一种GPC-3靶向结合肽F3及其衍生物、探针与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种GPC

【技术实现步骤摘要】
一种GPC
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3靶向结合肽F3及其衍生物、探针与应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种GPC
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3靶向结合肽F3及其衍生物、探针与应用。

技术介绍

[0002]肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是我国常见消化系统恶性肿瘤之一，原发性肝癌中约80%为肝细胞肝癌，其他类型例如肝内胆管细胞癌（Intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）等约占20%。在60岁以下男性中，肝癌（Liver cancer）是最常见和死亡率最高的恶性肿瘤，其次为肺癌、胃癌、食管癌。目前针对肝细胞肝癌治疗主要包括外科手术、化疗、免疫治疗等，传统药物治疗受限于肿瘤靶向性差、肿瘤组织药物浓度不足、伴随脱靶效应等缺陷，疗效不理想，5年生存率仅约12.5%。另一方面，由于目前肝癌诊断特异性及灵敏度有限，患者确诊一般已为肿瘤晚期，预后往往较差，因此提高诊断技术特异性及灵敏度，增强早期诊断能力，将有助于提高肝细胞肝癌诊疗水平。
[0003]目前有研究发现，磷脂酰肌醇蛋白聚糖
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3（Glypican
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3，GPC
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3）表达于肿瘤细胞膜表面，可作为肝细胞肝癌肿瘤分子标志，应用于诊断及治疗中。GPC
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3具有良好的肿瘤特异性，在成年人体正常组织中几乎不表达，而在肝癌细胞中过表达，约80%肝细胞肝癌为GPC
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3表达阳性，并且基础研究还发现，GPC
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3可通过YAP信号通路参与肿瘤细胞增殖等生物功能，GPC
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3作为肿瘤靶点具有临床应用价值，例如已有针对GPC
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3的TCR
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T、CART等工程化免疫细胞，以及抗GPC
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3的治疗性抗体等，都在临床试验中取得一定疗效。
[0004]现已有报道将GPC
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3作为显像靶点研究PET/CT分子显像，例如将
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Zr标记于抗GPC
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3 mAb形成核素探针，可成功对GPC
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3表达阳性的HepG
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2肿瘤进行PET显像。抗体应用于显像探针具有极强的肿瘤靶向结合能力，但是抗体较大分子量及结构可能导致显像背景清除慢、肿瘤渗透性差及肝脏代谢蓄积较多等缺点，而靶向结合短肽可以一定程度地改善这些缺点，短肽探针具有易于制备、背景清除快、靶向性高及肿瘤渗透深等优势，因此，研发肿瘤靶向结合肽对HCC的诊疗具有重要临床应用价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术公开了一种GPC
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3靶向结合肽F3及其衍生物、探针与应用，分别从蛋白水平、细胞体外水平及动物体内水平检测GPC
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3靶向结合肽F3的肿瘤特异性结合能力。该GPC
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3靶向结合肽F3可特异性结合GPC
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3，利用荧光示踪剂标记多肽形成靶向肽荧光探针，在体内外实验中可高效靶向GPC
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3表达阳性的HCC肿瘤细胞，并且通过放射性核素
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Ga标记多肽形成靶向肽核素探针，在动物活体成像中可明确显示肿瘤病灶，显示了良好的肿瘤靶向性及诊疗应用前景。本专利技术为制备HCC诊断相关试剂、肿瘤靶向治疗药物等提供了新的途径。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案是：一种GPC
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3靶向结合肽F3，GPC
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3靶向结合肽F3的氨基酸序列为SEQ ID No.1：CEQAYQYSC，其多肽空间结构为环肽，由首尾两端的半胱氨酸形成二硫键；GPC
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3靶向结合肽
F3能够特异性地结合于肿瘤分子标志物GPC
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3。
[0007]GPC
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3靶向结合肽F3的衍生物包括噬菌体、荧光染料偶联产物、螯合物、放射性核素络合物偶联产物。
[0008]一种荧光标记探针，由GPC
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3靶向结合肽F3与荧光染料偶联得到。
[0009]一种放射性核素标记探针，由GPC
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3靶向结合肽F3与螯合物偶联，再与放射性金属离子形成络合物。
[0010]本专利技术还保护GPC
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3靶向结合肽F3作为制备肝癌肿瘤靶向药物的应用。
[0011]本专利技术还保护GPC
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3靶向结合肽F3的衍生物作为制备肝癌肿瘤靶向药物的应用。
[0012]本专利技术还保护荧光标记探针在肝癌肿瘤诊断或治疗药物中的应用。
[0013]本专利技术还保护放射性核素标记探针在肝癌肿瘤诊断或治疗药物中的应用。本专利技术多肽氨基酸序列如SEQ ID No：1所示，为9个氨基酸长度的环形短肽，N端及C端由半胱氨酸形成二硫键，分子量小，合成工艺简便。
[0014]本专利技术的多肽特异性结合GPC
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3表达阳性的肝癌组织但不限于肝癌，如还可特异性结合其他表达GPC
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3阳性的胃癌、肠癌、乳腺癌等肿瘤组织，不限制肿瘤类型。
[0015]本专利技术公开了GPC
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3靶向结合肽F3在肽类制剂肿瘤诊断方面的用途，尤其是作为肿瘤病理诊断检测探针和肿瘤靶向分子显像探针应用。
[0016]本专利技术公开了GPC
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3靶向结合肽F3在制备肿瘤靶向治疗药物制剂方面的用途，包括靶向结合肽偶联抗肿瘤分子、肿瘤靶向纳米载药系统等方面的应用。
[0017]进一步地，本专利技术公开了一种红色荧光探针，将本专利技术的靶向结合肽与荧光染料罗丹明B（Rhodamine B，RhoB）化学偶联后形成探针，在体外细胞免疫荧光、体内生物分布实验中，荧光标记肽显示出对GPC
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3阳性肿瘤细胞及组织的良好靶向性，并在体内可富集于肿瘤部位而非正常器官。
[0018]进一步地，本专利技术还公开了一种
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Ga放射性核素标记探针，将本专利技术的靶向结合肽通过化学合成连接1，4，7，10
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四氮杂环十二烷
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1，4，7，10
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四乙酸（1，4，7，10
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Tetraazacyclododecane
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1，4，7，10
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tetraacetic Acid，DOTA），再与放射性核素形成络合物，将此核素探针静脉注射于荷瘤鼠，PET/CT显示核素探针对GPC
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3阳性的肝癌皮下移植瘤具有良好的靶向聚集性。
[0019]本专利技术提供的多肽可利用本领域已知方法生产，可利用细胞的方法和无细胞体外转录/翻译方法生产肽，也可利用本领域已知的技术进行合成，如液相法、固相法等进行化工合成。
[0020]本专利技术提供的GPC
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3靶向结合肽，由噬菌体展示文库技术淘选及鉴定获得，经本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种GPC
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3靶向结合肽F3，其特征在于：GPC
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3靶向结合肽F3的氨基酸序列为SEQ ID No.1：CEQAYQYSC，其多肽空间结构为环肽，由首尾两端的半胱氨酸形成二硫键；GPC
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3靶向结合肽F3能够特异性地结合于肿瘤分子标志物GPC
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3。2.权利要求1所述的GPC
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3靶向结合肽F3的衍生物，其特征在于：GPC
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3靶向结合肽F3的衍生物包括噬菌体、荧光染料偶联产物、螯合物、放射性核素络合物偶联产物。3.一种荧光标记探针，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宝瑞，颜家耀，余潇潇，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：