E3制造技术

本发明专利技术提供一种尿液外泌体

【技术实现步骤摘要】
E3泛素连接酶CHIP及其多肽片段作为尿液参比标志物的应用


[0001]本专利技术涉及尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段的新用途，具体涉及
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段作为尿液外泌体的稳定表达蛋白，具有在儿童
、
青少年
、
中年及老年整个人体生命周期尿液稳定表达特点，可作为尿液内参标志物
、
比对标志物在制备用于尿液外泌体检测，外泌体研究
、
健康人群临床研究
、
相关疾病诊断
、
鉴别诊断
、
病情程度与活动性判断
、
治疗效果评价
、
监测
、
预后评估及机理研究中的应用
。

技术介绍

[0002]泛素化修饰是一种蛋白质翻译后修饰，其广泛参与机体的各种生理活动
。
泛素化修饰能介导蛋白质的蛋白酶体和溶酶体依赖的降解，清除异常或正常废弃蛋白，其不仅广泛参与
DNA
修复
、
细胞生长及细胞周期调控，还参与到免疫系统发育和免疫反应各个阶段之中
。
除此之外，泛素化修饰也参与到许多非蛋白降解功能调节过程中，其在蛋白激酶活化
、
信号传导
、
调控组蛋白修饰
、
病毒出芽以及囊泡转运等方面发挥着重要调控作用
。
在广泛参与机体功能调节的泛素化系统中，由于 E3 泛素连接酶能特异性识别作用底物，其可决定泛素化修饰的特异性
。
有研究发现，
E3
泛素连接酶功能异常与肿瘤
、
心血管疾病
、
神经系统疾病
、
自身免疫性疾病或个体发育异常等息息相关
。
热休克蛋白
70 碳末端程互作用蛋白（
Carboxy terminus of Hsc70 Interacting Protein, CHIP
）是由
Ballinger
等于
1999
年从心脏 cDNA 文库中发现，
CHIP
可通过
E3 泛素连接酶发挥生物学效应
。CHIP
所介导的泛素
‑
蛋白酶体通路，在维持胞浆中蛋白质的稳态中发挥重要作用，
E3 泛素连接酶 CHIP 是细胞内蛋白质质量控制的关键因素之一
。
本研究
E3 ubiquitin
‑
protein ligase CHIP
在不同年龄分组的人群尿液外泌体中普遍存在，且组间无差别稳定表达
。
[0003]与常用的临床血液样本相比，尿液可以完全无创
、
连续
、
大量收集；可累积更多种类
、
更大幅度的变化，机体的很多病理生理变化可能体现在尿液中
。
一些激素和细胞因子等分子量相对较小的蛋白多肽入血后很快被代谢并排泄入尿液，其在尿液中被检测到的概率较血中大幅增加；尿中可能的蛋白降解过程在样本收集前已经完成，尿蛋白可在较长时间内保持稳定
。
外泌体具有膜性囊泡结构，分子稳定性高，尿液外泌体蛋白质组学研究将二者优势结合，具备良好生物标志物来源的特质
。
本实验在前期方法学摸索的基础上，期望通过尿液蛋白或多肽研究，实现将无创
、
方便
、
快捷
、
易重复的尿液外泌体稳定表达蛋白应用于尿液内参标志物
、
尿液外泌体研究
、
健康人群临床研究
、
相关疾病诊断
、
鉴别诊断
、
病情程度与活动性判断
、
治疗效果评价
、
监测
、
预后评估及机理研究中，也为进一步尿液多肽检测试剂盒的研究奠定基础
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段作为尿液内参标志物
、
比对标志物在制备用于尿液外泌体检测，外泌体研究
、
健康人群临床研究
、
相关疾病诊断
、
鉴别诊断
、
病情程度与活动性判断
、
治疗效果评价
、
监测
、
预后评估及机理研
究中的应用
。
[0005]优选地，所述尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
的氨基酸序列包括
SEQ ID NO.1
所示（
MKGKEEKEGG ARLGAGGGSP EKSPSAQELK EQGNRLFVGR KYPEAAACYGRAITRNPLVA VYYTNRALCY LKMQQHEQAL ADCRRALELD GQSVKAHFFLGQCQLEMESY DEAIANLQRA YSLAKEQRLN FGDDIPSALR IAKKKRWNSIEERRIHQESE LHSYLSRLIA AERERELEEC QRNHEGDEDD SHVRAQQACIEAKHDKYMAD MDELFSQVDE KRKKRDIPDY LCGKISFELM REPCITPSGITYDRKDIEEH LQRVGHFDPV TRSPLTQEQL IPNLAMKEVI DAFISENGWVEDY ）；或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的，且与
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。
[0006]优选地，所述制剂为尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段检测试剂盒
。
[0007]优选地，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种
。
[0008]优选地，所述检测方法包括直接检测
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒
。
[0009]优选地，所述检测方法包括直接检测
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段的相关核酸检测等方法及其相关试剂盒
。
[0010]优选地，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体
、
第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液
、
显色液
、
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段作为尿液外泌体稳定表达的蛋白作为尿液内参标志物
、
比对标志物在制备用于尿液外泌体检测，外泌体研究
、
健康人群临床研究
、
相关疾病诊断
、
鉴别诊断
、
病情程度与活动性判断
、
治疗效果评价
、
监测
、
预后评估及机理研究的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:1
所示；或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的，且与
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。3.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂为尿液外泌体
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段检测试剂盒
。4.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合
E3
泛素连接酶
CHIP
及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种
。5.
根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测方法包括直接检测
E3
泛素连接酶
CHI...

【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，
申请(专利权)人：张曼，
类型：发明
国别省市：