一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。本发明专利技术提供的中间体以烯丙基磷酸配体为MPLA中磷酸基团来源，Nap为保护基，在后续操作中均可以方便的除去；合成的该中间体路线短，总收率明显增加。为MPLA的合成和放大提供了基础。供了基础。供了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用


[0001]本专利技术涉及一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。

技术介绍

[0002]MPLA是来自于革兰氏阴性细菌细胞壁中的内毒素(LPS)的最内层脂质体(lipid A)部分，单磷酰脂质A(Monophosphoryl Lipid A，以下简称MPL)。Lipid A是一个两亲结构，也是革兰氏阴性细菌具有毒性和免疫原性的关键结构，能引起机体的免疫反应。因此可将其作为佐剂添加在疫苗中以增加疫苗的免疫原性；一般来说，减毒活疫苗虽然免疫原性较强，但毒性也较大，可能会有致病风险；而无毒性的灭活疫苗，免疫原性较弱。佐剂的添加，可增强灭活疫苗的免疫原性，且不会对体质较弱者带来致病风险。同时减少抗原的使用量，增加疫苗供应量。MPL为铝盐之外的首个FDA通过的人用新型免疫佐剂物质。MPL作用于toll-like受体4(TLR4)，具有强免疫原性、机制明确、毒性小的优点。而现有的铝盐佐剂机制不明确，在注射部位发生红肿，疼痛的概率相比MPL大，且铝盐佐剂无法产生特异性细胞免疫。已有多个采用MPL佐剂系统的新疫苗品本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤；在有机溶剂中，在缩合剂存在下，将如式14所示的化合物与如式20所示的化合物进行如下所示的酰胺化反应，得到所述的如式15所示的化合物即可；其中，n1和n3独立地为10、12或14，n2和n4独立地为8、10或12；且当n2和n4为10时，n1和n3不同时为12；2.如权利要求1所述的如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，所述的酰胺化反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；和/或，所述的如式14所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为50g/L-200g/L；例如80g/L-100g/L；和/或，所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺中的一种或多种，例如1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；和/或，所述的缩合剂与所述的如式14所示的化合物的摩尔比为1:1-10:1；例如4:1-8:1；和/或，所述的如式14所示的化合物与所述的如式20所示的化合物的摩尔比为1:1-1:4；例如1:2-1:3；和/或，所述的酰胺化反应的温度为0℃至50℃；例如10℃至30℃；和/或，所述的酰胺化反应在惰性气体保护下进行；所述的惰性气体可为氮气或氩气；和/或，所述的酰胺化反应的后处理包括以下步骤：所述的酰胺化反应结束后，浓缩，分离纯化，即可；所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的洗脱剂可为甲苯与乙酸乙酯的混合溶液；例如甲苯/乙酸乙酯的体积比＝10:1；和/或，n1和n3独立地为10、12或14，n2和n4独立地为10；且n1和n3不同时为12；例如n1和n3为10，或，n1为10，n3为14，或，n1为12，n3为10。3.如权利要求1所述的如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，其还包括方案A、方案B；方案A，包括以下步骤：在有机溶剂中，在碱存在下，将如式13所示的化合物进行如下所示的脱Fmoc保护基反应，得到所述的如式14所示的化合物即可；n1,n2,n3和n4的定义均如权利要求1或2所述；
方案B，包括以下步骤：在有机溶剂和水的混合溶剂中，在碱存在下，将如式24所示的化合物进行如下所示的水解反应，得到所述的如式20所示的化合物即可；4.如权利要求3所述的如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，方案A中，所述的有机溶剂为酰胺类溶剂，所述的酰胺类溶剂可为N,N-二甲基甲酰胺；和/或，方案A中，所述的如式13所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为10g/L-100g/L；例如30g/L-50g/L；和/或，方案A中，所述的碱为有机碱，例如三乙胺；和/或，方案A中，所述的碱与所述的如式13所示的化合物的摩尔比为50:1-500:1；例如300:1-350:1；和/或，方案A中，所述的脱Fmoc保护基反应的温度为0℃至50℃；例如10℃至30℃；和/或，方案A中，所述的脱Fmoc保护基反应在惰性气体保护下进行；所述的惰性气体可为氮气或氩气；和/或，方案A中，所述的脱Fmoc保护基反应的后处理包括以下步骤：所述的脱Fmoc保护基反应结束后，浓缩，分离纯化，即可；所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯的混合溶液；例如PE:EA的体积比＝6:1；和/或，所述的方案B中，所述的水解反应中，所述的有机溶剂为环醚类溶剂；例如四氢呋喃；和/或，所述的方案B中，所述的有机溶剂与水的体积比为1:1-1:2；例如1:1.2-1:1.5；和/或，所述的方案B中，所述的如式24所示的化合物与所述的混合溶剂的质量体积比为10g/L-200g/L；例如50g/L-100g/L；和/或，所述的方案B中，所述的碱为碱金属氢氧化物；例如氢氧化锂、氢氧化钠和氢氧化钾中的一种或多种；和/或，所述的方案B中，所述的碱与所述的如式24所示的化合物的摩尔比为3:1-10:1；例如5:1-8:1；和/或，所述的方案B中，所述的水解反应的温度为50℃-100℃；例如60℃-65℃；和/或，所述的方案B中，所述的水解反应的后处理包括以下步骤：所述的水解反应结束后，淬灭至pH值为7，有机溶剂稀释，洗涤，有机相干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可；所述的淬灭可采用饱和碳酸氢钠溶液；所述的淬灭至pH值为7可采用HCl水溶液；所述的有机溶剂
