一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法技术

本发明专利技术公开了一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，包括以下步骤：化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成；化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成；化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成；化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成；蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成。在合成的过程中以Trt-β-Ala-OH，Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料避免使用LiOH处理氨基酸酯的反应，减少反应步骤，降低消旋杂质产生，提高了中间体纯度。通过重结晶获得高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl后用醋酸溶液脱除Trt，最用乙醚沉淀后直接得到SYN-AKE的醋酸盐，避免使用强腐蚀性的三氟乙酸作裂解试剂，环境友好，同时避免了制备纯化转盐过程，节约了成本。了成本。了成本。

【技术实现步骤摘要】
一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法


[0001]本专利技术属于制药领域，具体涉及一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法。

技术介绍

[0002]SYN-AKE为DSM全资子公司pentapharm 2007年开发的一种模拟蛇毒毒素Waglerin I活性的类蛇毒三肽。和肉毒杆菌和阿基瑞林一样，在除皱方面亦有特效，但是相比肉毒杆菌却更安全有效。肽序为H-β-Ala-Pro-Dab-NHBzl，分子结构如下所示：
[0003][0004]文献Tetrahedron Letters 55(2014)5745
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5747介绍了一种以不保护氨基酸为原料，最后一步采用霍夫曼重排反应全液相合成SYN-AKE的方法。专利CN201711270645公开了一种类蛇毒三肽的液相合成方法，该方法将Boc-β-Ala-OH和H-Pro-OMe
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HCl为原料制备Boc-β-Ala-Pro-OMe，进一步用LiOH处理得到Boc-β-Ala-Pro-OH；采用相同方法和H-Dab(Boc)-OMe
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HCl反应得到Boc-β-Ala-Pro-Dab(Boc)-OH；再和苄胺反应得Boc-β-Ala-Pro-Dab(Boc)-NH-Bzl，最后用三氟乙酸脱去Boc保护基并制备纯化得纯度大于95％的类蛇毒三肽。
[0005]文献Tetrahedron Letters 55(2014)5745方法步骤繁琐，全合成收率低于10％。专利CN201711270645公开方法以H-Pro-OMe
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HCl及H-Dab(Boc)-OMe
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HCl需要LiOH强碱处理，不但增加步骤，而且可能会造成消旋杂质产生。因为需用三氟乙酸脱除Boc保护基，三氟乙酸对设备腐蚀性较高。另外，三氟乙酸脱除Boc保护基后获得的是SYN-AKE的三氟乙酸盐，需要通过制备色谱柱进行纯化转盐获得SYN-AKE的醋酸盐，步骤繁琐，成本增加。
[0006]为了克服上述缺点，本专利技术提供了一种合成路线简单、环境友好而且不需制备色谱柱纯化转盐就可直接获得SYN-AKE醋酸盐形式的合成方法，使得生产成本大为降低。

技术实现思路

[0007]为了解决上述
技术介绍
中所提出的问题，本专利技术的目的在于提供一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法。本专利技术以Trt-β-Ala-OH，Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料采用2+2合成策略经过逐步偶联获得Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl，重结晶获得高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl后用醋酸溶液脱除Trt，最用乙醚沉淀后直接得到SYN-AKE的醋酸盐。
[0008]为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，包括以下步骤：
[0009]1)化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成；
[0010]2)化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
[0011]3)化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
[0012]4)化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
[0013]5)蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成。
[0014]进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成方法为：以化合物1(Trt-β-Ala-OH)和HONb或化合物1(Trt-β-Ala-OH)和HOSu为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，在DIC或DCC作用下进行活化反应后，在碱的作用下与H-Pro-OH进行偶联反应得到化合物2(Trt-β-Ala-Pro-OH)。
[0015]进一步地，所述Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu的摩尔比均为1：1.0～1.2；
[0016]所述Trt-β-Ala-OH和H-Pro-OH的摩尔比为1：1.0～1.2；
[0017]所述活化反应所用的活化剂优选为DIC；
[0018]所述活化反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
[0019]所述偶联反应所用的碱为DIPEA、N-甲基吗啉、碳酸氢钠或碳酸氢钾，优选DIPEA；
[0020]所述偶联反应的温度为室温，反应时间为1-3小时，优选为2小时；
[0021]所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷。
[0022]进一步地，所述化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物3(Fmoc-Dab(Trt)-OH)为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，与苄胺进行偶联反应得到化合物4(Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl)。
[0023]进一步地，所述Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺的摩尔比为1：1.0～1.2；
[0024]所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
[0025]所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷；
[0026]所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，所述偶联剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIPEA＝1：1：3。
[0027]进一步地，所述化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物4(Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl)为原料，在溶剂存在下，用有机碱脱除Fmoc保护基得到化合物5(H-Dab(Trt)-NHBzl)。
[0028]进一步地，所述脱除Fmoc保护基的有机碱为二乙胺、哌啶或DBU有机碱，优选为二乙胺；
[0029]所述脱保护反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
[0030]所述溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、水，优选二氯甲烷。
[0031]进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以中间体化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，进行偶联反应得到化合物6(Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl)。
[0032]进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的摩尔比为1.0～1.5:1；
[0033]所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，包括以下步骤：1)化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成；2)化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成；3)化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成；4)化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成；5)蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成。2.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成方法为：以化合物Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，在DIC或DCC作用下进行活化反应后，在碱的作用下与H-Pro-OH进行偶联反应得到化合物Trt-β-Ala-Pro-OH。3.根据权利要求2所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu的摩尔比均为1：1.0～1.2；所述Trt-β-Ala-OH和H-Pro-OH的摩尔比为1：1.0～1.2；所述活化反应所用的活化剂优选为DIC；所述活化反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；所述偶联反应所用的碱为DIPEA、N-甲基吗啉、碳酸氢钠或碳酸氢钾，优选DIPEA；所述偶联反应的温度为室温，反应时间为1-3小时，优选为2小时；所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷。4.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，与苄胺进行偶联反应得到化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl。5.根据权利要求4所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺的摩尔比为1：1.0～1.2；所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷；所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，所述偶联剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIPEA＝1：1：3。6.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在溶剂存在下，用有机碱脱除Fmoc保护基得到化合物H-Dab(Trt)-NHBzl。7.根据权利要求6...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶志强，袁慧星，尹传龙，陶安进，余品香，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：