含有水凝胶包封的灭活细胞的口服疫苗组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种含有水凝胶包封的灭活细胞的口服疫苗组合物。本发明专利技术可以提供一种用于肉食性鱼类的口服疫苗组合物，其中口服疫苗组合物使用了水凝胶来包封病原体，所述水凝胶响应于pH变化通过可逆地膨胀或收缩而改变大小，并因此在低pH下的胃中不被消化，并在运送到pH值高的肠道后分解并被身体有效吸收。此外，所述疫苗组合物可以与食物结合施用，并因此可以最大限度地减少生物体中的应激诱导因子。由于抗体滴度提高并且不使用补充剂，因此可抑制黑变作用和自身免疫应答等副作用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有水凝胶包封的灭活细胞的口服疫苗组合物
本专利技术涉及一种用于口服施用的包含水凝胶包封的灭活细胞的疫苗组合物。
技术介绍
鱼是变温动物，它们在一定程度上适应环境，但超过这个限度，它们很容易受到生理损伤。如同陆生动物的疾病，鱼病定义为动物不能再对抗内部或者外部坏境以保持其健康的状况。疾病发生的现象是宿主和致病因素与环境相互作用的结果。疾病不是仅由致病因素引起的，而且疾病的发生不受宿主和环境相互作用的影响。也就是说，在当致病因素和宿主因素以及环境达到良好平衡时不会发生疾病，而当这些平衡被打破时就会发生疾病。可以认为大多数疾病的发生都是受到环境状况的极大影响。病原体通过皮肤、鳃、鼻腔和消化道进入鱼的体内，这些器官通过分泌的黏液、酶、抗菌和杀菌物质、抗体、白细胞、巨噬细胞等的分泌及其作用来保护鱼免受细菌入侵。然而，例如通过鱼分拣期间造成的机械损伤、寄生虫造成的伤口和饲养管理不善，这些保护物质破坏。病原体通过受伤区域侵入鱼的体内，通过血液传播，并到达器官和组织，形成病变。对鱼造成损害的致病生物主要分为原生动物(寄生虫)、真菌、细菌和病毒。寄生虫的大小为数百微米(μm)至数十厘米(cm)，细菌小到数μm，而病毒小到μm的千分之几。因此，由致病生物造成的损害和针对这些损害的对策自然是不同的。近年来渔业养殖技术的快速发展使韩国的海鱼产量不断提高。然而，沿海环境的恶化、长期集约化养殖导致的渔业老化、水产养殖品种的劣化、鱼病的爆发等问题，严重影响了当前水产养殖业的鱼类养殖生产力。尤其是养殖鱼种的多样化提高了鱼种中各种感染及其并发症的发生率，这就需要频繁使用导致耐药细菌产生的化学治疗剂。此外，感染和并发症降低了养殖鱼类的质量，增加了死鱼或病鱼的处理，导致生产成本高。在这种情况下，针对鱼类传染性疾病的对策是目前水产养殖业最重要的挑战。此外，考虑到疾病对鱼类造成的损害的比例有逐渐增加的趋势，有必要寻求预防鱼病的措施和治疗鱼病的基本方法。养殖鱼类的细菌性疾病不仅由病原菌引起，还由条件致病菌引起，它们通过其他因果的细菌引起的继发感染而导致鱼类死亡。由于鱼类养殖场的养殖水体中含有大量的有机物，它们为许多菌种提供了繁殖的环境。在这种养殖环境中，鱼类在失去健康或者抵抗力较弱时很容易患病。细菌性疾病根据感染细菌的类型和疾病的症状分为不同的类型。细菌性疾病发病率高，传染性强。一旦感染细菌性疾病，鱼类的累积死亡率会提高，这给鱼类养殖场造成相当大的经济损失。目前，韩国鱼类养殖场正在发生各种细菌性疾病，包括弧菌病、爱德华氏菌病、链球菌病和黄杆菌病。特别地，已知爱德华氏菌病和链球菌病是对鱼类养殖场造成最严重破坏的疾病。就此而言，福尔马林灭活的细胞目前广泛用于水生生物的商业疫苗中。添加了油等佐剂来维持疫苗的活性。所述佐剂的使用涉及副作用，例如，黑变作用和自身免疫应答，并使得难以为鳗鱼等肉食性鱼类接种疫苗。本专利技术的专利技术人认真细致地研究了对于肉食性鱼类有效的疫苗，并因此发现，向肉食性鱼类口服施用淀粉基水凝胶包封的抗原可以在最大限度地减少生物体内应激诱导因子的同时显著提高抗体滴度。本专利技术是基于这一发现完成的。
