与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用制造技术

本发明专利技术公开了与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，所述生物标志物包括miR

【技术实现步骤摘要】
与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体地，本专利技术涉及与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，更具体地，本专利技术涉及黑色素瘤相关的生物标志物包括miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a。

技术介绍

[0002]黑色素瘤(Melanoma)是一种来源于表皮基底层黑色素细胞的高度恶性肿瘤，该肿瘤好发于皮肤或邻近皮肤的粘膜组织，黑色素瘤是最具侵袭性和致死性的皮肤癌，在过去的几十年里，黑色素瘤在全球的发病率和死亡率呈现急剧上升的趋势。然而，导致黑色素瘤患者死亡的主要原因是肿瘤易发生快速转移。黑色素瘤具有恶性程度高、进展迅速，转移早等特征，而且，近年来，免疫疗法和靶向治疗方法的飞速进展使得黑色素瘤的临床病史发生了革命性的变化，其治疗具有一定的效果，能够显著性地延长患者的生存期，但是这受限于临床的运用，并且对于已经出现了肿瘤转移的晚期黑色素瘤患者而言，目前仍然还没有令人满意的治疗方法。
[0003]目前，关于黑色素瘤的发病机制的研究还亟需进行进一步的深入探讨。越来越多的证据表明，黑色素瘤的病理形成涉及到多个基因、多个信号通路和基因调控的复杂变化。因此，鉴定黑色素瘤进展中的一些潜在的靶标分子，包括致癌基因和抑癌基因等，有望成为未来治疗黑色素瘤的新型靶点。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一类长度约为19
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24个核苷酸的内源性非编码RNA分子，miRNA可通过直接与其靶向调控基因的3
’‑
非翻译区的互补序列结合而在转录后水平上调节基因的表达，从而最终导致靶标基因降解或翻译抑制。研究表明，单个miRNA可以调控超过100个基因的表达，同时，一个基因也可能被几个miRNA进行靶向调控。
[0004]目前，已有大量的miRNA已被注释，并预测大约有30％
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40％的人类基因受到miRNA的调控。近年来，大量的研究显示，在多种实体癌症患者的肿瘤组织与其相对应的邻近肿瘤组织的正常组织之间存在miRNA表达谱的失调，这可能是miRNA的改变而诱发的表观遗传学改变、转录因子的活性改变或与miRNA生物发生相关的酶改变而造成的结果。此外，已有证据表明，异常miRNA的表达可通过下调肿瘤抑制基因或上调肿瘤促癌基因而促成许多癌症的发生、发展与进展。因此，miRNA被认为是黑色素瘤发展过程中的关键调控因子。
[0005]鉴于此，本专利技术通过筛选与黑色素瘤相关的miRNA，进而研究筛选得到的miRNA作为黑色素瘤的生物标志物在诊断和治疗黑色素瘤中的应用，为黑色素瘤提供新的生物标志物，也为治疗黑色素瘤提供了新的途径。

技术实现思路

[0006]为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，所述黑色素瘤相关的生物标志物包括miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a，本专利技术提供了miRNA黑色素瘤诊断和治疗标志物组合、芯片、试剂盒，能够简单有效且无创地对
黑色素瘤进行诊断，此外，所述miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a三者联合对黑色素瘤的治疗具有协同增效的作用。
[0007]本专利技术公开的生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的序列均可在miRBase数据库(http://microrna.sanger.ac.uk/)中进行查询，其中，miR
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155的序列如SEQ ID NO:16所示，miR
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27b
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5p的序列如SEQ ID NO:17所示，miR
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450a的序列如SEQ ID NO:18所示；
[0008]miR
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155的序列：
[0009]CUGUUAAUGCUAAUCGUGAUAGGGGUUUUUGCCUCCAACUGACUCCUACAUAUUAGCAUUAACAG(SEQ ID NO:16)
[0010]miR
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27b
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5p的序列：
[0011]AGAGCUUAGCUGAUUGGUGAAC(SEQ ID NO:17)
[0012]miR
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450a的序列：
[0013]AAACGAUACUAAACUGUUUUUGCGAUGUGUUCCUAAUAUGCACUAUAAAUAUAUUGGGAACAUUUUGCAUGUAUAGUUUUGUAUCAAUAUA(SEQ ID NO:18)
[0014]进一步，本专利技术中所述的miR
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155、miR
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450a包括miR
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155、miR
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450a初始miRNA、miR
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155、miR
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450a前体miRNA、成熟miR
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155、miR
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450a，所述miR
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155、miR
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450a初始miRNA在人细胞内被剪切并表达为成熟miR
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155、miR
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450a，所述miR
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155、miR
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450a前体miRNA在人细胞内被剪切并表达为成熟miR
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155、miR
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450a。作为进一步的优选，所述miR
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155、miR
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450a还包括：对miR
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155、miR
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450a进行碱基修饰或者在两端增加碱基获得的序列。
[0015]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0016]本专利技术提供了检测生物标志物表达水平的试剂在制备诊断黑色素瘤产品中的应用。
[0017]进一步，所述生物标志物为miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a。
[0018]进一步，所述试剂选自：
[0019]特异性识别所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的寡核苷酸探针；或
[0020]特异性扩增所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的引物。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测生物标志物表达水平的试剂在制备诊断黑色素瘤产品中的应用，其特征在于，所述生物标志物为miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的寡核苷酸探针；或特异性扩增所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的引物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，特异性扩增所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的引物的序列分别如SEQ ID NO:8
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SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10
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SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12
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SEQ ID NO:13所示。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过实时定量PCR、RT
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PCR、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a表达水平的试剂。5.一种诊断黑色素瘤的产品，其特征在于，所述产品包含检测生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a表达水平的试剂。6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品包括芯片、试剂盒；优选地，所述芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的特异性识别所述生物标志物miR
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155、miR
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27b
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5p、miR
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450a的寡核苷酸探针；优选地，所述试剂盒包括特异性结合所述生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：张仙，杨志强，崔明鹿，孔云，
申请(专利权)人：北京百奥思科生物医学技术有限公司，
类型：发明
国别省市：