具有与CD40的三价结合的双特异性抗原结合分子制造技术

本发明专利技术涉及具有与CD40的三价结合和与靶细胞抗原的单价结合的新型双特异性抗原结合分子，并且涉及生产这些分子的方法及使用这些分子的方法。分子的方法。分子的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有与CD40的三价结合的双特异性抗原结合分子


[0001]本专利技术涉及具有与CD40的三价结合和与靶细胞抗原(特别是成纤维细胞活化蛋白(FAP))的单价结合的新型双特异性抗原结合分子。本专利技术进一步涉及生产这些分子的方法和使用它们的方法。

技术介绍

[0002]在产生有效的适应性免疫应答期间，需要多个分子信号。信号一涉及T细胞抗原受体(TCR)与存在于抗原呈递细胞(APC)表面的同源抗原的结合。信号二由共刺激受体与在T细胞和APC之间的其各自配体的接合组成。研究最深入的以及最重要的共刺激效应子之一是肿瘤坏死因子受体(TNFR)家族成员CD40及其配体CD40L(Elgueta R.等人，Immunol Rev.2009；229(1):152
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72)。初始T细胞活化后，TNFR家族的几个成员(包括CD40)起维持APC和T细胞应答的作用，并且因此在免疫系统的组织和功能中起关键作用(Watts T.H.(2005)Annu.Rev.Immunol.23，23
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68)。不同共刺激TNFR家族成员的组合允许本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种双特异性抗原结合分子，其由以下各项组成：(a)第一Fab片段，其能够与CD40特异性结合；(b)第二Fab片段，其能够与CD40特异性结合；(c)第三Fab片段，其能够与CD40特异性结合；(d)Fc结构域，其由能够稳定缔合的第一亚基和第二亚基构成；其中所述第二Fab片段(b)在VH
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CH1链的C末端融合至所述第一Fab片段(a)的VH
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CH1链的N末端，其继而在其C末端融合至所述第一Fc结构域亚基的N末端，并且所述第三Fab片段(c)在Fab重链的C末端融合至所述第二Fc结构域亚基的N末端，以及(e)能够与靶细胞抗原特异性结合的交叉fab片段，其中所述交叉fab片段融合至所述Fc结构域亚基中之一者的C末端。2.根据权利要求1所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与靶细胞抗原特异性结合的交叉fab片段融合至所述第二Fc结构域亚基的C末端。3.根据权利要求1或2所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与靶细胞抗原特异性结合的抗原结合结构域为能够与成纤维细胞活化蛋白(FAP)特异性结合的抗原结合结构域。4.根据权利要求1至3中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与FAP特异性结合的抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(V
H
FAP)，其包含：(i)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列，(ii)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列，和(iii)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列；以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含：(iv)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，(v)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列，和(vi)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列；或者(b)重链可变区(V
H
FAP)，其包含：(i)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列，(ii)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列，和(iii)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含：(iv)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列，(v)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，和(vi)CDR
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L3，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。5.根据权利要求1至4中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与FAP特异性结合的抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(V
H
FAP)，其包含与SEQ ID NO:9的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含与SEQ ID NO:10的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；或者(b)重链可变区(V
H
FAP)，其包含与SEQ ID NO:17的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含与SEQ ID NO:18的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。6.根据权利要求1至3中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与FAP特异性结合的抗原结合结构域包含：重链可变区(V
H
FAP)，其包含：(i)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列，(ii)CDR
‑
H2，其包含选自由SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28组成的组的氨基酸序列，和(iii)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；以及轻
链可变区(V
L
FAP)，其包含：(iv)CDR
‑
L1，其包含选自由SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30组成的组的氨基酸序列，(v)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列，和(vi)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:24的氨基酸序列。7.根据权利要求1至3或权利要求6中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与FAP特异性结合的抗原结合结构域包含：(i)重链可变区(V
H
FAP)，其包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36，以及(ii)轻链可变区(V
L
FAP)，其包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42。8.根据权利要求1至3或权利要求6或7中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与FAP特异性结合的抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(V
H
FAP)，其包含SEQ ID NO:31的氨基酸序列，以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；(b)重链可变区(V
H
FAP)，其包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列，以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；(c)重链可变区(V
H
FAP)，其包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列，以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；或者(d)重链可变区(V
H
FAP)，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列，以及轻链可变区(V
L
FAP)，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列。9.根据权利要求1至8中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与CD40特异性结合的抗原结合结构域中的每一者均包含：重链可变区(V
H
CD40)，其包含：(i)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列，(ii)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列，和(iii)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；以及轻链可变区(V
L
CD40)，其包含：(iv)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列，(v)CDR
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L2，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，和(vi)CDR
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L3，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列。10.根据权利要求1至9中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与CD40特异性结合的抗原结合结构域中的每一者均包含：(i)重链可变区(V
H
CD40)，其包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56，以及(ii)轻链可变区(V
L
CD40)，其包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60。11.根据权利要求1至9中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述能够与CD40特异性结合的抗原结合结构域中的每一者均包含：(i)重链可变区(V
H
CD40)，其包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：