抗原性OSPA多肽制造技术

本公开文本涉及抗原性OspA多肽及其在引发针对OspA的抗体中的用途。还公开了包含OspA多肽和铁蛋白蛋白的抗原性多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗原性OSPA多肽本申请要求2018年4月3日提交的美国临时专利申请号62/652,210的优先权权益，所述临时专利申请的全部内容通过引用并入本文中。本申请含有已经以ASCII格式电子提交并且通过引用以其整体特此并入的序列表。2019年3月18日创建的所述ASCII副本被命名为2019-03-18_01121-0033-00PCT_SL.txt并且大小为370,862字节。即使在疫苗学领域取得了许多成功，仍需要新的突破来保护人类免受许多威胁生命的传染性疾病的影响。当前许多已获许可的疫苗都依赖十年前的技术来产生活的减毒病原体或灭活的杀死病原体，所述病原体具有固有的安全性问题，并且在许多情况下，仅刺激短暂的弱免疫应答，从而需要给予多个剂量。虽然遗传学和生物化学工程学的进步使得开发针对具有挑战性的疾病靶标的治疗剂成为可能，但在疫苗学领域的这些应用尚未完全实现。重组蛋白技术现在允许设计最佳抗原。另外，纳米颗粒已越来越多地展示出用于最佳抗原呈递和靶向药物递送的潜力。已经显示具有多个附接抗原的纳米颗粒具有增加的结合亲合力，所述增加的结合亲合力凭借其分子货物的多价展示和由于其纳米尺寸而更有效地跨过生物屏障的能力而提供。与流感病毒血凝素(HA)蛋白融合的幽门螺杆菌(Helicobacterpylori(H.pylori))铁蛋白纳米颗粒可以改善抗原稳定性并增加在小鼠流感模型中的免疫原性(参见Kanekiyo等人,Nature499:102-106(2013))。此融合蛋白自组装成八面体对称性纳米颗粒并呈递8个三聚体HA刺突，从而在与佐剂一起使用时在各种临床前模型中产生稳健的免疫应答。莱姆疏螺旋体病是一种由疏螺旋体属(Borrelia)中的一些菌种引起的人畜共患疾病，并通过感染的硬蜱属物种(Ixodesspp.)蜱虫的叮咬传播给人和犬科动物。莱姆病是全球性的公共卫生问题，跨欧洲、北美洲和亚洲的温带气候中报告了病例。疏螺旋体属的外表面蛋白A(OspA)是引发免疫应答的主要抗原。在世界范围内的疏螺旋体属中发现了至少七种不同的OspA血清型(血清型1-7)。在世界范围内存在不同的疏螺旋体属基因种，因此对一种基因种的免疫力可能不会赋予对也会引起莱姆疏螺旋体病的其他细菌的免疫力。此外，藏匿疏螺旋体属的蜱虫的局部性范围意指与一个地理区域中的患者的莱姆病相关的OspA血清型可能与另一地理区域中的患者的莱姆病不相关。在此，提出了一组涉及OspA多肽的新多肽、纳米颗粒、组合物、方法和用途。开发了修饰的OspA多肽以在降低刺激自身免疫反应的风险的情况下提供保护免受疏螺旋体属感染。此外，开发了包含OspA多肽和铁蛋白的自佐剂化抗原性多肽，其中免疫刺激部分(如佐剂)直接化学附接至抗原性多肽。将免疫刺激部分直接缀合至抗原性多肽允许在单一大分子实体中靶向共递送免疫刺激部分和OspA多肽，这可以大大降低全身性毒性的可能性，所述全身性毒性是在包含作为单独分子的抗原和免疫刺激分子(如佐剂)的传统的疫苗的情况下所担忧的。免疫刺激部分与OspA多肽在大分子实体中的共递送以及它们的多价呈递也可以减少引发保护所需的总剂量，从而减少生产负担和成本。
技术实现思路
本公开文本的目的是提供可以提供以上讨论的一个或多个优点，或者至少为公众提供有用选择的组合物、试剂盒、方法和用途。因此，本文公开了以下实施方案。实施方案1是一种抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含疏螺旋体属的OspA血清型1多肽，其中所述多肽不包含SEQIDNO:77的序列。实施方案2是根据实施方案1所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽缺乏跨膜结构域或跨膜结构域的一部分。实施方案3是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽是非脂化的。实施方案4是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中相对于SEQIDNO:77的序列存在至少一种氨基酸取代，其中所述取代降低与SEQIDNO:78的同一性，或是非保守性的并且不导致与SEQIDNO:78的更高同一性。实施方案5是根据实施方案4所述的抗原性OspA多肽，其中所述取代降低与SEQIDNO:78的同一性。实施方案6是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中SEQIDNO:77的一个或多个氨基酸被非血清型1OspA的一个或多个相应氨基酸置换。实施方案7是根据实施方案6所述的抗原性OspA多肽，其中所述非血清型1OspA是血清型2、3、4、5、6或7OspA。实施方案8是根据实施方案6所述的抗原性OspA多肽，其中SEQIDNO:77的每个氨基酸被血清型2、3、4、5、6或7OspA的相应氨基酸置换。实施方案9是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽进一步包含用以减少或消除糖基化的修饰。实施方案10是根据实施方案9所述的抗原性OspA多肽，其中所述修饰包括对至少一个天冬酰胺的取代。实施方案11是根据实施方案10所述的抗原性OspA多肽，其中所述至少一个天冬酰胺包括OspA血清型1的N71、N190、N202和N251中的任何一个、两个、三个或更多个。实施方案12是根据实施方案11所述的抗原性OspA多肽，其中所述至少一个天冬酰胺包括OspA血清型1的N71、N190、N202和N251。实施方案13是根据实施方案10-12中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述一个或多个天冬酰胺被谷氨酰胺取代。实施方案14是根据实施方案10-13中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽缺乏N-糖基化位点。实施方案15是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述OspA来自博氏疏螺旋体(Borreliaburgdorferi)、梅奥疏螺旋体(Borreliamayonii)、阿氏疏螺旋体(Borreliaafzelii)、伽氏疏螺旋体(Borreliagarinii)或巴伐利亚疏螺旋体(Borreliabavariensis)。实施方案16是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含与SEQIDNO:1、3、4或53中任一个的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％、99.5％或100％同一性的序列。实施方案17是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含SEQIDNO:1-10或12-76中任一个的序列。实施方案18是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含OspA胞外结构域。实施方案19是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含与SEQIDNO:94-102中任一个的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％、99.5％或100％同一性的序列。实施方案20是根据前述实施方案中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽进一步包含铁蛋白蛋白。实施方案21是根据实施方案2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含疏螺旋体属的OspA血清型1多肽，其中所述多肽不包含SEQ ID NO:77的序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180403 US 62/652,2101.一种抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含疏螺旋体属的OspA血清型1多肽，其中所述多肽不包含SEQIDNO:77的序列。


