低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13制造技术

本发明专利技术公开了一种低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13，该突变体MutV268Δ13具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比，突变酶MutV268Δ13的热活性和热稳定性发生了改变，在低温下的活性提高，在中温下的活性和稳定性降低，有利于应用于低温环境要求下的生物技术领域。温度从0℃上升到25℃，InuAMN8的活性从15％上升到74％，MutV268Δ13的活性从24％上升到94％；50℃处理后，InuAMN8保持81％以上的活性，MutV268Δ13的酶活从25％降至0％。本发明专利技术的突变体MutV268Δ13可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。

【技术实现步骤摘要】
低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13
本专利技术涉及一种外切菊粉酶突变体，具体涉及一种低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13。
技术介绍
菊粉主要存在于菊芋、菊苣、蒲公英、牛蒡和朝鲜蓟等植物体的根部或茎部，是一种来源丰富的可再生资源。菊芋价格低廉、产量高，更重要的是菊芋属于非粮作物，这些特点使菊芋的有效利用成为关注的焦点。外切菊粉酶是一类能水解β-2,1-D-果聚糖的水解酶，可将菊粉降解，生成糖含量高达95％的果糖浆。果糖广泛用于食品、医药、生物能源等行业。因而，外切菊粉酶可应用于食品、酿酒和医药等行业中(SinghRSetal.InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,2017,96:312–322.)。在一些实际的应用中，需要低温环境，例如低温下的食品处理可防止微生物的污染、营养损失和食品品质降低，清酒和葡萄酒的发酵、水产养殖环境、洗涤、污水处理通常在低温下进行；此外，低温处理还可降低能耗(Cavicchiolietal.MicrobialBi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13，其特征在于，该突变体MutV268Δ13具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13，其特征在于，该突变体MutV268Δ13具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。


2.如权利要求1所述的突变体MutV268Δ13的编码基因mutV268Δ13。


3.根据权利要求2所述的编码基因mutV268Δ13，其特征在于，该编码基因mutV268Δ13具有如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。


4.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutV268Δ13的重组载体。


5.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutV268Δ13的重组菌。


6.如权利要求1所述的突变体MutV268Δ13的制备方法，其特征在于，该方法包含：
将具有如SEQIDNO.4所示核苷酸序列的野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy-E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy-E1-inuAMN8；
以质粒pEasy-E1-inuAMN8为模板，以如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示核苷酸序列的突变引物，通过PCR扩增得到包含mutV268Δ13的重组表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：张蕊，周峻沛，黄遵锡，岑潇龙，许波，韩楠玉，唐湘华，李俊俊，吴倩，高艳秀，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：云南;53