尿液胰腺甘油三酯脂肪酶蛋白及其多肽片段在正常妊娠中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种尿液胰腺甘油三酯脂肪酶（pancreatic triacylglycerol lipase，PTL）蛋白及其多肽片段的应用，具体为尿液PTL蛋白及其多肽片段在制备用于监测正常妊娠制剂中的应用。本发明专利技术通过研究证实，与正常育龄妇女组（正常对照）相比，PTL蛋白及其多肽片段在正常妊娠组表达升高，可用于妊娠状态的监测。本发明专利技术发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测尿液PTL蛋白及其多肽片段。白及其多肽片段。白及其多肽片段。

【技术实现步骤摘要】
尿液胰腺甘油三酯脂肪酶蛋白及其多肽片段在正常妊娠中的应用


[0001]本专利技术涉及尿液胰腺甘油三酯脂肪酶(PTL)蛋白及其多肽片段的新用途，具体涉及尿液PTL蛋白及其多肽片段在监测正常妊娠中的应用。

技术介绍

[0002]妊娠过程中，为适应胎儿生长发育需要，孕妇的生殖、血液循环、泌尿、呼吸、消化及内分泌等系统会发生一系列变化，尤其是内分泌系统，促性腺激素分泌减少，催乳素、促甲状腺激素和促肾上腺皮质激素、糖皮质醇、醛固酮、甲状腺激素等分泌增加。妊娠中晚期，部分孕妇对胰岛素的敏感性下降，对胰岛素产生分解、拮抗作用，使胰岛素活性降低，孕妇不能正常代偿这种生理变化而出现妊娠期糖尿病（Gestational Diabetes Mellitus, GDM）。如果血糖水平控制不佳，妊娠期糖尿病妇女在妊娠期高血压疾病、流产、剖宫产、早产、新生儿低血糖、新生儿高胆红素血症等不良妊娠结局发生率明显高于正常孕产妇。对于确诊的妊娠期糖尿病患者，后期血糖控制标准和控制要求会更加严格，监测更加频繁。为提高妊娠期患者的生活质量和医从性，减轻妊娠期血糖检测多次采血的痛苦，针对不同孕期制定更为精细化、个性化的监测指标，期望通过尿液蛋白或多肽研究，实现用无痛、方便、快捷、易重复的尿液检测或监测体内糖水平及糖代谢情况，也为进一步尿液多肽检测试剂盒的研究奠定基础。
[0003]作为胰腺外分泌蛋白，胰甘油三酯脂肪酶对于有效消化膳食脂肪是必不可少的。胰甘油三酯脂肪酶除了在脂肪消化中的重要性外，在医学治疗、医学诊断和工业中也有潜在的应用。胰腺脂肪酶的发育不仅与年龄相关，还受到膳食结构、内分泌激素等的调节，其表达的改变与肥胖等代谢性疾病有着密切的关系。胰腺脂肪酶的调节可能是治疗肥胖等代谢性疾病的靶点。在成人胰液中PLT占总蛋白的7.7%是断奶后和成年期甘油三脂消化的主要酶类，PLT有高效水解脂肪的作用，高脂饮食增加增加PLT的表达和酶活性。也有研究显示PTL也可能参与视黄醇酯的水解，促进视黄醇的利用和吸收。
[0004]妊娠期妇女不仅膳食结构更加合理、随着孕龄的增加，摄入的膳食脂肪不断增加，因此胰腺分泌的胰甘油三酯脂肪酶增加，本实验通过可尿液中可检测到胰甘油三酯脂肪酶的变化。
[0005]与常用的临床血液样本相比，尿液可以完全无创、连续、大量收集；没有稳态调节，可累积更多种类、更大幅度的变化，机体的很多病理生理变化可能体现在尿液中。一些激素和细胞因子等分子量相对较小的蛋白多肽入血后，会很快被排泄进入尿液，这些蛋白和多肽在尿液中被检测到的概率比在血中大很多；尿液收集之前，尿中可能的蛋白降解过程已经完成，所以尿蛋白可在较长时间内保持稳定。为减轻妊娠妇女血糖检测多次采血的痛苦，本实验在前期方法学摸索的基础上，希望通过尿液蛋白或多肽的检测能够实现对妊娠状态的监测和了解。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种尿液胰腺甘油三酯脂肪酶(PTL)蛋白及其多肽片段在制备用于监测正常妊娠制剂中的应用。
[0007]优选地，所述尿液PTL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示（MLPLWTLSLL LGAVAGKEVC YERLGCFSDD SPWSGITERP LHILPWSPKD VNTRFLLYTN ENPNNFQEVA ADSSSISGSN FKTNRKTRFI IHGFIDKGEE NWLANVCKNL FKVESVNCIC VDWKGGSRTG YTQASQNIRI VGAEVAYFVE FLQSAFGYSP SNVHVIGHSL GAHAAGEAGR RTNGTIGRIT GLDPAEPCFQ GTPELVRLDP SDAKFVDVIH TDGAPIVPNL GFGMSQVVGH LDFFPNGGVE MPGCKKNILS QIVDIDGIWE GTRDFAACNH LRSYKYYTDS IVNPDGFAGF PCASYNVFTA NKCFPCPSGG CPQMGHYADR YPGKTNDVGQ KFYLDTGDAS NFARWRYKVS VTLSGKKVTG HILVSLFGNK GNSKQYEIFK GTLKPDSTHS NEFDSDVDVG DLQMVKFIWY NNVINPTLPR VGASKIIVET NVGKQFNFCS PETVREEVLL TLTPC）；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。
