用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基制造技术

本发明专利技术提出了一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌计数。该培养基包括：无乳糖培养基质以及脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物和氯化钠。该培养基可有效用于活菌制剂中的杂菌的计数，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题，提高了活菌制剂的用药安全性。

【技术实现步骤摘要】
用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基
本专利技术涉及生物医药检测领域，具体地，本专利技术涉及用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基，更具体地，用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基以及活菌制剂中的杂菌进行检测的方法。
技术介绍
在活菌制剂的制备过程中，由于原辅料包材中有时会含有极其微量的或者在活菌制剂的制备过程会引入微量的杂菌，如芽孢菌，其代表菌株为枯草芽孢杆菌，革兰氏阳性球菌，其代表菌株为金黄色葡萄球菌。出于药品安全的考虑，该杂菌的含量必须严格控制在安全范围内，才可上市。目前市售含有芽孢类的产品如：思连康的双歧杆菌四联活菌片、整肠生的地衣芽孢杆菌活菌胶囊和地衣芽孢杆菌活菌颗粒、京常乐的地衣芽孢杆菌活菌胶囊、天悦婷的枯草杆菌活菌胶囊、美常安的枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊、妈咪爱的枯草杆菌、肠球菌二联活菌多维颗粒剂、源首的蜡样芽孢杆菌活菌胶囊、常复康的蜡样芽孢杆菌片、阿泰宁的酪酸梭菌活菌胶囊、常立宁的酪酸梭菌活菌片、宝乐安的酪酸梭菌活菌散、米桑的酪酸梭菌活菌胶囊、常乐康的酪酸梭菌二联活菌散和酪酸梭菌二联活菌胶囊、爽舒宝的凝结芽孢杆菌活菌片以及米雅的酪酸梭菌活菌散剂和酪酸梭菌活菌片。而现有的活菌制剂的药典规定的杂菌的检测方法中采用的培养基无法排除含有芽孢类菌微生态制剂中芽孢杆菌对检测的干扰。因此，如果采用现有的方法检测活菌制剂的杂菌的含量，不可避免的会产生假阴性的检测结果，对药品的安全存在极大隐患；同时，活菌制剂如果含有芽孢杆菌，采用现有的方法检测活菌制剂的杂菌的含量时，芽孢杆菌会在营养琼脂培养基上生长蔓延严重，干扰杂菌辨别，故无法用现有方法进行杂菌检测，因此需要寻找一种能够抑制目的菌的物质，达到抑制微生态制剂中芽孢类菌生长，但不干扰杂菌的生长。因此，开发一种新型的可用于活菌制剂的杂菌有效检测的培养基和方法，是保证活菌制剂用药安全的必要举措。
技术实现思路
本申请的专利技术人基于对现有抑菌剂和检测活菌制剂的杂菌培养基成分的认识，通过抑菌剂的筛选实验，并将现有培养基中加入不同量的抑菌剂，通过考察杂菌在培养基中的回收率以及培养基对该杂菌生长的影响，确定了一种可同时应用于活菌制剂中铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌含量检测的培养基和方法，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题和蜡样芽孢杆菌会在营养琼脂培养基上生长蔓延而干扰杂菌辨别的问题，提高了活菌制剂的用药安全性。在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测。根据本专利技术的实施例，所述培养基包括：无乳糖培养基质以及脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、氯化钠。根据本专利技术实施例培养基一方面通过无乳糖培养基质克服了活菌制剂中活菌对杂菌检测的干扰，另一方面脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体作为抑菌剂对活菌制剂中的活性成分菌进一步抑制而对活菌制剂中杂菌抑制作用微小，使得活菌制剂中的杂菌可在该培养基中选择性生长和扩增。根据本专利技术实施例的培养基可有效用于活菌制剂中的杂菌的计数，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题，提高了活菌制剂的用药安全性。根据本专利技术的实施例，上述培养基还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述活菌制剂中至少包括芽孢杆菌活性菌。根据本专利技术实施例的培养基可有效抑制芽孢杆菌的生长，但不会完全抑制待检杂菌的生长，因此，根据本专利技术实施例的培养基可适用于包括芽孢杆菌活性菌制剂中杂菌的计数，如思连康的双歧杆菌四联活菌片、整肠生的地衣芽孢杆菌活菌胶囊和地衣芽孢杆菌活菌颗粒、京常乐的地衣芽孢杆菌活菌胶囊、天悦婷的枯草杆菌活菌胶囊、美常安的枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊、妈咪爱的枯草杆菌、肠球菌二联活菌多维颗粒剂、源首的蜡样芽孢杆菌活菌胶囊、常复康的蜡样芽孢杆菌片、阿泰宁的酪酸梭菌活菌胶囊、常立宁的酪酸梭菌活菌片、宝乐安的酪酸梭菌活菌散、米桑的酪酸梭菌活菌胶囊、常乐康的酪酸梭菌二联活菌散和酪酸梭菌二联活菌胶囊、爽舒宝的凝结芽孢杆菌活菌片以及米雅的酪酸梭菌活菌散剂和酪酸梭菌活菌片等。根据本专利技术的具体实施例，所述芽孢杆菌活性菌包括选自蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述活菌制剂中包括双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种活性菌。