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题本专利技术的目的是提供一种可以有效地应用于肉食性鱼类的用于口服施用的疫苗组合物。解决问题的方案本专利技术的一个方面提供了一种用于口服施用的疫苗组合物，包括：水凝胶；和作为活性成分的包封在水凝胶中的灭活细胞。根据本专利技术，水凝胶由于具有响应于pH变化可逆地膨胀和收缩的能力而可以改变大小。根据本专利技术，水凝胶可以包括淀粉。根据本专利技术，灭活细胞可以是福尔马林灭活细胞。根据本专利技术，灭活细胞可以是鱼类细菌性疾病的病原体或病毒性疾病的病原体。根据本专利技术，组合物可以是用于肉食性鱼类的疫苗。肉食性鱼类可以选自鳗鱼、牙鲆、许氏平鲉、岩鱼、黑鲷鱼、红鲷鱼、七带石斑鱼、鲻鱼、海鲈鱼、鰶、鲭鱼、马鲭鱼和豚鱼。专利技术的效果根据本专利技术的用于肉食性鱼类的口服疫苗组合物使用了水凝胶来包封病原体，所述水凝胶由于具有响应于pH变化可逆地膨胀和收缩的能力而可以改变大小。这种包封防止了疫苗组合物在低pH下在胃中被消化，并允许疫苗组合物递送至高pH值的肠道，并在其中降解，从而使病原体在体内被有效吸收。此外，疫苗组合物与食物结合施用可以最大限度地减少生物体内的应激诱导因子，并显著提高抗体滴度。而且，由于疫苗组合物不使用任何佐剂，所以可避免黑变作用和自身免疫应答等副作用。附图说明图1显示了包含淀粉基水凝胶包封的疫苗(淀粉疫苗)和常规的福尔马林灭活细胞培养疫苗(FKC)在口服施用后凝集滴度随时间的变化，所述变化在实施例1中测量。图2显示了在口服施用了淀粉基水凝胶包封的包含灭活细胞的疫苗(淀粉疫苗)后在第0天(喂食1)、每日1次施用4天(喂食4)、和每日1次施用8天(喂食8)的组中凝集滴度随时间的变化，以及口服施用福尔马林灭活细胞培养疫苗(FKC)后的组中凝集滴度随时间的变化，所述变化在实施例1中测量。图3显示了淀粉基水凝胶包封的包含FKC抗原的疫苗(淀粉水凝胶基口服疫苗，SHO疫苗)的形貌分析结果，所述结果在实施例2中由FESEM确认：水凝胶形成前的淀粉(A)；合成的不含抗原的淀粉基水凝胶(B)；和含有福尔马林灭活细胞(迟缓爱德华氏菌SU53)的SHO疫苗(C)。比例尺为1μm(A、C)或2μm(B)。图4显示了口服施用FKC和SHO疫苗后的血清凝集滴度，其在实施例2中测量(对照组：口服施用PBS浸渍的颗粒仅一次的组；FKC组：口服施用混合了FKC的磨碎的颗粒(常规福尔马林灭活细胞培养疫苗)每天一次共四天的组；SHO1：口服施用SHO疫苗一次共一天的组；SHO4：口服施用SHO疫苗每天一次共四天的组；SHO8：口服施用SHO疫苗每天一次共八天的组)。在第一次接种PBS、FKC或SHO疫苗后第46天进行一次加强疫苗接种。条形代表平均值±标准偏差(n＝3)。在对照组中没有检测到抗体。图5显示了在实施例2中测量的鳗鱼的激发测试的Kaplan-Meier生存曲线。在第一次疫苗接种后第四周进行注射(i.p.)激发，并对五个组(对照、FKC、SHO1、SHO4、SHO8)中的存活百分率进行了说明(n＝10)。激发实验一式两份进行；结果分别表示为第一次实验和第二次实验。图6显示了在实施例2中测定的在接种FKC或者SHO疫苗后在鳗鱼的肝中IL-6、TNF-α和IFN-α的相对mRNA表达。条形代表平均值±标准偏差(n＝3)。与对照组相比的显著性差异用星号表示(p<0.05)。本专利技术的最佳实施方式除非另外限定，本文所使用的所有技术和科学术语都具有与本专利技术所属
一般技术人员通常理解的含义相同的含义。通常，本文使用的术语是本领域公知的和常用的。福尔马林灭活的细胞目前广泛用于水生生物的疫苗中。添加了油等佐剂来维持疫苗的活性。所述佐剂的使用涉及副作用，例如，黑变作用和自身免疫应答，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于口服施用的疫苗组合物，其包含：水凝胶；和作为活性成分的包封在水凝胶中的灭活细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20190110 KR 10-2019-00034801.一种用于口服施用的疫苗组合物，其包含：水凝胶；和作为活性成分的包封在水凝胶中的灭活细胞。


2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中水凝胶由于具有响应于pH变化可逆地膨胀和收缩的能力而改变大小。


3.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中水凝胶包括淀粉。


4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴世昌，姜政佑，
申请(专利权)人：首尔大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR