工程化泛酸激酶变体酶制造技术

技术编号:28118120 阅读:18 留言:0更新日期:2021-04-19 11:19
本发明专利技术提供了工程化泛酸激酶(PanK)、具有PanK活性的多肽和编码这些酶的多核苷酸、以及包含这些多核苷酸和多肽的载体和宿主细胞。还提供了用于产生PanK酶的方法。本发明专利技术还提供了包含PanK酶的组合物,以及使用工程化PanK酶的方法。本发明专利技术尤其可用于药物化合物的产生。本发明专利技术尤其可用于药物化合物的产生。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】ID NO:222、SEQ ID NO:230、SEQ ID NO:240和/或SEQ ID NO:276编号。
[0011]在一些实施方案中,本专利技术提供了工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中工程化泛酸激酶在多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。在一些实施方案中,工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:54/240/277/281、240、240/277、240/277/281、240/277/281/282、240/281、240/281/282、277和277/281,并且其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶包含选自以下的至少一个取代或取代集:54S/240W/277M/281M、240F、240F/277I、240F/277I/281L、240F/277M、240F/277M/281M、240F/277M/281M/282M、240F/281M、240F/281M/282M、240W/277I/281M、240W/281M、277I/281L、277I/281M、277M和277M/281M,其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶包含选自以下的至少一个取代或取代集:I54S/Y240W/L277M/I281M、Y240F、Y240F/L277I、Y240F/L277I/I281L、Y240F/L277M、Y240F/L277M/I281M、Y240F/L277M/I281M/N282M、Y240F/I281M、Y240F/I281M/N282M、Y240W/L277I/I281M、Y240W/I281M、L277I/I281L、L277I/I281M、L277M和L277M/I281M,其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。在一些实施方案中,工程化泛酸激酶包含与表2

1中列出的至少一种工程化泛酸激酶变体的序列至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多相同的多肽序列。
[0012]在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多相同的多肽序列。在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶是SEQ ID NO:2中列出的变体工程化多肽。
[0013]在一些实施方案中,本专利技术提供了工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:30具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中工程化泛酸激酶在多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:30编号。在一些实施方案中,工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:30具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:13、13/14/19/22、13/14/22、13/14/22/37、13/14/22/106/247、13/14/218/247/305、13/19、13/22、15/26/283、15/27、15/27/283、15/27/283/305、15/27/305、15/283、19/22/26/69、19/29、20、20/24、20/24/25/69/75、20/24/30/75、20/70/75、22/218、22/218/271、24、24/30、24/30/75、24/75/86/134、26、26/29、27、27/78、27/78/123/283、27/283、29和75,其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:30编号。在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶包含选自以下的至少一个取代或取代集:13D、13D/14E/19T/22G、13D/14E/22G、13D/14E/22G/37L、13D/14E/22T/106A/247M、13D/14E/218E/
247M/305T、13D/19T、13D/22T、15L/26L/283H、15L/27N、15L/27N/283H、15L/27N/283L、15L/27N/283L/305I、15L/27N/305I、15L/283L、19R/22D/26P/69Y、19R/29S、20M、20M/24A、20M/24A/30R/75E、20M/24S/25T/69T/75E、20M/70D/75E、22G/218E、22G/218E/271S、24A、24A/30R、24S/30R/75E、24S/75E/86H/134L、26L、26P、26P/29S、27N、27N/78A、27N/78A/123W/283H、27N/283H、27N/283L、29S和75E,其中多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:30编号。在一些另外的实施方案中,工程化泛酸激酶包含选自以下的至少一个取代或取代集:L13D、L13D/Q14E/Q19T/A22G、L13D/Q14E/A22G、L13D/Q14E/A22G/A37L、L13D/Q14E/A22T/R106A/F247M、L13D/Q14E/F218E/F247M/A305T、L13D/Q19T、L13D/A22T、F15L/S26L/W283H、F15L/V27N、F15L/V27N/W283H、F15L/V27N/W283L、F15L/V27N/W283L/A305I、F15L/V27N/A305I、F15L/W283L、Q19R/A22D/S26P/N69Y、Q19R/M29S、W20M、W20M/R24A、W20M/R24A/T30R/V75E、W20M/R24S/D25T/N69T/V75E、W20M/L70D/V75E、A22G/F218E、A22G/F218E/I271S、R24A、R24A/T30R、R24S/T30R/V75E、R24S/V75E/R86H/Q134L、S26L、S26P、S26P/M29S、V27N、V27N/Q78A、本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:222、SEQ ID NO:230、SEQ ID NO:240和/或SEQ ID NO:276具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:222、SEQ ID NO:230、SEQ ID NO:240和/或SEQ ID NO:276编号。2.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。3.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:277/281、54/240/277/281、240、240/277、240/277/281、240/277/281/282、240/281和240/281/282、277,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:2编号。4.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:30具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:30编号。5.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:30具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:13、13/14/19/22、13/14/22、13/14/22/37、13/14/22/106/247、13/14/218/247/305、13/19、13/22、15/26/283、15/27、15/27/283、15/27/283/305、15/27/305、15/283、19/22/26/69、19/29、20、20/24、20/24/25/69/75、20/24/30/75、20/70/75、22/218、22/218/271、24、24/30、24/30/75、24/75/86/134、26、26/29、27、27/78、27/78/123/283、27/283、29和75,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:30编号。6.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:60具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:60编号。7.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:60具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、
NO:222具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:83/84/305、143和154,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:222编号。14.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:230具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:230编号。15.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:230具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:13/169/213/247/283/288、16/247、49/247、64/104/154/284、75/104/284、169/247和247,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:230编号。16.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:240具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:240编号。17.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:240具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:8、8/13/14/83/247、8/64/213/247、8/64/247、8/247/283、10和264/276,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:240编号。18.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:276具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,其中所述工程化泛酸激酶在所述多肽序列中包含至少一个取代或取代集,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:276编号。19.根据权利要求2所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:276具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多的序列同一性的多肽序列或其功能片段,并且其中所述工程化泛酸激酶在选自以下的一个或更多个位置处包含至少一个取代或取代集:11/13/23/61/85/304、13/19/61、23/61和23/61/304,并且其中所述多肽序列的氨基酸位置参照SEQ ID NO:276编号。20.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与表2

1、表4

1、表5

1、表6

1、表6

2、表7

1、表8

1、表9

1和/或表10

1中列出的至少一种工程化泛酸
激酶变体的序列至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多相同的多肽序列。21.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包含与SEQ ID NO:2至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更多相同的多肽序列。22.根据权利要求1所述的工程化泛酸激酶,其中所述工程化泛酸激酶包括SEQ ID NO:2中列出的变体工程化多肽。23.根据权利要求1所述的工程化泛酸激...

【专利技术属性】
技术研发人员:玛吉
申请(专利权)人:科德克希思公司
类型:发明
国别省市:

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