一种从菌包中提取木聚糖酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种从菌包中提取木聚糖酶的方法，该方法包括利用菌包栽培废料粉碎混合均匀，加入混合液，制取上清酶液；取上清酶液，用硫酸铵沉淀进行沉淀，收集沉淀；置入缓冲液至沉淀完全溶解，磁力搅拌器上透析；并制取上清得到粗酶液；用缓冲液洗脱，收集各洗脱峰，检测各管酶活，合并有酶活管，冷冻浓缩，得到木聚糖酶；进行盐离子梯度洗脱，收集各洗脱峰；检测各洗脱峰的酶活，冷冻干燥，再次得到木聚糖酶；本发明专利技术原料丰富、成本较低，有效利用废料，提取方法简单，提取的木聚糖酶的活力高、纯度高，提取率更高，不仅能够实现食用菌废菌包的循环再利用，减少资源浪费，也扩展了木聚糖酶的来源，具有较高的经济价值。

【技术实现步骤摘要】
一种从菌包中提取木聚糖酶的方法
本专利技术属于木聚糖酶生产提取
，特别涉及一种从菌包中提取木聚糖酶的方法。
技术介绍
木聚糖酶是指可将木聚糖降解成低聚糖和木糖的一组酶的总称，主要包括β-1,4木聚糖酶和β-木糖苷酶，它能将植物中的木聚糖降解成单糖。木聚糖酶是一种新型酶制剂，目前主要应用于饲料、酿造工业中，已成为世界上产销量最大的五种工业酶制剂之一。木聚糖酶作为饲料添加剂，可以有效水解非淀粉多糖等抗营养因子，破解植物细胞壁、促进植物有效物质的释放，降低肠道食糜粘度，增强动物对营养物质的吸收、动物的生产能力，提高饲料利用率、降低饲料成本，增强畜、禽抗病能力，降低发病率，减少动物排泄物造成的污染。因此，木聚糖酶是一种环保型添加剂，在发展环保型畜牧业中具有十分重要的意义与价值。将酸性木聚糖酶用于啤酒行业，能够降解大麦等谷物细胞壁中的木糖，有助于加快酶的作用，提高麦芽汁的过滤速度，防止啤酒浑浊，减少生产成本。生产木聚糖酶的原材料有很多种，包括玉米芯、豆饼粉、麸皮、玉米浆、乳清粉等，但是产品的酶活性并不高。食用菌菌包在栽培过程中会产生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从菌包中提取木聚糖酶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：/na，菌包栽培废料粉碎混合均匀，按料液比1:5加入水和缓冲液的混合液，其中水和缓冲液比为1:4，混合均匀，20℃静置1.5h；采用纱布过滤，25℃下10000r/min离心10-15min，取上清酶液；/nb，取上清酶液10mL，用30wt.%硫酸铵进行一次硫酸铵沉淀，70wt.%硫酸铵进行二次硫酸铵沉淀，10℃下盐析3-6h，20℃下10000r/min离心10-15min，收集沉淀；/nc，置入缓冲液至沉淀完全溶解，取10ml溶解液，20℃下磁力搅拌器上透析；每隔1h更换一次透析液，直至向透析液中加入0.1mol/LBa...

【技术特征摘要】
1.一种从菌包中提取木聚糖酶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
a，菌包栽培废料粉碎混合均匀，按料液比1:5加入水和缓冲液的混合液，其中水和缓冲液比为1:4，混合均匀，20℃静置1.5h；采用纱布过滤，25℃下10000r/min离心10-15min，取上清酶液；
b，取上清酶液10mL，用30wt.%硫酸铵进行一次硫酸铵沉淀，70wt.%硫酸铵进行二次硫酸铵沉淀，10℃下盐析3-6h，20℃下10000r/min离心10-15min，收集沉淀；
c，置入缓冲液至沉淀完全溶解，取10ml溶解液，20℃下磁力搅拌器上透析；每隔1h更换一次透析液，直至向透析液中加入0.1mol/LBaCl2溶液，检测无白色沉淀产生为止；收集溶解液，25℃下10000r/min离心10-15min，取上清冷冻干燥，得到可溶蛋白，置入缓冲液至可溶蛋白完全溶解，25℃下10000r/min离心10-15min，取上清得到粗酶液；
d，缓冲液平衡SephadexG-100葡聚糖凝胶层析，流速为1mL/min，直至记录仪上的基准...

【专利技术属性】
技术研发人员：李同彪，朱津津，周安琪，朱妍妍，王冶，王明成，王震，
申请(专利权)人：黄淮学院，
类型：发明
国别省市：河南;41