膀胱癌的检测制造技术

本发明专利技术提供了一种用于检测女性患者中膀胱癌的存在或膀胱癌的风险的方法，所述方法包括以下步骤：检测从女性患者分离的样品中生物标记物组的存在，所述生物标记物组包含IL‑13和IL‑12p70以及一种或多种选自以下的生物标记物：BTA、中期因子、PAI‑1/tPA、8OHdG、CEA、CK18、丛生蛋白、肌酸酐、CXCL16、半胱氨酸蛋白酶抑制剂B、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、d‑二聚体、EGF、FAS、HAD、IL‑1a、IL‑1b、IL‑4、IL‑6、IL‑7、IL‑8、MCP‑1、微量白蛋白、MMP9NGAL、MMP9TIMP1、NGAL、NSE、颗粒蛋白前体、TUP、TGFB1、血栓调节蛋白、sTNFR1、TPA、VEGF和甘油三酸酯，和/或从女性患者分离的样品中白蛋白/微量白蛋白/蛋白质与肌酸酐的浓度，以白蛋白:肌酸酐比值表示；以及评估结果并将其与正常对照进行比较，其中与正常对照相比生物标记物的存在增加表明从其分离样品的患者中癌症的存在或风险。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】膀胱癌的检测
本专利技术涉及一种检测女性患者中膀胱癌存在或膀胱癌风险的方法。
技术介绍
膀胱癌是全世界范围内的主要死亡原因。膀胱癌在男性中是在女性中的3倍以上，但女性中的死亡率是男性中的两倍。英格兰和威尔士的女性膀胱癌患者在1年和5年时的生存率低近20％，在10年时低近30％，这表明女性患者表现出更严重的疾病。控制性别和种族的多变量分析发现，39％的患有血尿的男性被其GP转诊给泌尿科医师，相比之下17％的患有血尿的女性被转诊给泌尿科医师。此外，男性比女性更有可能对其血尿进行完整评估(22％比12％)，不太可能对其血尿进行不完整评估(55％比69％)。诊断测试的有用性通过其敏感性和特异性进行测量。测试的敏感性是真阳性的数量(对具体疾病测试阳性的患有该疾病的个体数目)，特异性是真阴性的数量(对疾病测试阴性的未患该疾病的个体数目)。最常见的膀胱癌病征是肉眼可见的血尿或显微镜可见的血尿，通常由家庭医生检测，并且在所有膀胱癌患者的85％中观察到。简单的尿试纸测试可用于检测血的存在情况。虽然无血的癌症很少，这使得简单血试纸测试具有高敏感性，但是该测试的特异性很差，其中少于5％的表现出血尿的患者实际上患有膀胱癌。然而，所述5％的表现出血尿的患者通常被诊断为患有易于切除的浅表性肿瘤。膀胱镜检查和细胞学是用于诊断膀胱癌的优选方法。细胞学检查涉及检查排泄的尿中的膀胱上皮细胞。该方法具有高特异性，并且便于获得样品。然而，该方法敏感性差，在低细胞产率下具有主观性。细胞学评估通常与灵活的膀胱镜检查相结合。白光膀胱镜检查(WLC)使得可直接观察膀胱以及对可疑区域进行活组织检查。但是，最近的出版物表明，蓝光膀胱镜检查(BLC)比WLC多检出34％的肿瘤(例如原位癌(CIS))。此外，20/53的CIS病变患者(37.7％)的细胞学检查为阴性(Fradet等人，2007；Witjes等人，2010)。不幸的是，BLC的假阳性率高于WLC(分别为39％与31％)(Fradet等人，2007)。膀胱镜检查的敏感性和特异性分别为71％和72％(NationalCollaboratingCentreforCancer,BladderCancer:diagnosisandmanagement；NICEGuideline2,February2015,Page78)。膀胱镜检查有一些缺点，即它特别昂贵，造成患者不适，有感染风险，并且不能用于上尿路(uppertract)可视化或用于检测小面积的CIS，例如，当将尿测试(细胞学)呈阳性的信息告知泌尿科医师时，通过膀胱镜检查检测到膀胱癌复发的数量增加；但当结果是盲测时就不会(vanderAa等人，2010)。本领域中已经尝试鉴别一种或多种生物化学的膀胱癌生物标记物，所述生物标记物能够在对患有膀胱癌的患者进行膀胱镜检查之前将他们鉴别出。如今，大约20％的患者存在重病，结果是他们的预后较差。因此，本领域中已经试图鉴别经证明的生物标记物或生物标记物组，其可用作特别是用于低风险无症状患者的膀胱癌筛查工具。仍没有单一生物标记物或生物标记物组已经达到了降低准确诊断需要的膀胱镜检查频率所需要的敏感性和特异性水平。