一种从鸦胆子中提取分离的新化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及中药的提取、分离领域，尤其涉及从鸦胆子中提取、分离和鉴定出的新化合物及其分离方法和应用。本发明专利技术提供新化合物，分子式为C

【技术实现步骤摘要】
一种从鸦胆子中提取分离的新化合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及中药的提取、分离领域，尤其涉及从鸦胆子种子中提取、分离和鉴定出的新化合物及其分离方法，具体为一种从鸦胆子中提取分离的新化合物及其制备方法和应用。
[0002]背景内容鸦胆子是苦木科鸦胆子（Bruceajavanica ( L. ) Merr.）的干燥成熟果实，主要分布于我国的广东、广西等地区。全世界鸦胆子属植物有6种，我国有2种，为鸦胆子和柔毛鸦胆子，均不同程度地作为民间传统用药，具有多种药理活性。据2020版《中国药典》记载，鸦胆子具有良好的清热解毒、截疟、止痢、腐蚀赘疣等作用，内用治疗各种疟疾、痢疾，外用治疗赘疣、鸡眼等。现代药理活性研究表明，鸦胆子有抗炎、拒食、抗疟、抗病毒、抗溃疡、降血糖和除草等多方面的作用。目前，鸦胆子油乳及其软胶囊已作为临床一线抗癌药在国内上市销售，用于多种癌症的辅助性治疗。具有很高的药用价值，民间还用于治疗多种疾病。
[0003]然而，近年来国内外关于鸦胆子的化学成分报道较少，目前报道的鸦胆子主要有效化学成分为苦木内酯类化合物，且物质基础尚不明确。因此亟待对鸦胆子种子的化学成分进行深入研究，分离其中的活性成分。

技术实现思路

[0004]专利技术目的：针对上述问题，本专利技术提供了一种从鸦胆子种子中提取分离的新化合物Bi
‑4‑
Methoxycarbonyl
‑2‑
quinolone及其制备方法和应用，经研究发现本专利技术的新化合物具有显著的抗炎及抗癌活性。同时提供一种针对本专利技术新化合物的简便、快速、纯度高的提取分离方法。
[0005]技术方案：本专利技术提供的所述新化合物分子式为C
22
H
18
N2O6，命名为Bi
‑4‑
Methoxycarbonyl
‑2‑
quinolone，化学结构式为：。
[0006]上述新化合物的制备方法包括以下步骤：（a）将鸦胆子种子粉碎，采用石油醚脱脂2
‑
3次，过滤，得脱脂鸦胆子药材；（b）待脱脂鸦胆子药材挥干石油醚后，加入乙醇溶液回流提取2
‑
3次，每次1.5
‑
2 h，合并提取液，过滤，减压浓缩滤液，得提取物；（c）将提取物加甲醇溶解，然后加入硅胶拌样，上样于硅胶柱，分别用体积比为
100:1、20:1、2:1、0:1的二氯甲烷
‑
甲醇梯度洗脱，共得4个馏分A、B、C、D；（d）将馏分B进行色谱分离纯化，得到所述新化合物。
[0007]进一步地，步骤（d）所述馏分B进行色谱分离纯化的步骤具体为：（1）将馏分B上样于HP
‑
20大孔吸附树脂柱进行柱层析，分别用体积比为30%、50%、70%、95%的甲醇
‑
水梯度洗脱，获得70%甲醇洗脱物；（2）取70%甲醇洗脱物进行硅胶柱层析，分别用体积比为100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1的二氯甲烷
‑
甲醇梯度洗脱，共得8个馏分B
‑2‑
a、B
‑2‑
b、B
‑2‑
c、B
‑2‑
d、B
‑2‑
e、B
‑2‑
f、B
‑2‑
g、B
‑2‑
h；（3）取馏分B
‑2‑
d进行Sephadex LH
‑
20凝胶柱色谱分离，用纯甲醇进行洗脱，洗脱液经TLC检识后，得6个洗脱部位B
‑2‑
d
‑
L1、B
‑2‑
d
‑
L2、B
‑2‑
d
‑
L3、B
‑2‑
d
‑
L4、B
‑2‑
d
‑
L5、B
‑2‑
d
‑
L6；（4）取凝胶柱色谱洗脱部位B
‑2‑
d
‑
L3经半制备HPLC纯化，体积比为13:87的乙腈
‑
0.1%甲酸水溶液洗脱，从洗脱液中收集主峰得到纯的新化合物。
[0008]进一步地，步骤（a）中，石油醚的加入量为鸦胆子种子质量的4
‑
6倍，脱脂温度35
‑
45℃，每次脱脂时间10
‑
12 h。
[0009]进一步地，步骤（b）中，乙醇溶液的浓度为90
‑
95%，乙醇溶液加入量与脱脂鸦胆子药材的体积比为（8
‑
10）：1，提取温度为98
‑
100℃。
[0010]进一步地，步骤（c）中，提取物按照0.88
‑
0.92g/mL加甲醇进行溶解，所述硅胶为100
‑
200目，所述硅胶与提取物的质量比为1：（0.9
‑
0.92），所述硅胶柱为5kg100
‑
200目硅胶柱。
[0011]进一步地，步骤（1）中，馏分B与大孔吸附树脂的体积比为1：（18
‑
22），步骤（2）中，70%甲醇洗脱物与硅胶的体积比为1：（28
‑
32）。
[0012]进一步地，步骤（3）中Sephadex LH
‑
20凝胶柱的色谱条件为：色谱柱尺寸1200*30 mm，粒径10 μm，流速2 ml/min。
[0013]进一步地，步骤（4）中半制备HPLC的色谱条件为：C18色谱柱，色谱柱尺寸180*5 mm，粒径5 μm，流速0.8 ml/min。
[0014]本
技术实现思路
还包括所述的新化合物在制备抗炎、抗肿瘤药物中的应用。
[0015]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具备以下优点：本专利技术中所述鸦胆子种子中新化合物的分离纯化和药理活性研究未被现有论文期刊所报道，本专利技术提供来源于鸦胆子种子的新化合物及一种针对本专利技术新化合物的提取分离纯化方法，采用醇提取、大孔吸附树脂柱层析、硅胶柱层析、凝胶柱层析及半制备HPLC进行分离纯化，成功获得新的化合物，操作方法简便及快速，且经该方法分离得到的化合物纯度较高，均大于95%，此外经研究表明以上化合物具有显著的抗炎及抗肿瘤活性，可用于制备抗炎及抗肿瘤的药物。
附图说明
[0016]图1为本专利技术制备的新化合物的化学结构式；图2为本专利技术从鸦胆子中提取分离新化合物的工艺流程图；图3为本专利技术制备的新化合物的1H NMR谱图；
图4为本专利技术制备的新化合物的
13
C NMR谱图；图5为本专利技术制备的新化合物的DEPT NMR谱图；图6为本专利技术制备的新化合物的HSQC谱图；图7为本专利技术制备的新化合物的HMBC谱图；图8为本专利技术制备的新化合物的1H
‑1H COSY谱图；图9为本专利技术制备的新化合物的NOESY 谱图；图10为本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从鸦胆子中提取分离的新化合物，其特征在于：所述新化合物的分子式为C
22
H
18
N2O6，其化学结构式如下：。2.根据权利要求1所述的从鸦胆子中提取分离的新化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）将鸦胆子种子粉碎，采用石油醚脱脂2
‑
3次，过滤，得脱脂鸦胆子药材；（b）待脱脂鸦胆子药材挥干石油醚后，加入乙醇溶液回流提取2
‑
3次，每次1.5
‑
2 h，合并提取液，过滤，减压浓缩滤液，得提取物；（c）将提取物加甲醇溶解，然后加入硅胶拌样，上样于硅胶柱，用体积比为100:1、20:1、2:1、0:1的二氯甲烷
‑
甲醇梯度洗脱，共得4个馏分A、B、C、D；（d）将馏分B进行色谱分离纯化，得到所述新化合物。3.根据权利要求2所述的从鸦胆子中提取分离的新化合物的制备方法，其特征在于：步骤（d）所述馏分B进行色谱分离纯化的步骤具体为：（1）将馏分B上样于HP
‑
20大孔吸附树脂柱进行柱层析，用体积比为30%、50%、70%、95%的甲醇
‑
水梯度洗脱，获得70%甲醇洗脱物；（2）取70%甲醇洗脱物进行硅胶柱层析，用体积比为100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1的二氯甲烷
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甲醇梯度洗脱，共得8个馏分B
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a、B
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b、B
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c、B
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d、B
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e、B
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f、B
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g、B
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h；（3）取馏分B
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d进行Sephadex LH
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20凝胶柱色谱分离，用纯甲醇进行洗脱，洗脱液经TLC检识后，得6个洗脱部位B
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d
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L1、B
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d
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L2、B
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d
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L3、B
‑2‑
d
‑
L4、B

【专利技术属性】
技术研发人员：温泉，何潇，冯育林，杨世林，吴佳辉，熊紫薇，
申请(专利权)人：江西中医药大学，
类型：发明
国别省市：