一种从鱼皮中提取补血肽的方法及其产品技术

本发明专利技术公开了一种从鱼皮中提取补血肽的方法及其产品，包括，鱼皮脱脂、脱杂蛋白处理；制备鱼皮明胶粗提物；将鱼皮明胶粗提物通过多孔型亲水聚合物离子交换层析分离，得到鮟鱇鱼皮明胶；将鮟鱇鱼皮明胶进一步依次通过葡聚糖G

【技术实现步骤摘要】
一种从鱼皮中提取补血肽的方法及其产品


[0001]本专利技术属于蛋白提取
，具体涉及到一种从鱼皮中提取补血肽的方法及其产品。

技术介绍

[0002]明胶类中药(Gelatinous Chinese Medicine，GCM)是一类以动物皮、骨、甲或角等为原料，通过热水煎煮提取，进一步浓缩而制成的而成的传统中药，主要具有补血、止血等功效。但是胶类中药一般分子量较大，不易被人吸收，就会造成“滋腻碍胃”。
[0003]HongzhongWu等人的研究表明阿胶中补血活性物质主要集中在分子量小于800Da的组分，该组分对放化疗造成的小鼠贫血具有很好的治疗作用，其缺点是运用蛋白酶酶解阿胶，成本太高不足以大规模成产。陈琦等人研究表明牦牛皮明胶有效的改善小鼠环磷酰胺所致骨髓抑制，提高小鼠血象指数，其缺点是未能明确牦牛明胶中的补血活性物质，并且未能充分证明牛皮明胶的补血功效。目前，从鱼皮中筛选补血肽，尚未见研究报道。
[0004]因此，本领域亟需一种从鱼皮中提取补血肽的方法及其产品。

技术实现思路

[0005]本部分的目的在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从鱼皮中提取补血肽的方法，其特征在于：包括，鱼皮脱脂、脱杂蛋白处理；制备鱼皮明胶粗提物；将鱼皮明胶粗提物通过多孔型亲水聚合物离子交换层析分离，得到鮟鱇鱼皮明胶；将鮟鱇鱼皮明胶进一步依次通过葡聚糖G
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75、G
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50、G
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25进行柱色谱串联分离，最终制得化合物，即补血肽，其肽段分别为：GPSGLVGPKG、AEPGDCVFFAAGPAKAQR、GPPGIPGREGPKG、APEPPGAGL、AGAEGPPGKTGPVGPQGPAGKPGPE、GFPGAIGPPGPPGNPGTPGQRGSP、APGAPSPADIT，多肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.如权利要求1所述从鱼皮中提取补血肽的方法，其特征在于：所述鱼皮脱脂、脱杂蛋白处理，包括，先将储存在
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20℃的鱼皮解冻后清洗干净，剪成0.5
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0.5cm大小，在4℃的条件下用0.1mol/L氢氧化钠浸泡24h，每6h换一次液，除杂蛋白，得碱处理后鱼皮，料液比以W/V计为1:15；用蒸馏水将碱处理后鱼皮洗净，直至洗涤液pH值为7，再将洗净的鱼皮用10％的正丁醇脱脂处理24h，料液比以W/V计为1:20；用蒸馏水多次漂洗鮟鱇鱼皮，完全洗去正丁醇后，冷冻干燥，待用。3.如权利要求1所述从鱼皮中提取补血肽的方法，其特征在于：所述制备鱼皮明胶粗提物，包括，在4℃条件下，将冻干后的鮟鱇鱼皮置于蒸馏水中溶胀24h，以1:40(W/V)的料液比；在100℃条件下连续搅拌加热12h，冷却到室温后4℃条件下以10000g的速度离心30min，收集上清液，将沉淀再次提取，两次得到的鮟鱇鱼皮明胶上清液整合在一起；经过0.45μm水相滤膜抽滤，置于冷冻干燥机中冻干，即得鱼皮明胶粗提物。4.如权利要求1所述从鱼皮中提取补血肽的方法，其特征在于：所述多孔型亲水聚合物离子交换层析，其步骤包括，用超纯水将鱼皮明胶粗提物配成浓度为50mg/mL的溶液，并于4℃下以10000g/min离心15min，取上清，制得样品溶液；将活化后的DEAE
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52缓慢一次性注入层析柱，直径
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柱长：1.6cm
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60cm，用超纯水平衡3～5个柱体积；将制备好的2mL样品溶液加入到色谱柱中，以1mL/min的流速，通过溶液洗脱样品，自动回收样品，每管5ml：先用蒸馏水洗脱样品，洗脱1～9管后，用0.1mol/LNaCl洗脱，收集10～18管，再用0.3mol/LNaCl洗脱，收集19～22管后，用0.5mol/LNaCl洗脱，收集23～40管洗脱液，冷冻干燥，即得鮟鱇鱼皮明胶。5.如权利要求4所述从鱼皮中提取补血肽的方法，其特征在于：所述DEAE
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52的活化步骤，包括，将适量的DEAE
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52用超纯水溶胀至体积不改变后，按照碱
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酸
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【专利技术属性】
技术研发人员：张虹，曹广生，卢延斌，
申请(专利权)人：杭州迦微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：