2.根据权利要求1所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽缺乏跨膜结构域或跨膜结构域的一部分。


3.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽是非脂化的。


4.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中相对于SEQIDNO:77的序列存在至少一种氨基酸取代，其中所述取代降低与SEQIDNO:78的同一性，或是非保守性的并且不导致与SEQIDNO:78的更高同一性。


5.根据权利要求4所述的抗原性OspA多肽，其中所述取代降低与SEQIDNO:78的同一性。


6.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中SEQIDNO:77的一个或多个氨基酸被非血清型1OspA的一个或多个相应氨基酸置换。


7.根据权利要求6所述的抗原性OspA多肽，其中所述非血清型1OspA是血清型2、3、4、5、6或7OspA。


8.根据权利要求6所述的抗原性OspA多肽，其中SEQIDNO:77的每个氨基酸被血清型2、3、4、5、6或7OspA的相应氨基酸置换。


9.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽进一步包含用以减少或消除糖基化的修饰。


10.根据权利要求9所述的抗原性OspA多肽，其中所述修饰包括对至少一个天冬酰胺的取代。


11.根据权利要求10所述的抗原性OspA多肽，其中所述至少一个天冬酰胺包括OspA血清型1的N71、N190、N202和N251中的任何一个、两个、三个或更多个。


12.根据权利要求11所述的抗原性OspA多肽，其中所述至少一个天冬酰胺包括OspA血清型1的N71、N190、N202和N251。


13.根据权利要求10-12中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述一个或多个天冬酰胺被谷氨酰胺取代。


14.根据权利要求10-13中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述多肽缺乏N-糖基化位点。


15.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，其中所述OspA来自博氏疏螺旋体(Borreliaburgdorferi)、梅奥疏螺旋体(Borreliamayonii)、阿氏疏螺旋体(Borreliaafzelii)、伽氏疏螺旋体(Borreliagarinii)或巴伐利亚疏螺旋体(Borreliabavariensis)。


16.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含与SEQIDNO:1、3、4或53中任一个的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％、99.5％或100％同一性的序列。


17.根据权利要求1-16中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含SEQIDNO:1-10或12-76中任一个的序列。


18.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含OspA胞外结构域。


19.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含与SEQIDNO:94-102中任一个的序列具有至少85％、90％、95％、97％、98％、99％、99.5％或100％同一性的序列。


20.根据前述权利要求中任一项所述的抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽进一步包含铁蛋白蛋白。


21.根据权利要求20所述的抗原性OspA多肽，其中所述铁蛋白包含用半胱氨酸置换表面暴露的氨基酸的突变。


22.一种抗原性OspA多肽，所述抗原性OspA多肽包含OspA多肽和铁蛋白，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·J·纳贝尔，CJ·魏，H·坎普，R·魏，K·斯旺森，
申请(专利权)人：赛诺菲，
类型：发明
国别省市：法国;FR