黑色素瘤相关的miRNA在诊断和治疗黑色素瘤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了黑色素瘤相关的miRNA在诊断和治疗黑色素瘤中的应用，所述黑色素瘤相关的miRNA包括miR

【技术实现步骤摘要】
黑色素瘤相关的miRNA在诊断和治疗黑色素瘤中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体地，本专利技术涉及黑色素瘤相关的miRNA在诊断和治疗黑色素瘤中的应用，更具体地，本专利技术涉及黑色素瘤相关的miRNA包括miR
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1321、miR
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139
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5p。

技术介绍

[0002]黑色素瘤（Melanoma）是黑色素细胞来源的一种高度恶性的肿瘤，简称恶黑，多发生于皮肤，也可见于黏膜和内脏，近年来，黑色素瘤在世界范围内的发病率与死亡率呈明显增加的趋势，占所有恶性肿瘤的1%
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3%，但以6%
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7%的增长速度逐年递增，且发病年龄呈年轻化的趋势，为发病率增长最快的恶性肿瘤之一。黑色素瘤发病率有较明显的种族差异，在白种人中发病率最高，黄种人和黑种人发病率相对较低（Garbe C, Leiter U. Melanoma epidemiology and trends[J]. Clin Dermatol, 2009, 27(01): 3
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9），我国黑色素瘤的发病率为0.49/10万，与欧美等高发地区相比，处于相对较低的发病水平，但由于黑色素瘤的恶性程度高，易发生血液及淋巴转移，临床预后较差，且国内对黑色素瘤的分析研究相对较少，因此仍亟需对黑色素瘤的发病机制和治疗方法进行研究，进而为黑色素瘤的诊断和治疗提供新靶点。
[0003]早期黑色素瘤通过以手术为主的治疗方法其存活率可以达到90%，但恶性黑色素瘤侵袭性非常强，十分容易出现早期转移，且一旦出现转移治愈率就会很低（Russo A E, Torrisi E, Bevelacqua Y, et al. Melanoma: molecular pathogenesis and emerging target therapies[J]. International journal of oncology, 2009, 34(6): 1481
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1489.）。同时，黑色素瘤对化学治疗和放射治疗都不太敏感，晚期转移性黑色素瘤的生存率仅为10%左右，复发率更是高达60%。近年来出现了如促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）通路抑制剂，抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原
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4（CTLA
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4）和程序性细胞死亡蛋白1（PD
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1）/程序性细胞死亡配体1（PD
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L1）通路阻断剂等相关靶向治疗和生物免疫治疗，大大改善了黑色素瘤的治疗，但这些治疗有的出现治疗失败，或治疗效果不持久，或出现严重的副作用，整体的治疗效果仍不太理想，其发病机制也仍不清楚，因此，对黑色素瘤应进行进一步的研究，进一步探究黑色素瘤的发病机理和调控机制。发现与其发生和发展相关的新的靶点，能够为临床治疗黑色素瘤提供新的策略，从而可以寻找更有效、耐用和可个性化的治疗方案。
[0004]miRNA（microRNA）又称微小RNA，广泛存在于真核生物中，是一种小的内源性的、非编码RNA，在哺乳动物60%的编码蛋白基因中表达，并发挥相应的生理作用，miRNA的异常表达和异常功能与许多人类疾病的发展和进展有关，包括各种恶性肿瘤，黑色素瘤中也同样存在多种调控miRNA，因此，筛选在黑色素瘤中差异表达、调控黑色素瘤细胞生长的miRNA能为其诊断和治疗提供一种有效的方法。

技术实现思路

[0005]鉴于此，为了克服本领域目前存在的技术缺陷，本专利技术的目的在于提供黑色素瘤
相关的miRNA在诊断和治疗黑色素瘤中的应用，所述黑色素瘤相关的miRNA包括miR
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1321、miR
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139
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5p。
[0006]本专利技术的上述目的通过以下技术方案得以实现：本专利技术的第一方面提供了检测生物标志物的试剂在制备用于早期诊断黑色素瘤的产品中的应用。
[0007]进一步，所述生物标志物为miR
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1321和miR
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139
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5p。
[0008]进一步，所述试剂选自：特异性识别所述生物标志物的探针；或特异性扩增所述生物标志物的引物。
[0009]进一步，特异性扩增所述生物标志物miR
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1321和miR
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5p的引物的序列分别如SEQ ID NO:7
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SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9
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SEQ ID NO:10所示。
[0010]本专利技术中所述的生物标志物，是指在具有第二表型（例如没有疾病）的受试者和具有第一表型（例如患有疾病）的受试者之间差异表达的miRNA，具体地，与来自具有第二表型（例如没有疾病）的受试者或一组受试者的生物样品相比，它在来自具有第一表型（例如患有疾病）的受试者或一组受试者的生物样品中显著差异性地存在（即增加或减少）；生物标志物可以在任何水平上差异性地存在，但是一般以如下的水平存在，所述水平增加了至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少100%、至少110%、至少120%、至少130%、至少140%、至少150%、或更多；或一般以如下的水平存在，所述水平减少了至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、或100%（即不存在）。
[0011]本专利技术所述的miR
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1321，包括miR
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1321及其同源物、突变体、同等型，该术语涵盖全长，未加工的miR
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1321，以及源自细胞中经加工的任何形式的miR
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1321，该术语涵盖miR
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1321的天然发生变体（例如剪接变体或等位变体），本专利技术所述的miR
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1321的具体序列可在miRBase数据库(http://microrna.sanger.ac.uk/)中查询得到，在本专利技术的具体实施例中，所述miR
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431的序列如SEQ ID NO:13所示；miR
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1321的序列：ACAUUAUGAAGCAAGUAUUAUUAUCCCUGUUUUACAAAUAAGGAAAUAAACUCAGGGAGGUGAAUGUGAUCAAAGAUAG（SEQ ID NO:13）本专利技术所述的miR
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5p，包括miR
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5p及其同源物、突变体、同等型，该术语涵盖全长本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测生物标志物的试剂在制备用于早期诊断黑色素瘤的产品中的应用，其特征在于，所述生物标志物为miR
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1321和miR
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5p。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别所述生物标志物的探针；或特异性扩增所述生物标志物的引物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，特异性扩增所述生物标志物miR
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1321和miR
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5p的引物的序列分别如SEQ ID NO:7
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SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9
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SEQ ID NO:10所示。4.一种用于早期诊断黑色素瘤的产品，其特征在于，所述产品包含检测待测样本中生物标志物的试剂，所述生物标志物为miR
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1321和miR
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5p；所述产品包括试剂盒、芯片；所述试剂盒包括特异性结合miR
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1321和miR
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5p的引物、探针或芯片；所述芯片包括固相载体、附着在固相载体上的特异性识别miR
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1321和miR
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5p的探针。5.生物标志物在筛选用于预防和/或治疗黑色素瘤的候选药物中的应用，其特征在于，所述生物标志物为miR
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1321和miR
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5p。6.一种筛选用于预防和/或治疗黑色素瘤的候选药物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1) 用待筛选物质处理表达或含有miR
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1321和miR
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【专利技术属性】
技术研发人员：崔明鹿，杨志强，孔云，张仙，
申请(专利权)人：北京百奥思科生物医学技术有限公司，
类型：发明
国别省市：