在过去10年间，已经相对于黄金标准尿细胞学评估了大量膀胱癌标记物，包括膀胱肿瘤抗原(BTA)、核基质蛋白22(NMP22)、端粒酶和纤维蛋白原降解产物(FDP)，一直具有十分一致的低特异性结果。这些标记物存在于大部分患有除膀胱癌之外的泌尿疾病的患者以及患有尿路感染(UTI)的患者的尿中。NMP22和BTA被FDA批准用作即时检验测定(pointofcareassay)。然而，NMP22需要在尿中立即稳定，这不是总能做到，并且BTA可被存在于尿中的血所混淆。已提出新的推定标记物(例如存活素、透明质酸、细胞角蛋白8和18以及EGF)——它们已被证明可诱导某些膀胱癌细胞中基质金属蛋白酶(MMP9)表达——作为膀胱癌标记物。然而，所述推定生物标记物均尚未达到尿细胞学的高特异性和端粒酶测定的高敏感性。因此，在膀胱癌诊断和治疗领域中，现有技术中鉴别的生物标记物不能使人满意，原因是它们缺乏准确诊断膀胱癌或评估患者患膀胱癌风险所需的敏感性和特异性。结果是，临床医生不能正确评估是否应对患者进行进一步的膀胱镜检查和细胞学测试，这导致了与诊断和处理所述疾病相关的高额费用。大量金钱和资源用于为实际上可以在初级医疗中进行处理的低风险患者提供膀胱镜检查，而不是增加高风险患者进行膀胱镜检查的等待时间。因此，需要提供准确评估的测试，其可以使GP在不将患者送至膀胱镜检查的情况下由诊断排除膀胱癌。
技术实现思路
本专利技术基于以下认识：在男性和女性的膀胱癌诊断中所需的生物标记物之间存在显著差异。因此，本专利技术提供了可用于诊断女性受试者中膀胱癌的特定生物标记物组。在本专利技术的第一方面，提供了一种用于检测女性患者中膀胱癌或膀胱癌风险的方法，所述方法包括以下步骤：(i)检测从女性患者分离的样品中生物标记物组的存在，所述生物标记物组包含IL-13和IL-12p70以及一种或多种选自以下的生物标记物：BTA、中期因子(Midkine)、PAI-1/tPA、8OHdG、CEA、CK18、丛生蛋白(Clusterin)、肌酸酐、CXCL16、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin)B、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、d-二聚体、EGF、FAS、HAD、IL-1a、IL-1b、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、MCP-1、微量白蛋白、MMP9NGAL、MMP9TIMP1、NGAL、NSE、颗粒蛋白前体(Progranulin)、TUP、TGFB1、血栓调节蛋白、sTNFR1、TPA、VEGF和甘油三酸酯，和/或白蛋白/微量白蛋白/蛋白质与肌酸酐的浓度，以白蛋白:肌酸酐比值表示；(ii)评估女性患者中膀胱癌的存在或膀胱癌的风险，其中检测到与正常对照相比升高的生物标记物的存在指示从其分离样品的女性患者中癌症的存在或癌症的风险。在本专利技术的第二方面，提供了一种固体载体材料，其包含附着于其上的结合分子，所述结合分子对IL-13和IL-12p70分别具有特异性亲和力，其中结合分子各自位于载体材料上的离散位置。在本专利技术的第三方面，提供了一种用于检测女性患者中膀胱癌或膀胱癌风险的方法，所述方法包括以下步骤：(i)确定女性患者没有感染；(ii)检测从所述女性患者分离的样品中一种或多种生物标记物的存在，其中所述一种或多种生物标记物选自IL-13、IL12p70、BTA和中期因子；(iii)评估女性患者中膀胱癌的存在或膀胱癌的风险，其中检测到与正常对照相比升高的生物标记物的存在指示从其分离样品的女性患者中癌症的存在或癌症的风险。附图说明本专利技术参考附图进行描述，其中：图1：显示了从SPSS分析(HaBio)输出的女性ROC曲线(4种生物标记物)；图2：显示了从SPSS分析(HaBio)输出的女性ROC曲线(4种生物标记物+感染)；和图3：显示了感染的所有癌症本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测女性患者中膀胱癌或膀胱癌风险的方法，所述方法包括以下步骤：/n(i)检测从女性患者分离的样品中生物标记物组的存在，所述生物标记物组包含IL-13和IL-12p70以及一种或多种选自以下的生物标记物：BTA、中期因子、PAI-1/tPA、8OHdG、CEA、CK18、丛生蛋白、肌酸酐、CXCL16、半胱氨酸蛋白酶抑制剂B、