一株绿针假单胞菌MN225969及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一株绿针假单胞菌MN225969及其应用。所述的绿针假单胞菌(pseudomonas chlororaphis)MN225969于2020年8月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC No：61155。本发明专利技术的绿针假单胞菌MN225969对禾谷镰刀菌有很好的拮抗作用，对黄瓜立枯病菌、柑橘溃疡病菌、番茄青枯病菌也有很好的拮抗作用，能防治由这些病菌侵染引起的多种植物病害；同时还能促进小麦发芽和黄瓜生长，起到防病、促生的双重作用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
一株绿针假单胞菌MN225969及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株绿针假单胞菌MN225969及其应用。

技术介绍

[0002]我国作为农林大国，小麦、果树和蔬菜是重要的经济作物。但常年受到多种病害的危害，每年因病害造成的经济损失难以估计。目前农药是防控病虫害的最有效手段之一，但是因化学农药的广泛使用而引起的各种问题也随之而来，如化学杀菌剂的长期使用已导致使用次数和用药浓度增加，也提高了病原菌对杀菌剂的抗性。同时，由于化学杀菌剂的广谱性，大量使用不但破坏微生态环境，还会导致非靶标抗性。因此，禁止和限制大量高毒、高残留农药的使用，开发和使用生物源农药已成为保护环境和促进农业发展的重要研究课题。
[0003]生物防治是指利用生物及其代谢产物防治植物病虫害方法。它的实质就是利用生物种间关系、种内关系，调节有害生物种群密度，即生物群防治生物群。与传统的防治技术相比，生物防治技术具有不污染环境、对人和其他生物安全、产品无残留、易于同其他植物保护措施协调配合并能节约能源等优点，在有害生物综合防治中发挥着越来越重要的作用。到目前为止，真菌、细菌、放线菌、酵母菌都可用于生物防治。利用细菌防治有害微生物是开发和利用微生物资源的重要研究领域之一，亦是最具有潜力、应用前景最为广阔的有效途径之一。细菌防治优势主要有以下几点：一是繁殖速度快、培养成本低廉；二是对病原菌的作用方式较广，如细菌素、抗生素、胞外裂解酶、脂肽类等多种形式；三是有些细菌具有防病、促生的双重作用。
[0004]近年来，生物防治迅速发展，其中假单胞菌在植物病虫害防治中发挥了非常重要的作用。主要通过营养竞争、分泌降解病原菌的酶及抗生作用等实现其生物防治作用。在我国，绿针假单胞菌主要用于多种蔬菜作物病原真菌、细菌引起的病害的有效防治，而同时针对果树及大田作物多种真菌、细菌病害的绿针假单胞菌较少报道。如专利CN103509740A公开了一种用于防治作物镰刀菌病害的绿针假单胞菌及其应用，其提供的绿针假单胞菌主要是对于镰刀菌、灰霉病菌、纹枯病菌、玉米小斑病菌、终极腐霉、根霉等植物病原真菌有一定的拮抗作用，但对青枯病菌等植物病原细菌的拮抗效果很弱。又如专利CN107099474A公开了一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌及其应用，该绿针假单胞菌YTBTa14及其发酵液均具有较强的广谱的果树真菌病害抗菌活性。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的不足，本专利技术要解决的技术问题是提供一株绿针假单胞菌MN225969，对多种作物、果树、蔬菜的植物病原菌均有很好的拮抗作用，能防治由这些病菌侵染引起的多种植物病害；同时还能促进小麦发芽和黄瓜生长，起到防病、促生的双重作用。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]一方面，本专利技术提供一株绿针假单胞菌MN225969，所述的绿针假单胞菌
(pseudomonas chlororaphis)MN225969于2020年8月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC No：61155。
[0008]本专利技术通过田间筛选和病原菌拮抗菌筛选得到的绿针假单胞菌MN225969，对禾谷镰刀菌的防治效果能达到39.60％，对黄瓜立枯病菌的相对防效率能达到26.71％，对柑橘溃疡病菌的相对防效能达到100％，对番茄青枯病菌的相对防效能达到97.3％，说明该菌株能有效防治由这些病菌侵染引起的多种植物病害。
[0009]此外，相比于仅接种了禾谷镰刀菌的小麦的发芽率为47.97
±
7.52％，同时接种禾谷镰刀菌和绿针假单胞菌MN225969的小麦的发芽率提高至78.05
±
