低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G制造技术

本发明专利技术公开了一种低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G，该突变体MutS117G具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比，突变酶MutS117G的热活性和热稳定性发生了改变，突变酶MutS117G的低温活性变高但热稳定性变差。纯化的野生酶InuAMN8的最适温度为35℃，而突变酶MutS117G的最适温度为25℃；50℃处理后，野生酶InuAMN8的酶活从88％降至81％，而突变酶MutS117G的酶活从87％降至58％；55℃处理后，野生酶InuAMN8的酶活剩余70％，而突变酶则完全失活。本发明专利技术的突变体MutS117G可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。

【技术实现步骤摘要】
低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G
本专利技术涉及一种外切菊粉酶突变体，具体涉及一种低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G。
技术介绍
菊芋适合在贫瘠坡地、干旱盐碱的非耕边际土地上种植，不与农作物争耕地，具有产量高、耐寒、耐贫瘠及耐干旱等优点。菊粉是构成菊芋块茎的主要成分，可占其湿重的19％或干重的70％。外切菊粉酶可降解菊粉，生成果糖和少部分的葡萄糖，该果糖浆中果糖含量可达到总糖量的95％。果糖广泛用于食品、医药、生物能源等行业。例如，果糖可作为天然甜味剂替代蔗糖；果糖代谢不受胰岛素的制约，可以供糖尿病患者食用；果糖经酵母等发酵后可以用来生产生物乙醇。因而，外切菊粉酶可应用于食品、酿酒和生物能源等行业中(SinghRSetal.InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,2017,96:312–322)。在一些实际的应用中，需要低温环境，例如低温下的食品处理可防止微生物的污染、营养损失和食品品质降低，清酒和葡萄酒的发酵、水产养殖环境、洗涤、污水处理通常在低温下进行；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G，其特征在于，该突变体MutS117G具有如SEQID NO.1所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G，其特征在于，该突变体MutS117G具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。


2.如权利要求1所述的突变体MutS117G的编码基因mutS117G。


3.根据权利要求2所述的编码基因mutS117G，其特征在于，该编码基因mutS117G具有如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。


4.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutS117G的重组载体。


5.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutS117G的重组菌。


6.如权利要求1所述的突变体MutS117G的制备方法，其特征在于，该方法包含：
将具有如SEQIDNO.4所示核苷酸序列的野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy-E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy-E1-inuAMN8；
以质粒pEasy-E1-inuAMN8为模板，以如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示核苷酸序列的突变引物，通过PCR扩增得到包含mutS117G的重组表达质...

【专利技术属性】
技术研发人员：周峻沛，张蕊，黄遵锡，岑潇龙，唐湘华，许波，李俊俊，韩楠玉，吴倩，高艳秀，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：云南;53