一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用，该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂包括如下等重量份的菌种：布拉迪酵母菌、丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、嗜热链球菌、开菲尔乳杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母和东方醋酸菌，包括配置培养基、菌种活化、菌种浓缩、放大培养、冻干混合等步骤制成，其中添加的布拉迪酵母菌具有多种效用可有效改善肠道环境与促进其他益生菌的生长发育，且制备使用一种活化培养设备，在培养之后可以快速的进行离心浓缩，减少了培养之后取出离心浓缩的步骤，减少了染菌的危害，使整个制备过程更加迅速安全，使生产的发酵剂纯度更高，效果更好。效果更好。效果更好。

【技术实现步骤摘要】
一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及开菲尔发酵剂
，具体为一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]开菲尔是以牛乳、羊乳或山羊乳为原料，添加含有乳酸菌和酵母菌的开菲尔粒发酵剂，经发酵酿制而成的一种传统酒精发酵乳饮料，是一种具有轻微的起泡性和含低度酒精的发酵乳饮料，适合大多数人群饮用。传统的开菲尔，是以牛奶或羊奶为原料，由开菲尔粒或开菲尔粒中必需菌相作发酵剂，制得的一种带有酒味的发酵乳，又称牛奶酒或酸乳酒，有“发酵乳制品中的香槟”之称。开菲尔粒上主要栖息着乳酸菌、酵母菌和醋酸菌等微生物，菌相极为复杂，不同地区和来源的开菲尔粒中所含菌相有一定差异。由于开菲尔粒中多种有益微生物的代谢作用，使得开菲尔酸奶含有比普通酸奶更为丰富的微生物及其代谢产物。但现有开菲尔发酵剂的制备基本上需要使用原有开菲尔粒才能继续扩大培养，在不使用原粒的情况下无法生产新粒，因此产业化难以发酵出和粒子产物一致的功能性饮料。

技术实现思路

[0003](一)解决的技术问题
[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用，用于解决现有开菲尔发酵剂的制备基本上需要使用原有开菲尔粒才能继续扩大培养，在不使用原粒的情况下无法生产新粒，因此产业化难以发酵出和粒子产物一致的功能性饮料的问题。
[0005](二)技术方案
[0006]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用，该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂包括如下等重量份的菌种：布拉迪酵母菌、丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、嗜热链球菌、开菲尔乳杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母和东方醋酸菌；
[0007]该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法包括如下步骤：
[0008]步骤S1：将无菌水、培养基A、培养基B、培养基C分别加入4个洗净烘干的三角瓶中，加量到三角瓶的瓶身三分之二，使用三角瓶封口膜封口，放入高压灭菌锅，设置温度115℃，灭菌30～35min，灭菌结束后取出置于4℃冰箱保存待用；
[0009]步骤S2：将培养罐A、培养罐B、培养罐C、培养罐D用高压灭菌袋包好，放入高压蒸汽灭菌锅中，设置温度121℃，灭菌20～30min，灭菌结束后取出装有培养罐A、培养罐B、培养罐C、培养罐D的高压灭菌袋，置于鼓风干燥箱，于70～80℃烘干5～10min，然后使用质量分数为75％的酒精喷洒高压灭菌袋表面，转移至无菌室的无菌操作台，在进入无菌操作台之前再喷洒一次质量分数为75％的酒精，同时将步骤S1置于冰箱保存待用三角瓶取出，瓶身使用质量分数为75％的酒精喷洒灭菌，然后转移至上述无菌操作台；
[0010]步骤S3：在无菌操作台中打开培养罐A的罐盖，将布拉迪酵母菌、毕赤酵母、酿酒酵母与培养基A加入培养罐A中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐B的罐盖，将丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜热链球菌与培养基B加入培养罐B中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐C的罐盖，将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、开菲尔乳杆菌、东方醋酸菌与培养基C加入培养罐C中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐D的罐盖，将无菌水加入培养罐D中，待用；控制操作后的培养罐A、培养罐B、培养罐C以及培养罐D的质量比为1：1：1：1；