5.59％，表明绿针假单胞菌MN225969能拮抗禾谷镰刀菌的同时，促进小麦发芽。相比于采用化学杀菌剂处理的黄瓜的增长率为3.13％，采用绿针假单胞菌MN225969处理的黄瓜的增长率提高至30.13％，表明绿针假单胞菌MN225969能拮抗黄瓜立枯病菌的同时，促进黄瓜生长。
[0010]因此，另一方面，本专利技术还提供上述绿针假单胞菌MN225969在拮抗禾谷镰刀菌中的应用。
[0011]又一方面，本专利技术还提供上述绿针假单胞菌MN225969在拮抗黄瓜立枯病菌中的应用。
[0012]又一方面，本专利技术还提供上述绿针假单胞菌MN225969在促进小麦发芽和/或黄瓜生长中的应用。
[0013]又一方面，本专利技术还提供上述绿针假单胞菌MN225969在拮抗柑橘溃疡病菌中的应用。
[0014]又一方面，本专利技术还提供上述绿针假单胞菌MN225969在拮抗番茄青枯病菌中的应用。
[0015]又一方面，本专利技术还提供一种含有上述绿针假单胞菌MN225969的生防菌剂，所述绿针假单胞菌MN225969的浓度为1
×
107‑1×
109CFU/mL。
[0016]又一方面，本专利技术还提供上述生防菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0017]S1.将所述的绿针假单胞菌MN225969接种于LB液体培养基中，于28
‑
32℃条件下培养至OD
600
＝1.0，获得种子液；
[0018]S2.将1.5％
‑
2.5％种子液接种于KB发酵培养基中，于28
‑
32℃条件下扩大培养1
‑
2d，调节发酵液中绿针假单胞菌MN225969的浓度至1
×
107‑1×
109CFU/mL，即得生防菌剂。
[0019]优选地，步骤S1中所述培养温度为30℃；步骤S2中所述种子液的接种量为2％，培养温度为30℃，培养时间为1
‑
2d。
[0020]相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：
[0021](1)本专利技术提供的绿针假单胞菌MN225969对禾谷镰刀菌的防治效果能达到39.60％，对黄瓜立枯病菌的相对防效率能达到26.71％，对柑橘溃疡病菌的相对防效能达到100％，对番茄青枯病菌的相对防效能达到97.3％，该菌株能有效防治由这些病菌侵染引起的多种植物病害，可用于制备新型、高效、广谱生防菌剂，为微生物应用于生物防治的开发提供了新的途径。
[0022](2)相比于仅接种了禾谷镰刀菌的小麦的发芽率为47.97
±
7.52％，同时接种禾谷镰刀菌和绿针假单胞菌MN225969的小麦的发芽率提高至78.05
±
5.59％，表明本专利技术的绿针假单胞菌MN225969能拮抗禾谷镰刀菌的同时，促进小麦发芽。
[0023](3)相比于采用化学杀菌剂处理的黄瓜的增长率为3.13％，采用绿针假单胞菌MN225969处理的黄瓜的增长率提高至30.13％，表明本专利技术的绿针假单胞菌MN225969能拮抗黄瓜立枯病菌的同时，促进黄瓜生长。
附图说明
[0024]图1为不同菌株在R2A平板上第一次盖章本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株绿针假单胞菌MN225969，其特征在于，所述的绿针假单胞菌(pseudomonas chlororaphis)MN225969于2020年8月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC No：61155。2.权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969在拮抗禾谷镰刀菌中的应用。3.权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969在拮抗黄瓜立枯病菌中的应用。4.权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969在促进小麦发芽和/或黄瓜生长中的应用。5.权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969在拮抗柑橘溃疡病菌中的应用。6.权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969在拮抗番茄青枯病菌中的应用。7.一种含有权利要求1所述的绿针假单胞菌MN225969的生防菌剂。8.根据权利要求7所述的生防菌剂，其特征在于，所述的绿针假单胞菌MN225969的浓度为1
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【专利技术属性】
技术研发人员：康品，王科晶，王雪，刘仁燕，李得盛，季晓琴，孙玉婷，曹鸿一，
申请(专利权)人：慕恩广州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：