根据本专利技术的实施例，所述杂菌包括选自铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的至少之一。专利技术人发现，在添加活菌制剂的情况下，根据本专利技术实施例的培养基培养所述铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的至少之一，其回收率达到了0.5～2.0。根据本专利技术实施例的培养基能够抑制活菌制剂中的活性菌，但不影响铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的生长。利用根据本专利技术实施例的培养基检测活菌制剂中铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的至少之一的含量，灵敏度和准确度更高，结果更加真实可信。根据本专利技术的实施例，所述脱氧胆酸钠在所述培养基中的浓度为0.03-0.25g/L，优选0.07-0.15g/L，更优选0.1～0.15g/L。专利技术人发现，脱氧胆酸钠的用量对杂菌生长影响显著，脱氧胆酸钠的用量在0.03-0.25g/L范围内，能够使得铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的至少之一的回收率达到0.5～2.0内，且对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的生长没有显著抑制；当脱氧胆酸钠的用量在0.07-0.15g/L时，对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的回收率均达到0.5以上，能够满足同时对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌准确检测的需求。根据本专利技术的实施例，所述培养基的pH为7.1～7.5。例如为7.3。在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测，所述杂菌包括选自枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的至少之一。根据本专利技术的实施例，基于1L水，所述培养基包括：13～17g胰酪胨、3～7g氯化钠、3～7g大豆木瓜蛋白酶水解物以及0.03-0.25g的脱氧胆酸钠，所述培养基的pH为7.1～7.5。根据本专利技术实施例的培养基对活菌制剂中的杂菌具有很好的选择作用，尤其可用于包含蜡样芽孢杆菌活菌制剂的杂菌检测，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题，提高了活菌制剂的用药安全性。根据本专利技术的实施例，上述培养基还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述脱氧胆酸钠为0.07-0.15g，优选0.1～0.15g。在本专利技术的第三方面，本专利技术提出了一种对活菌制剂中的杂菌进行检测的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：(1)将活菌制剂供试液接种在前面所述培养基中；(2)将接种有活菌制剂供试液的培养基在适本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测，其特征在于，包括：无乳糖培养基质以及脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物和氯化钠。/n

【技术特征摘要】
1.一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测，其特征在于，包括：无乳糖培养基质以及脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物和氯化钠。


2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述活菌制剂中至少包括芽孢杆菌活性菌。


3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述芽孢杆菌活性菌包括选自蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的至少之一。


4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述微生态活菌制剂中至少包括蜡样芽孢杆菌。


5.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述杂菌包括选自铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的至少之一。


6.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述脱氧胆酸钠在所述培养基中的浓度为0.03-0.25g/L，优选0.07-0.15g/L，更优选0.1～0.15g/L。


7.一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测，所述杂菌包括选自枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、铜...

【专利技术属性】
技术研发人员：李颖，俞雅君，傅叶青，姚诗婷，
申请(专利权)人：杭州远大生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33