一株短双歧杆菌及其培养方法和用途技术

本发明专利技术提供一株短双歧杆菌及其培养方法和用途，该短双歧杆菌的分类命名为短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)grx05，其已于2021年1月4日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.21589，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明专利技术提供的短双歧杆菌，不仅对大多数抗生素敏感，且还具有较好的耐胃酸和耐胆盐能力，进而可以降低其潜在的风险，使其具有较为广阔的用途前景。使其具有较为广阔的用途前景。使其具有较为广阔的用途前景。

【技术实现步骤摘要】
一株短双歧杆菌及其培养方法和用途


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体而言，本专利技术涉及一株短双歧杆菌及其培养方法和用途。

技术介绍

[0002]益生菌(Probiotics)是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥对肠道有益作用的活性有益微生物的总称。然而，随着抗生素的广泛使用，甚至滥用，导致益生菌对有些抗生素产生耐药性及其耐药基因，而该耐药基因存在转移到其它肠道菌群和致病菌的潜在可能，若其它肠道菌群和致病菌具有上述耐药基因，则可能不会受到抗生素的影响，从而严重危害宿主的健康。
[0003]目前，益生菌主要包括乳酸菌、双歧杆菌、乳球菌，其中，双歧杆菌在食品药品中具有不可替代的作用，现有的大量研究表明双歧杆菌具有调整肠道菌群、免疫和防治腹泻等益生功能，尤其是短双歧杆菌。可食用的益生菌制品中主要包含有短双歧杆菌，该短双歧杆菌由于具有耐胃酸和耐胆汁能力，因而可长时间定植于人体内。
[0004]然而，从现有的乳制品和药品中分离得到的短双歧杆菌对一些抗生素(例如卡那霉素、链霉素、巴龙霉素和新霉素等)具有耐药性，且耐胃酸和耐胆盐能力也不是较好，从而导致含有上述短双歧杆菌的乳制品和药品的功效受到较大的影响。

技术实现思路

[0005]鉴于上述问题，本专利技术的目的就是提供一株短双歧杆菌及其培养方法和用途。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]第一个方面，本专利技术提供了一株短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)grx05，所述短双歧杆菌已于2021年1月4日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.21589，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0008]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌是从健康母乳中分离得到的。
[0010]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌对选自以下的抗生素敏感：利福平、氨苄西林、万古霉素、环丙沙星、头孢唑林、头孢唑林、青霉素和氯霉素。
[0011]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌在pH为2.5的胃酸液中处理3h后的活菌存活率不小于90％。
[0012]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌在浓度为0.1％w/v的胆盐中处理3h后的活菌存活率不小于70％，其中，w/v表示重量比总混合物的体积。
[0013]在本专利技术的一些实施方案中，所述短双歧杆菌对选自以下的致病菌具有抑制作用：枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌和假单胞菌。
[0014]第二个方面，本专利技术提供了一株上述任一实施方案中所述的短双歧杆菌的培养方
法，所述培养方法包括如下步骤：
[0015]将短双歧杆菌grx05接种于MRS培养基中，并在厌氧条件下培养。
[0016]第三个方面，本专利技术提供了上述任一实施方案中所述的短双歧杆菌在制备益生菌制品中的用途。
[0017]在本专利技术的一些实施方案中，所述益生菌制品为发酵乳、乳饮料、活菌制剂、发酵果蔬饮料、奶粉或米粉。
[0018]本专利技术提供的实施方案，至少具有如下有益效果：
[0019]1)本专利技术提供的短双歧杆菌，不仅对大多数抗生素敏感，且还具有较好的耐胃酸和耐胆盐能力，进而可以降低其潜在的风险，使其具有较为广阔的用途前景。
[0020]2)本专利技术提供的上述短双歧杆菌的制备方法，该方法简单，可以快速获得本专利技术的短双歧杆菌。
[0021]3)本专利技术提供的上述短双歧杆菌在制备益生菌制品中的用途，含有该短双歧杆菌的益生菌制品具有较低的潜在风险，并能够降低益生菌的摄入成本，提升益生菌摄入体验及提高消费者的身体素质。
[0022]除了上面所描述的本专利技术解决的技术问题、构成技术方案的技术特征以及由这些技术方案的技术特征所带来的有益效果外，本专利技术提供的短双歧杆菌及其培养方法和用途所能解决的其他技术问题、技术方案中包含的其他技术特征以及这些技术特征带来的有益效果，将在具体实施方式中作出进一步详细的说明。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0024]图1为本专利技术实施例1培养所得的短双歧杆菌grx05的菌落形态图；
[0025]图2为本专利技术实施例1培育所得的短双歧杆菌grx05的系统进化树图。
[0026]关于生物材料保藏的说明
[0027]本专利技术涉及下列已在于中国普通微生物菌种保藏管理中心(中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号)进行保藏的生物材料：
[0028]短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)grx05，其保藏编号为CGMCCNO.21589，保藏日期为2021年1月4日。
具体实施方式
[0029]除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。
[0030]除非特别说明，本专利技术实施例所用培养基和试验条件为本领域常规培养基和试验条件。除非特别说明，本专利技术实施例所用试剂均为市购。
[0031]实施例1：菌株的筛选
[0032]1、样品采集
[0033]采集样品前，对健康志愿者的乳头进行严格的卫生处理，然后收集10mL左右母乳置于无菌离心管中，然后保存于
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80℃超低温冰箱中。
[0034]2、菌株分离
[0035]1)菌株初筛
[0036]分别将富集培养后和直接梯度稀释后的的母乳样品分别倾注于MRS
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Y1和MRS
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Y2液体培养基中，于厌氧袋中37℃培养24～48h至长出单个菌落，挑选具有双歧杆菌典型形态如白色或乳白色的特征单菌落。
[0037]2)菌株复筛
[0038]将初筛所得到的的菌种划线接种于含溴甲酚紫的MRS
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G1和MRS
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G2固体培养基中，厌氧培养48h，长出单菌落后，于显微镜下观察菌体形态，将选取的具有典型双歧杆菌和乳杆菌形态的菌株进行后续实验。
[0039]图1为本实施例培养所得的菌株的菌落形态图。
[0040]从来源于母乳的样品中共分离出69个菌株，经纯化后在改良MRS培养基和普通MRS培养基上菌落形态呈白色且表面光滑；经革兰氏染色后，筛选后得到24株革兰氏阳性菌，其编号和名称如表1所示。
[0041]在上述菌株初筛和复筛过程中所使用的培养基组成如下：
[0042]改良MRS液体培养基的组成如下：
[0043]蛋白胨10.0g/L，牛肉浸粉8本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株短双歧杆菌(Bifidobacteriumbreve)grx05，其特征在于，所述短双歧杆菌已于2021年1月4日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCCNO.21589，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.根据权利要求1所述的短双歧杆菌，其特征在于，所述短双歧杆菌的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1或2所述的短双歧杆菌，其特征在于，所述短双歧杆菌是从健康母乳中分离得到的。4.根据权利要求1所述的短双歧杆菌，其特征在于，所述短双歧杆菌对选自以下的抗生素敏感：利福平、氨苄西林、万古霉素、环丙沙星、头孢唑林、头孢唑林、青霉素和氯霉素。5.根据权利要求1所述的短双歧杆菌，其特征在于，所述短双歧杆菌在pH为2.5的胃酸液中处理3h后的活菌存活率不小于9...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪家琦，顾瑞霞，潘丽娜，张臣臣，康文丽，胡鹏钰，吴忠坤，颜卫彬，戴智勇，彭灿，
申请(专利权)人：澳优乳业中国有限公司，
类型：发明
国别省市：