用于治疗肿瘤的包含抗CD19抗体和自然杀伤细胞的药物组合制造技术

提供了一种药物组合，所述药物组合包含对CD19具有特异性的抗体和自然杀伤细胞；以及使用所述药物组合的治疗方法。这类药物组合能够对B细胞来源的恶性肿瘤展现出协同治疗作用，所述恶性肿瘤如非霍奇金氏淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病和/或急性成淋巴细胞性白血病。胞性白血病和/或急性成淋巴细胞性白血病。胞性白血病和/或急性成淋巴细胞性白血病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗肿瘤的包含抗CD19抗体和自然杀伤细胞的药物组合


[0001]本专利技术的一实施方案是针对一种包含抗CD19抗体和自然杀伤细胞的药物组合，所述药物组合对B细胞来源的恶性肿瘤具有协同治疗作用，所述恶性肿瘤如非霍奇金氏淋巴瘤(non
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Hodgkin's lymphoma)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和/或急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。

技术介绍

[0002]已知自然杀伤细胞(NK细胞)是淋巴样细胞，其与T细胞不同，是以非MHC限制的方式识别标靶，并在固有免疫应答中起重要作用。自然杀伤细胞可以发挥抗病毒和抗癌功效。具体地说，自然杀伤细胞起到直接杀死恶性肿瘤或诱导树突状细胞活性或肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用，以消除已发展为肿瘤或正在发展为肿瘤的异常细胞。另外，关于自然杀伤细胞的抗癌功效，已经证明使用与杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin
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like receptor，KIR)
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配位体对不匹配的同种异体自然杀伤细胞治疗癌症患者比使用自体同源自然杀伤细胞更有效而且更安全。
[0003]另一方面，人CD19分子是在人B细胞例如前B细胞、处于发育初期的不成熟B细胞、成熟B细胞和恶性B细胞的表面上表达的细胞表面受体。实际上，大部分B细胞谱系恶性肿瘤都表达CD19，包括非霍奇金氏淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。因此，抗CD19抗体可以结合于作为标靶的CD19抗原，因此可以用于以上提及的B细胞来源的恶性肿瘤的治疗免疫疗法中。
[0004]尽管近来发现和开发了几种抗癌剂，但是由于对包括表达CD19的肿瘤的许多类型的癌症的预后不良，仍然需要一种改良的方法或治疗剂来治疗这类癌症。因此，本专利技术人已经证实，自然杀伤细胞与对CD19具有特异性的抗体的组合施用对B细胞来源的恶性淋巴瘤的治疗具有协同作用，并且已经完成本专利技术。
[0005][引用清单]非专利文献Nadler等人,J.Immunol.,131:244
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250(1983)

技术实现思路

[0006]技术问题
[0007]本专利技术的目标是提供一种组合疗法，所述组合疗法使用对CD19具有特异性的抗体和自然杀伤细胞或它们的组合。
[0008]问题的解决方法
[0009]为了实现以上目标，本专利技术的一实施方案可以提供一种用于治疗癌症的药物组合，所述药物组合包含对CD19具有特异性的抗体和自然杀伤细胞(NK细胞)。
[0010]所述抗体可具有包含SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区和GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区的重链可变区。
[0011]所述抗体可具有包含RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区的轻链可变区。
[0012]所述抗体可具有包含SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区和GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区的重链可变区，和包含RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区的轻链可变区。
[0013]所述抗体可包含EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGYTFTSYVMHWVRQAPGKGLEWIGYINPYNDGTKYNEKFQGRVTISSDKSISTAYMELSSLRSEDTAMYYCARGTYYYGTRVFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:8)的重链可变区和DIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRSSKSLQNVNGNTYLYWFQQKPGQSPQLLIYRMSNLNSGVPDRFSGSGSGTEFTLTISSLEPEDFAVYYCMQHLEYPITFGAGTKLEIK(SEQ ID NO:9)的轻链可变区。
[0014]所述抗体可包含ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:10)的重链恒定区。
[0015]所述抗体可包含RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:11)的轻链恒定区。
[0016]NK细胞可以通过包括以下步骤的方法制备：步骤(i)在含有抗CD3抗体、细胞因子和饲养细胞的培养液中进行分离的NK细胞的静置培养以刺激细胞间接触；步骤(ii)向其中加入细胞因子、抗CD3抗体和饲养细胞用于再刺激并再次进行静置培养以诱导细胞内接触；以及步骤(iii)将含有细胞因子的培养基加入至所述细胞中并进行静置或悬浮培养，同时恒定维持所述细胞的浓度和所述细胞因子的浓度。
[0017]NK细胞可以通过包括以下步骤的方法制备：将作为饲养细胞的已经离体分离的CD4(+)T细胞或已经离体扩增培养的CD4(+)T细胞与种子细胞共同培养。
[0018]CD4(+)T细胞可以是CD4(+)/CD1(
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)T细胞系。
[0019]CD4(+)/CD1(
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)T细胞系可以是H9或HuT78细胞系。
[0020]种子细胞可以是选自由以下组成的组的一种或多种：外周血源性细胞、外周血白细胞、外周血单个核细胞(PBMC)、脐带血白细胞、脐带血单个核细胞、源自于干细胞的自然杀伤细胞、富集的自然杀伤细胞和分离的自然杀伤细胞。
[0021]此外，药物组合还可以包含白蛋白。
[0022]癌症可以是选自由以下组成的组的至少一种：胃癌、肝癌、肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、甲状腺癌、喉癌、急性成淋巴细胞性白血病、脑肿瘤、成神经本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于治疗癌症的药物组合，所述药物组合包含对CD19具有特异性的抗体和自然杀伤细胞(NK细胞)。2.根据权利要求1所述的药物组合，其中所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区包含SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区和GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区。3.根据权利要求1所述的药物组合，其中所述抗体包含轻链可变区，所述轻链可变区包含RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合，其中所述抗体包含EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGYTFTSYVMHWVRQAPGKGLEWIGYINPYNDGTKYNEKFQGRVTISSDKSISTAYMELSSLRSEDTAMYYCARGTYYYGTRVFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:8)的重链可变区和DIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRSSKSLQNVNGNTYLYWFQQKPGQSPQLLIYRMSNLNSGVPDRFSGSGSGTEFTLTISSLEPEDFAVYYCMQHLEYPITFGAGTKLEIK(SEQ ID NO:9)的轻链可变区。5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合，其中所述抗体包含ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:10)的重链恒定区。6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合，其中所述抗体包含RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:11)的轻链恒定区。7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合，其中所述NK细胞是通过包括以下步骤(i)至(iii)的方法制备：步骤(i)在含有抗CD3抗体、细胞因子和饲养细胞的培养基中进行分离的NK细胞的静置培养以刺激细胞间接触；步骤(ii)向其中加入细胞因子、抗CD3抗体和饲养细胞用于再刺激并再次进行静置培养以诱导细胞内接触；以及步骤(iii)将含有细胞因子的培养基加入至所述细胞中并进行静置或悬浮培养，同时恒定维持所述细胞的浓度和所述细胞因子的浓度。8.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合，所述NK细胞是通过包括以下步骤的方法制备：将作为饲养细胞的已经离体分离的CD4(+)T细胞或已经离体扩增培养的CD4(+)T细胞与种子细胞共同培养。9.根据权利要求8所述的药物组合，其中所述CD4(+)T细胞是CD4(+)/CD1(
‑
)T细胞系。10.根据权利要求9所述的药物组合，其中所述CD4(+)/CD1(
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)T细胞系是H9或HuT78细胞系。
11.根据权利要求8所述的药...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：莫佛塞斯公司，
类型：发明
国别省市：