植物组织DNA提取方法，其特征在于：步骤(c)的研磨在10分钟内，优选地在5分钟内完成。


4.根据权利要求1所述的植物组织DNA提取方法，其特征在于：步骤(d)进一步包括：
i.将植物组织粉末转移到含有第一溶液和RNA酶的容器中并混匀；
ii.加入第二溶液并混匀，离心并保留上清液；
iii.加入第三溶液并混匀，转入吸附柱中，离心弃滤液；
iv.向所述吸附柱加入第四溶液，离心弃滤液；
v.将所述吸附柱充分干燥，并转移至新的容器；
vi.向吸附柱中心滴加第五溶液，室温放置后离心，收集滤液。


5.根据权利要求4所述的植物组织DNA提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：张怀远，张俊峰，张千喜，
申请(专利权)人：汉远化生医国际科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11