尿液及尿液外泌体中制造技术

本发明专利技术提供一种尿液及尿液外泌体中

【技术实现步骤摘要】
尿液及尿液外泌体中Clusterin蛋白在2型糖尿病中的应用


[0001]本专利技术涉及尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白的新用途，具体涉及尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白在2型糖尿病诊断
、
鉴别
、
监测及机理研究等的应用
。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种慢性代谢性疾病，2型糖尿病占糖尿病的
90%
以上
。
糖尿病患者需要长期甚至终身监测，目前用于2型糖尿病实验室临床监测的标志物多为血清学标志物，如
FPG、OGTT、HbA1c
等
。
反复有创的抽血检查给患者造成了身心痛苦和经济负担，因此，寻求一种方便无创的标志物用于2型糖尿病的监测显得尤为重要
。
[0003]尿液是血浆的超滤液，包含多种与疾病相关的潜在生物标志物
。
与血浆蛋白相比，尿液蛋白具有更高的热力学稳定性，尿液中的低丰度蛋白更容易观测
。
同时尿液收集简单无创，可做到大量重复收集
。
近年来，尿液蛋白质组学不断发展，给予了尿液蛋白标志物发展的空间
。
尿液小分子多肽有望成为2糖尿病早期监测中无创且便捷的标志物
。
[0004]Clusterin
是于
1979
年在公羊睾丸网液中发现的一种高度丰富的伴侣糖蛋白，在体液和器官中广泛存在，如睾丸
、
卵巢<br/>、
肾上腺
、
肝脏等
。
研究证明
Clusterin
与载脂蛋白
J
有相同的序列，它构成一个单独的高密度脂蛋白的子类
。
在发生细胞异常死亡或增生的疾病中，
Clusterin
的表达增加已被证实
。
其中包括脑神经退行性疾病，如阿尔茨海默氏病
。Clusterin
蛋白还参与许多生物学过程，如免疫调节，脂质运输
、
凋亡蛋白死亡以及应激诱导等方面
。
其中，
Clusterin
通过与补体因子
、
免疫球蛋白
、
转化生长因子
β
等分子相互作用，在炎症和免疫应答中发挥重要作用
。
[0005]外泌体广泛分布于各种体液中，如：尿液
、
唾液
、
血液
、
羊水
、
脑脊液及病理性腹水等
。
相对于其他体液，尿液具有取样安全简单
、
样本量大且无创等优点，因此，尿液外泌体研究对泌尿系统疾病的早期诊断
、
治疗
、
监测靶点以及疾病的机制研究具有重大的意义
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白在制备用于2型糖尿病诊断
、
鉴别
、
监测及机理研究等的应用
。
[0007]优选地，所述尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白的氨基酸序列包括
SEQ ID NO.1
所示（ mmktlllfvg llltwesgqv lgdqtvsdne lqemsnqgsk yvnkeiqnav ngvkqiktli ektneerktl lsnleeakkk kedalnetre setklkelpg vcnetmmalw eeckpclkqt cmkfyarvcr sgsglvgrql eeflnqsspf yfwmngdrid sllendrqqt hmldvmqdhf srassiidel fqdrfftrep qdtyhylpfs lphrrphfff pksrivrslm pfspyeplnf hamfqpflem iheaqqamdi hfhspafqhp ptefiregdd drtvcreirh nstgclrmkd qcdkcreils vdcstnnpsq aklrreldes lqvaerltrk ynellksyqw kmlntsslle qlneqfnwvs rlanltqged qyylrvttva shtsdsdvps gvtevvvklf dsdpitvtvp vevsrknpkf metvaekalq eyrkkhree
）； 或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的，且与
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。
[0008]优选地，所述制剂为2型糖尿病患者尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白检测试剂盒
。
[0009]优选地，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒，能够特异性结合
Clusterin
蛋白及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种
。
[0010]优选地，所述检测方法包括直接检测
Clusterin
蛋白及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒
。
[0011]优选地，所述检测方法包括直接检测
Clusterin
蛋白及其多肽片段的相关核酸检测等方法及其相关试剂盒
。
[0012]优选地，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体
、
第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液
、
显色液
、
终止液中的任意一种或几种的组合
。
[0013]优选地，所述标准品包括
Clusterin
蛋白标准品
、
人源化标签抗体标准品；较佳地，所述质控品包括：
Clusterin
蛋白质控品
、
人源化标签抗体质控品；较佳地，所述固相载体包括：微粒
、
微球
、
玻片
、
试纸条
、
塑料珠
、
液相芯片
、
微孔板或亲和膜等以及同等功能的其他载体
。
[0014]优选地，所述固相载体的材质为聚氯乙烯
、
聚苯乙烯
、
聚丙酰胺
、
纤维素中的任意一种及具有类似功能的载体
。
[0015]专利技术人首先收集了健康人
、2
型糖尿病患者的尿液标本，
4000r/min
离心
5min
后，吸取上清，其中
100ml
用尺寸排阻法提取外泌体，后将尿液以及尿液外泌体悬液置于
‑
80℃
冰箱保存...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白在制备用于2型糖尿病诊断
、
鉴别
、
监测及机理研究等的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:1
所示；或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的，且与
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。3.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂为2型糖尿患者尿液及尿液外泌体中
Clusterin
蛋白检测试剂盒
。4.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒，能够特异性结合
Clusterin
蛋白及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种
。5.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测方法包括直接检测
Clusterin
蛋白及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒
。6.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测方法包括直接检测
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，
申请(专利权)人：张曼，
类型：发明
国别省市：