一种脐带间充质干细胞外泌体制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种脐带间充质干细胞外泌体制剂及其制备方法，涉及外泌体制剂制备技术领域。其包括脐带间充质干细胞外泌体、人血白蛋白和基础溶剂，脐带间充质干细胞外泌体制剂中人血白蛋白的质量浓度为5％

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞外泌体制剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及外泌体制剂制备
，具体而言，涉及一种脐带间充质干细胞外泌体制剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]外泌体(exosomes)是动物组织细胞形成并释放到外周血液和体液中的大小为40～150nm的扁盘状细胞外囊泡。其中，脐带间充质干细胞的外泌体在实际应用中具有来源易得、脐带间充质干细胞分离培养技术成熟等优势，且脐带间充质干细胞的外泌体具有抗衰老、美容的有益功效。
[0003]目前，尚无报道将脐带间充质干细胞的外泌体配制为制剂。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种脐带间充质干细胞外泌体制剂及其制备方法以解决上述技术问题。
[0006]本专利技术是这样实现的：
[0007]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞外泌体制剂，其包括脐带间充质干细胞外泌体、人血白蛋白和基础溶剂，脐带间充质干细胞外泌体制剂中人血白蛋白的质量浓度为5％
‑
10％，基础溶剂为生理盐水，生理盐水的质量浓度为0.85％
‑
0.9％。
[0008]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述每毫升脐带间充质干细胞外泌体制剂中脐带间充质干细胞外泌体的含量为107‑
109个。
[0009]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脐带间充质干细胞外泌体制剂还包括稳定剂，稳定剂包括质量浓度为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.04％
‑
0.06％谷氨酰胺。
[0010]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述稳定剂包括质量浓度为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.05％
‑
0.06％谷氨酰胺。
[0011]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脐带间充质干细胞外泌体制剂的pH为7.0
‑
8.0。
[0012]本专利技术还提供了一种脐带间充质干细胞外泌体制剂的制备方法，该制备方法包括将基础溶剂、脐带间充质干细胞外泌体和人血白蛋白混合制得混合液。
[0013]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述制备方法还包括调节混合液的pH至7.0
‑
8.0。
[0014]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述制备方法还包括调节pH后对混合液进行除菌过滤。
[0015]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述除菌过滤是指采用220nm滤膜进行过滤。
[0016]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述制备方法还包括向混合液中加入质量浓度
为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.04％
‑
0.06％谷氨酰胺。
[0017]一种脐带间充质干细胞外泌体制剂在制备注射剂中的应用。
[0018]本专利技术具有以下有益效果：
[0019]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞外泌体制剂，该制剂以生理盐水为基础溶剂，基于生理盐水的渗透压与血浆的渗透压相等或接近，使得该外泌体制剂更符合注射剂的要求，满足人体的注射，避免引起疼痛等不适。而人血白蛋白是血浆中的主要蛋白质，加入人血白蛋白后使得脐带间充质干细胞外泌体处于一个蛋白质溶液环境，有利于维持生物大分子的稳定性。本专利技术提供的脐带间充质干细胞外泌体制剂易于长期保存，在长期保存过程中可以保持外泌体的结构和生物活性，可用于制备注射剂。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0021]图1为外泌体的荧光电子显微镜观察图；
[0022]图2为FGF高精度ELISA定量检测散点图(标准曲线图)。
具体实施方式
[0023]现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。
[0024]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞外泌体制剂，其包括脐带间充质干细胞外泌体、人血白蛋白和基础溶剂，脐带间充质干细胞外泌体制剂中人血白蛋白的质量浓度为5％
‑
10％，基础溶剂为生理盐水，生理盐水的浓度为0.85％
‑
0.9％。
[0025]生理盐水具有良好的等渗作用，同时也是良好的溶剂，专利技术人选择生物盐水作为基础溶剂，基于生理盐水的渗透压与血浆的渗透压相等或接近，使得该外泌体制剂更符合注射剂的要求，满足人体的注射，避免引起疼痛等不适。
[0026]人血白蛋白是血浆中的主要蛋白质，加入人血白蛋白后使得脐带间充质干细胞外泌体处于一个蛋白质溶液环境，有利于维持生物大分子的稳定性。
[0027]基于人血白蛋白和生理盐水的配合作用，本专利技术提供的脐带间充质干细胞外泌体制剂得以长期保存，在长期保存过程中可以保持外泌体的结构和生物活性，可用于制备注射剂，成品符合无菌、无热原、安全性、稳定性等注射剂要求。
[0028]专利技术人研究发现，当基础溶剂选自磷酸盐缓冲液时，可能引起血管疼痛反应，当基础溶剂选自葡萄糖注射液可能升高血糖引起不适，而以生理盐水为基础溶剂最为合适。
[0029]当添加的人血白蛋白浓度低于5％时，保存的外泌体的生物活性低于90％，因此，专利技术人选择5％
‑
10％的人血白蛋白浓度。优选为5％，更高浓度的人血白蛋白浓度有利于使得外泌体的生物活性超过95％，但成本更高。当将人血白蛋白替换为复合氨基酸保存外泌
体时，外泌体的活性较差。
[0030]需要说明的是，本专利技术提供的脐带间充质干细胞外泌体制剂可以在37℃下保存10天以上，外泌体仍可保持90％以上的生物活性。即在2
‑
8℃存放，订立12月有效期。
[0031]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述每毫升脐带间充质干细胞外泌体制剂中脐带间充质干细胞外泌体的含量为107‑
109个。
[0032]优选地，每毫升脐带间充质干细胞外泌体制剂中脐带间充质干细胞外泌体的含量为108个。专利技术人研究发现当外泌体的含量在这个浓度下，无论是局部皮下使用或静脉注射全身使用，直接注射都不会由于浓度太高引起不适，也不会由于外泌体太稀功效不足。
[0033]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脐带间充质干细胞外泌体制剂还包括稳定剂，稳定剂包括质量浓度为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.04％
‑
0.06％谷氨酰胺。
[0034本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞外泌体制剂，其特征在于，其包括脐带间充质干细胞外泌体、人血白蛋白和基础溶剂，所述脐带间充质干细胞外泌体制剂中所述人血白蛋白的质量浓度为5％
‑
10％，所述基础溶剂为生理盐水，所述生理盐水的质量浓度为0.85％
‑
0.9％。2.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞外泌体制剂，其特征在于，每毫升所述脐带间充质干细胞外泌体制剂中所述脐带间充质干细胞外泌体的含量为107‑
109个。3.根据权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞外泌体制剂，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体制剂还包括稳定剂，所述稳定剂包括质量浓度为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.04％
‑
0.06％谷氨酰胺。4.根据权利要求3所述的脐带间充质干细胞外泌体制剂，其特征在于，所述稳定剂包括质量浓度为0.01％
‑
0.02％的丙酮酸钠和质量浓度为0.05％
‑
0.06％谷氨酰胺。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的脐带间充质干...

【专利技术属性】
技术研发人员：麦志国，刘元旦，陈群珍，尹丽珍，
申请(专利权)人：广州研华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：