[0008]优选地，所述PTL蛋白及其多肽片段来自于尿液。
[0009]优选地，所述尿液PTL蛋白及其多肽片段在正常妊娠妇女中高表达。
[0010]优选地，所述制剂为正常妊娠妇女尿液PTL蛋白及其多肽片段检测试剂盒。
[0011]优选地，所述试剂盒包括能够特异性结合PTL蛋白及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种。
[0012]优选地，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体、第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。
[0013]优选地，所述标准品包括PTL蛋白标准品、人源化标签抗体标准品；较佳地，所述质控品包括：PTL蛋白控品、人源化标签抗体质控品；较佳地，所述固相载体包括：微粒、微球、玻片、试纸条、塑料珠、液相芯片、微孔板或亲和膜。
[0014]优选地，所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种。
[0015]专利技术人首先收集了正常育龄妇女、正常妊娠妇女和妊娠糖尿病患者的尿液标本，离心后取上清，利用弱阳离子交换磁珠纯化和分离尿液标本。将 1μl标本与10μl基质混匀后，取1μl点在 Anchorchip靶板上，标本离子化后进行质谱分析，采集1000-10000Da范围内的数据，获得由不同质荷比的蛋白峰构成的质谱多肽图。应用BioExplorer分析软件对正常育龄妇女、正常妊娠妇女和妊娠糖尿病组的所有质谱图进行分析，筛选差异性多肽。然后专利技术人对具有统计学意义的差异性多肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定，在数据库检索得到差异表达的PTL蛋白，并且与正常育龄组相比，PTL蛋白在正常妊娠妇女和妊娠期糖尿病患者的尿液中呈高表达。
[0016]本专利技术通过研究证实与正常育龄组相比，PTL蛋白及其多肽片段在正常妊娠妇女和妊娠期糖尿病患者的尿液中高表达。从而提出检测尿液PTL蛋白及其多肽片段可用于正常妊娠的监测或辅助诊断。
[0017]本专利技术发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检尿液PTL蛋白及其多肽片段。
[0018]为让本专利技术的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，
并配合附图，作详细说明如下。
[0019]附图说明
[0020]图1是PTL蛋白在正常育龄妇女、正常妊娠妇女和妊娠糖尿病患者尿液的峰面积分布图。
[0021]图2是PTL蛋白在正常育龄妇女、正常妊娠妇女和妊娠糖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.尿液胰腺甘油三酯脂肪酶（PTL)蛋白及其多肽片段在制备用于监测正常妊娠制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液PTL蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PTL蛋白及其多肽片段来自于尿液。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液PTL蛋白及其多肽片段在正常妊娠妇女中高表达。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂为正常妊娠妇女尿液PTL蛋白及其多肽片段检测试剂盒。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括能够特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，胡智颖，
申请(专利权)人：张曼，
类型：发明
国别省市：