一种提高乙酰丙酮合成效率的乙酰丙酮裂解酶突变体、核苷酸、表达载体、重组菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种提高乙酰丙酮合成效率的乙酰丙酮裂解酶突变体、核苷酸、表达载体、重组菌及应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过定点突变的方法，将乙酰丙酮裂解酶第15位的赖氨酸变为谷氨酰胺，同时将乙酰丙酮裂解酶第60位的丙氨酸变为天冬氨酸，将乙酰丙酮裂解酶突变体用于乙酰丙酮的合成后，提高了乙酰丙酮的产量，达到112.9mg/L，本发明专利技术对乙酰丙酮裂解酶的工程改造和乙酰丙酮的生物合成提供了良好范例。好范例。

【技术实现步骤摘要】
一种提高乙酰丙酮合成效率的乙酰丙酮裂解酶突变体、核苷酸、表达载体、重组菌及应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种提高乙酰丙酮合成效率的乙酰丙酮裂解酶 突变体、核苷酸、表达载体、重组菌及应用。

技术介绍

[0002]乙酰丙酮，又名2,4-戊二酮(CAS NO.123-54-6)。其广泛应用于燃料添加剂、染料中间 体、树脂改性剂、金属提炼等，国内90％的乙酰丙酮用于医药和兽药的生产。近年来，乙酰 丙酮下游医药出口形势越来越好，需求得到快速增长。当前乙酰丙酮的生产，主要是以化学 合成法为主。但化学合成乙酰丙酮步骤繁琐，存在能耗高(500-600℃)、污染重等瓶颈问题， 不符合当今低碳经济的需求。
[0003]生物法合成效率高、能耗低、能够避免大量污染物的生成，和化学法相比优势明显。但 乙酰丙酮的生物合成方法尚未引起广泛关注。乙酰丙酮可以被约翰逊不动杆菌Acinetobacterjohnsonii降解利用，但是可逆反应是否能实现，还没有相关研究。在中国专利 CN201810865467.0中，通过对来自Acinetoba本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高乙酰丙酮合成效率的乙酰丙酮裂解酶突变体，其特征在于，所述乙酰丙酮裂解酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，是将SEQ ID NO.3所示乙酰丙酮裂解酶第15位的赖氨酸变为谷氨酰胺，同时将乙酰丙酮裂解酶第60位的丙氨酸变为天冬氨酸获得的。2.一种编码权利要求1所述的乙酰丙酮裂解酶突变体的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列为下述的一种：1).SEQ ID No.2所示核苷酸序列；2).与SEQ ID No.2所示核苷酸序列互补的核苷酸序列；3).与1)或2)所述核苷酸序列编码相同蛋白质，但因遗传密码的简并性而与1)或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯新军，周怡斐，咸漠，赵广，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：