[0011]步骤S4：打开活化培养设备的紫外灯一与紫外灯二，进行紫外杀菌处理30～45min，关闭紫外灯一与紫外灯二，打开箱门一，将培养罐A、培养罐B、培养罐C以及培养罐D分别加入活化培养设备的四个放罐筒中，关闭箱门一设置温控器一为温度30～37℃，设置转动电机转速为100～180r/min，发酵2～3d，期间换气扇工作进行换气，然后将气缸降下，使离心盘落入离心组件的内部，然后齿轮转动，带动盖板滑动，闭合离心组件，然后启动转动电机，设置转速2000～2500r/min，设置温控器二温度为0～5℃，离心10～15min，然后打开箱门二，齿轮反向转动，打开盖板，然后取出培养罐A、培养罐B、培养罐C，在无菌操作台中将培养罐A、培养罐B、培养罐C中的浓缩菌液取出混合，得到各活化菌株；
[0012]步骤S5：将原培养罐A、培养罐B、培养罐C中得到的各活化菌株分别加入放有灭菌的培养基A、培养基B、培养基C的发酵罐，均加入细胞保护剂，分别在温度30℃、40℃、37℃条件下放大培养3
‑
5d，培养结束后取出置于冷冻干燥箱于温度
‑
50～
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40℃冻干24～36h，然后按等细胞数目混合，即得到一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂，所述培养基A、培养基B、培养基C的体积用量为发酵罐体积的五分之三。
[0013]进一步地，所述培养基A由如下步骤制成：
[0014]将土豆去皮切块，置于铁锅中，加入去离子水煮沸，保持20～30min，结束后冷却至室温，使用纱布过滤，补充去离子水，控制最终土豆与去离子水的用量比为2g：10mL；然后加入无水葡萄糖，控制无水葡萄糖与去离子水的用量比为20g：1L；无水葡萄糖完全融化后，加入增殖因子A，即得到培养基A；
[0015]所述增殖因子A为0.1～0.3mg/mL锌离子、0.04～0.06mg/mL的生物素以及0.05～0.06mg/mL的肌醇混合而得，所述增殖因子A的用量为去离子水体积的1％～3％。
[0016]进一步地，所述培养基B由如下步骤制成：
[0017]在烧杯中加入去离子水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠，在温度40～45℃，转速200～600r/min条件下搅拌至胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠完全溶解，然后调节pH至7.0～7.1，加入增殖因子B，即得到培养基B。
[0018]所述去离子水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠以及增殖因子B的用量比为1L：10g：5g：5g：10～20mL，所述增殖因子B为0.1～0.3mg/mL镁离子、质量分数为10％～20％葡萄糖混合而得。
[0019]进一步地，所述培养基C由如下步骤制成：
[0020]在烧杯中加入质量分数为10～15％的脱脂牛奶，加入蛋白水解酶与增殖因子，转速50～150r/min搅拌5～10min，搅拌结束后调节pH至6.5，即得到培养基C；
[0021]所述蛋白水解酶、脱脂牛奶、增殖因子C的用量比为1000U：1L：10～20mL，所述增殖因子C为0.3～0.5g/L的麦芽汁、0.1g～0.3g/L的酵母粉以及1～5g/L的番茄汁混合而得。
[0022]进一步地，步骤S3所述培养罐A的罐盖可通气，培养罐B和培养罐C的罐盖为密封设
置。
[0023]进一步地，所述步骤S4所述活化培养设备包括机箱和底座；
[0024]所述底座固定设置于机箱底部的四个顶角的位置，所述机箱的正面设有箱门一与箱门二，所述机箱包括培养室与离心室，所述培养室位于离心室的上方，所述培养室与离心室之间设有隔板，且隔板内部开设有孔洞；<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法，其特征在于：该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂包括如下等重量份的菌种：布拉迪酵母菌、丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、嗜热链球菌、开菲尔乳杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母和东方醋酸菌；该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法包括如下步骤：