用于OCA2基因突变的CRISPR系统及其在构建白化病克隆猪核供体细胞中的应用技术方案

本发明专利技术公开了用于OCA2基因突变的CRISPR系统及其在构建白化病克隆猪核供体细胞中的应用。一种用于OCA2基因编辑的gRNA，序列如SEQ ID NO：39所示。一种针对猪OCA2基因的gRNA表达载体，以全序列如SEQ ID NO.3所示的pKG

【技术实现步骤摘要】
用于OCA2基因突变的CRISPR系统及其在构建白化病克隆猪核供体细胞中的应用


[0001]本专利技术属于基因编辑
，具体涉及用于OCA2基因突变的CRISPR/Cas9系统及其在构建白化病克隆猪核供体细胞中的应用。

技术介绍

[0002]白化病(albinism)是由于黑色素合成减少或缺乏而导致的多种遗传性疾病的总称，主要表现为皮肤、毛发以及眼部的色素减退。多种基因的突变均可以导致白化病的症状。根据色素缺失的部位以及有无其他系统异常，可将白化病分为非综合征性白化病和综合征性白化病两大类。非综合征白化病又可再分为只有眼部色素缺乏的眼白化病(OA)和皮肤、毛发、眼睛均有色素缺失(即具有全身症状)的眼及皮肤白化病(OCA)。
[0003]眼及皮肤白化病(oculocutaneous albinism，OCA)是一组以眼、皮肤、毛发黑色素沉着减少或缺乏为主要临床表现的常染色体隐性遗传病。超过90％的白化病患者为OCA，一般是由黑色素合成或转运相关基因突变所引起的，主要临床表现为普遍色素沉着不足，眼部改变包括黄斑中心凹发育不良、屈光不正、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于OCA2基因编辑的gRNA靶点，其特征在于序列如SEQ ID NO.21所示。2.一种用于OCA2基因编辑的gRNA，其特征在于序列如SEQ ID NO.39所示。3.一种针对猪OCA2基因的gRNA表达载体，其特征在于以全序列如SEQ ID NO.3所示的pKG
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U6gRNA为载体骨架，表达权利要求2所述的gRNA。4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于将SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28所示的单链DNA退火得到的具有粘性末端的双链DNA分子插入载体骨架pKG
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U6gRNA的BbsI限制性内切酶位点所得。5.一种用于猪OCA2基因编辑的CRISPR/Cas9系统，其特征在于包含Cas9表达载体和权利要求3或4所述的针对猪OCA2基因的gRNA表达载体。6.根据权利要求5所述的CRISPR/Cas9系统，其特征在于所述的C...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛冬，汪滔，陶裴裴，曾为俊，刘璐，王磊，程锐，马翔，赵泽英，黄彩云，
申请(专利权)人：南京启真基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：