稀释的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂；例如CH2Cl2；所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液；所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的填料可为硅胶柱，所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯；例如石油醚:乙酸乙酯的体积比＝5:1。5.如权利要求3所述的如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，所述的方案B中，进一步包括以下步骤：在有机溶剂中，在硅试剂、还原剂和路易斯酸存在下，将如式23所示的化合物与2-萘甲醛进行如下所示的Nap保护反应，得到所述的如式24所示的化合物即可；和/或，所述的方案A中，进一步包括以下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂存在下，将如式12所示的化合物与如式19A所示的化合物进行如下所示的酰胺化反应，得到所述的如式13所示的化合物即可；n1,n2,n3和n4的定义均如权利要求3所述；6.如权利要求5所述的如式15所示的化合物的制备方法，其特征在于，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的有机溶剂为环醚类溶剂；例如四氢呋喃；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的如式23所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为5g/L-100g/L；例如10g/L-50g/L；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的硅试剂为六甲基二硅氧烷和/或三甲基氯硅烷；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的还原剂为三乙基硅烷；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的路易斯酸为三甲基硅三氟甲磺酸酯；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的硅试剂与所述的如式23所示的化合物的摩尔比为1:1-10:1；例如4:1-8:1；和/或，所述的还原剂与所述的路易斯酸的摩尔比为3:1-10:1；例如4:1-6:1；和/或，所述的还原剂与与所述的如式23所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；例如3:1-4:1；和/或，所述的方案B中的所述的Nap保护反应中，所述的2-萘甲醛与所述的如式23所示的化合物的摩尔比为0.5:1-2:1；例如0.7:1-1:1；和/或，所述的方案B中，所述的Nap保护反应的温度为-20℃至30℃；例如-10℃至10℃；和/或，所述的方案B中，所述的Nap保护反应为如下步骤：将所述的还原剂和路易斯酸
加入到所述的如式23所示的化合物、2-萘甲醛与所述的有机溶剂的混合体系中，进行所述的Nap保护反应；和/或，所述的方案B中，所述的Nap保护反应的后处理包括以下步骤：所述的Nap保护反应结束后，有机溶剂稀释，洗涤，浓缩，分离纯化，即可；所述的有机溶剂稀释的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂；例如CH2Cl2；所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液；所述的分离纯化可为结晶，所述的结晶的溶剂可为石油醚与乙酸乙酯；例如石油醚:乙酸乙酯的体积比＝5:1；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的如式12所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为50g/L-200g/L；例如60g/L-100g/L；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺中的一种或多种，例如1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的缩合剂与所述的如式12所示的化合物的摩尔比为50:1-500:1；例如350:1-450:1；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的如式12所示的化合物与所述的如式19A所示的化合物的摩尔比为1:10-1:200；例如1:120-1:150；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，所述的酰胺化反应的温度为-20℃至30℃；例如-10℃至10℃；和/或，所述的方案A中的所述的酰胺化反应中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：高祺，隋强，李根，郑致伟，韩子怡，薛俊娣，
申请(专利权)人：中国医药工业研究总院，
类型：发明
国别省市：