步骤S1：将无菌水、培养基A、培养基B、培养基C分别加入4个洗净烘干的三角瓶中，加量到三角瓶的瓶身三分之二，使用三角瓶封口膜封口，放入高压灭菌锅，设置温度115℃，灭菌30～35min，灭菌结束后取出置于4℃冰箱保存待用；步骤S2：将培养罐A、培养罐B、培养罐C、培养罐D用高压灭菌袋包好，放入高压蒸汽灭菌锅中，设置温度121℃，灭菌20～30min，灭菌结束后取出装有培养罐A、培养罐B、培养罐C、培养罐D的高压灭菌袋，置于鼓风干燥箱，于70～80℃烘干5～10min，然后使用质量分数为75％的酒精喷洒高压灭菌袋表面，转移至无菌室的无菌操作台，在进入无菌操作台之前再喷洒一次质量分数为75％的酒精，同时将步骤S1置于冰箱保存待用三角瓶取出，瓶身使用质量分数为75％的酒精喷洒灭菌，然后转移至上述无菌操作台；步骤S3：在无菌操作台中打开培养罐A的罐盖，将布拉迪酵母菌、毕赤酵母、酿酒酵母与培养基A加入培养罐A中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐B的罐盖，将丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜热链球菌与培养基B加入培养罐B中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐C的罐盖，将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、开菲尔乳杆菌、东方醋酸菌与培养基C加入培养罐C中，关闭罐盖摇匀待用；打开培养罐D的罐盖，将无菌水加入培养罐D中，待用；控制操作后的培养罐A、培养罐B、培养罐C以及培养罐D的质量比为1：1：1：1；步骤S4：打开活化培养设备的紫外灯一(31)与紫外灯二(42)，进行紫外杀菌处理30～45min，关闭紫外灯一(31)与紫外灯二(42)，打开箱门一(11)，将培养罐A、培养罐B、培养罐C以及培养罐D分别加入活化培养设备的四个放罐筒(453)中，关闭箱门一(11)设置温控器一(34)为温度30～37℃，设置转动电机(49)转速为100～180r/min，发酵2～3d，期间换气扇(33)工作进行换气，然后将气缸(46)降下，使离心盘(45)落入离心组件(41)的内部，然后齿轮(415)转动，带动盖板(412)滑动，闭合离心组件(41)，然后启动转动电机(49)，设置转速2000～2500r/min，设置温控器二(411)温度为0～5℃，离心10～15min，然后打开箱门二(12)，齿轮(415)反向转动，打开盖板(412)，然后取出培养罐A、培养罐B、培养罐C，在无菌操作台中将培养罐A、培养罐B、培养罐C中的浓缩菌液取出混合，得到各活化菌株；步骤S5：将原培养罐A、培养罐B、培养罐C中得到的各活化菌株分别加入放有灭菌的培养基A、培养基B、培养基C的发酵罐，均加入细胞保护剂，分别在温度30℃、40℃、37℃条件下放大培养3
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5d，培养结束后取出置于冷冻干燥箱于温度
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50～
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40℃冻干24～36h，然后按等细胞数目混合，即得到一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂，所述培养基A、培养基B、培养基C的体积用量为发酵罐体积的五分之三。2.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法，其特征在于：所述培养基A由如下步骤制成：将土豆去皮切块，置于铁锅中，加入去离子水煮沸，保持20～30min，结束后冷却至室温，使用纱布过滤，补充去离子水，控制最终土豆与去离子水的用量比为2g：10mL；然后加入无水葡萄糖，控制无水葡萄糖与去离子水的用量比为20g：1L；无水葡萄糖完全融化后，加入
增殖因子A，即得到培养基A；所述增殖因子A为0.1～0.3mg/mL锌离子、0.04～0.06mg/mL的生物素以及0.05～0.06mg/mL的肌醇混合而得，所述增殖因子A的用量为去离子水体积的1％～3％。3.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法，其特征在于：所述培养基B由如下步骤制成：在烧杯中加入去离子水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠，在温度4...

【专利技术属性】
技术研发人员：束震，
申请(专利权)人：安徽旭辰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：