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、d-二聚体、EGF、FAS、HAD、IL-1a、IL-1b、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、MCP-1、微量白蛋白、MMP9NGAL、MMP9TIMP1、NGAL、NSE、颗粒蛋白前体、TUP、TGFB1、血栓调节蛋白、sTNFR1、TPA、VEGF和甘油三酸酯和/或白蛋白/微量白蛋白/蛋白质与肌酸酐的浓度，以白蛋白:肌酸酐比值表示；/n(ii)评估女性患者中膀胱癌的存在或膀胱癌的风险，其中检测到与正常对照相比升高的生物标记物的存在指示从其分离样品的女性患者中癌症的存在或癌症的风险。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181116 GB 1818744.31.一种用于检测女性患者中膀胱癌或膀胱癌风险的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)检测从女性患者分离的样品中生物标记物组的存在，所述生物标记物组包含IL-13和IL-12p70以及一种或多种选自以下的生物标记物：BTA、中期因子、PAI-1/tPA、8OHdG、CEA、CK18、丛生蛋白、肌酸酐、CXCL16、半胱氨酸蛋白酶抑制剂B、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、d-二聚体、EGF、FAS、HAD、IL-1a、IL-1b、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、MCP-1、微量白蛋白、MMP9NGAL、MMP9TIMP1、NGAL、NSE、颗粒蛋白前体、TUP、TGFB1、血栓调节蛋白、sTNFR1、TPA、VEGF和甘油三酸酯和/或白蛋白/微量白蛋白/蛋白质与肌酸酐的浓度，以白蛋白:肌酸酐比值表示；
(ii)评估女性患者中膀胱癌的存在或膀胱癌的风险，其中检测到与正常对照相比升高的生物标记物的存在指示从其分离样品的女性患者中癌症的存在或癌症的风险。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种生物标记物选自BTA、中期因子、PAI-1/tPA、丛生蛋白、IL-8、微量白蛋白、MMP9NGAL、NSE、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、d-二聚体、IL-7。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述生物标记物组包含BTA。


4.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述生物标记物组包含中期因子。


5.根据权利要求3或4所述的方法，其中所述生物标记物组包含PAI-1/tPA。


6.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物标记物组选自表2或表3中的生物标记物的组合。


7.根据权利要求6所述的方法，其中所述生物标记物组选自：
(i)BTA、IL-13和IL12p70；
(ii)中期因子、IL-13和IL12p70；
(iii)BTA、IL-13、IL12p70和中期因子；以及
(iv)BTA、IL-13、IL12p70、中期因子和PAI-1/tPA。


8.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述生物标记物中的一种或多种为尿形式。


9.根据权利要求8所述的方法，其中每种生物标记物为尿形式。


10.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述方法还包括表征所述患者的感染状况的步骤。


11.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述样品是尿样品。

【专利技术属性】
技术研发人员：M·拉德克，J·拉蒙特，S·菲茨杰拉德，K·威廉森，
申请(专利权)人：兰多克斯实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB