生产肌醇的工程菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种生产肌醇的工程菌，包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体，所述质粒载体中导入了编码肌醇-1-磷酸合成酶的基因，或同时导入了编码肌醇-1-磷酸合成酶的基因和过表达编码肌醇单磷酸酶的基因。本发明专利技术还提供了一种上述生产肌醇的工程菌的构建方法和应用。上述工程菌在利用上述外源酶的同时过表达内源酶，并结合RED重组进行基因调控，逐步提高肌醇的产量以及碳源收率，从而实现以蔗糖、葡萄糖和甘油等简单碳源为源头，通过生产与生长相互协调，实现宿主的快速生长和肌醇的高效生产。产。产。

【技术实现步骤摘要】
生产肌醇的工程菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种生产肌醇的工程菌及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]肌醇（inositol）又被称为环己六醇、纤维醇、肌糖等，主要存在于动植物体内，是动物、微生物的生长因子，同时也是水溶性维生素B族中的一种。肌醇应用广泛，其主要应用于饲料、食品、医药、化妆品等行业。在饲料行业，肌醇作为饲料添加剂在畜牧业、水产养殖业以及家禽饲养业等方面需求巨大，其加入量一般为饲料的0.2％～0.5％，尤其在日本仅动物的肌醇消费量每年都在100t以上；实验表明，高等动物如果缺乏肌醇将会引起脱发和生长停滞等症状，而加入肌醇，可以防止脱发和促进生长。在食品行业，肌醇作为营养强化剂在食品工业和发酵中，用于促进酿酒酵母的增长以及各种菌种的培养等；近年来，欧美、日本等国家在婴幼儿食品及营养食品中添加肌醇，赋予食品一定的营养保健功能，尤其在以肌醇为主要成分的维生素功能性饮料中；由于肌醇能与肉毒碱作用而达到降脂功效，因此以肌醇为主要成分的减肥降脂保健食品风靡国际市场。在医药行业，肌醇是一种水溶性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生产肌醇的工程菌，其特征在于：包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体，其中，所述质粒载体中导入了编码肌醇-1-磷酸合成酶的基因，或同时导入了编码肌醇-1-磷酸合成酶的基因和过表达编码肌醇单磷酸酶的基因。2.根据权利要求1所述的生产肌醇的工程菌，其特征在于：所述宿主菌中敲除了编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的zwf和编码葡萄糖磷酸异构酶基因的pgi的同时，还敲除了编码葡萄糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因的galU、编码葡萄糖-1-磷酸腺苷酰转移酶基因的glgC、编码甘油脱氢酶基因的gldA、编码丙酮酸激酶的基因pykA和pykF中的至少一种基因。3.根据权利要求2所述的生产肌醇的工程菌，其特征在于：所述宿主菌中同时还敲除了编码葡萄糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因的galU和编码葡萄糖-1-磷酸腺苷酰转移酶基因的glgC。4.根据权利要求2或3所述的生产肌醇的工程菌，其特征在于：所述宿主菌中同时还敲除了编码甘油脱氢酶基因的gldA、编码丙酮酸激酶的基因pykA和pykF。5.根据权利要求4所述的生产肌醇的工程菌，其特征在于：所述宿主菌中还敲除了编码甘油激酶的基因glpK。6.根据权利要求5所述的生产肌醇的工程菌，其特征在于：所述质粒载体中还导入了过表达编码甘油激酶的基因glpK。7.一种权利要求1～6所述的生产肌醇的工程菌的构建方法，包括步骤：重组表达质粒 将编码所述肌醇-1-磷酸合成酶的基因连接至表达质粒上进行重组，或者将编码肌醇-1-磷酸合成酶和肌醇单磷酸酶的基因连接至所述表达质粒上进行重组，获得所述质粒载体；构建工程菌 将所述质粒载体转化到所述宿主菌中，得到生产肌醇的工程菌。8.根据权利要求7所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁其朋，孙新晓，唐二菊，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：