【技术实现步骤摘要】
调控酵母外源基因表达的启动子，调控方法及其应用
本专利技术属于生物工程
，具体地，本专利技术涉及酵母基因表达的调控，更具体地，本专利技术涉及改良酵母中Gal调控系统的方法。
技术介绍
酵母菌一直是人们进行遗传分析和基因工程研究的理想材料，对许多酵母基因的表达调节途径人们已有了较深入的了解。酿酒酵母作为一种公认安全的微生物(GenerallyRecognizedasSafe，GRAS)，人类对其生理生化、遗传背景都有较为清楚的研究，并且遗传操作相对简单，因此在近些年的合成生物学和代谢工程研究中有着举足轻重的作用。酿酒酵母除了用以发酵乙醇，制作啤酒，它已经成为高附加值天然产物的合成方面所常用的宿主。在大多数研究中，外源基因在酿酒酵母中的表达都采用组成型强启动子，如常用的pTEF1启动子，pHXT7启动子，pTDH3启动子,pPGK1启动子等(Partow,S.,etal.(2010)."Characterizationofdifferentpromotersfordesigninganewexpressionvec...
【技术保护点】
1.一种用于外源基因表达的GAL调控系统，其特征在于，所述调控系统中用HXT1启动子替换GAL80启动子。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于外源基因表达的GAL调控系统，其特征在于，所述调控系统中用HXT1启动子替换GAL80启动子。
2.根据权利要求1所述的GAL调控系统，其特征在于，还包括GAL启动子，
优选地，所述外源基因与所述GAL启动子可操作地连接，
优选地，所述GAL启动子为一个或多个选自GAL1，GAL7，GAL2或GAL10的启动子。
3.根据权利要求1所述的GAL调控系统，其特征在于，其中GAL10基因、GAL1基因和/或GAL7基因被沉默，优选地，所述GAL10基因、GAL1基因和/或GAL7基因被敲除。
4.根据权利要求1所述的GAL调控系统，其特征在于，所述HXT1启动子具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列，或通过一个或者几个碱基的增加、删减、取代，仍然与SEQIDNO.1所示的核苷酸序列具有相同功能的核苷酸序列。
5.一种酵母细胞，其特征在于，其包含权利要求1-4任一项的用于外源基因表达的GAL调控系统。
6.根据权利要求5所述的酵母细胞，其特征在于，所述酵母为酿酒酵母。
7.根据权利要求5或6所述的酵母细胞，其特征在于，所述外源基因是与目标产物的合成有关的基因，优选地，所述目标产物是萜类物质，优选地，所述萜类物质选自单萜，倍半萜和二萜，更优选地，选自β-胡萝卜素，叶黄素，斑蝥黄素，虾青素，番茄红素，青蒿二烯，青蒿素，紫杉二烯，紫杉醇，达玛烯二醇，α-檀香萜，丹参酮，角鲨烯和人参皂苷。
8.根据权利要求7所述的酵母细胞，其特征在于，将与目标产物的合成有关的基因与GAL启动子可操作地连接，优选地，所述GAL启动子选自GAL1，GAL7，GAL2和GAL10启动子。
9.根据权利要求7所述的酵母细胞，其特征在于，所述目标产物为β-胡萝卜素，其中tHMG1基因与pGAL1启动子可操作地连接，BtcrtE基因与GAL10启动子可操作地连接，BtcrtYB基因与GAL1启动子可操作地连接，以及BtcrtI基因与GAL10启动子可操作地连接；
优选地，将GAL1基因，GAL7基因，和GAL10基因沉默；
优选地，所述BtcrtE基因具有SEQIDNO：18所示的核苷酸序列，或通过一个或者几个碱基的增加、删减、取代，仍然与SEQIDNO.18所示的核苷酸序列具有相同功能的核苷酸序列；
优选地，所述BtcrtI基因具有SEQIDNO：19所示的核苷酸序列，或通过一个或者几个碱基的增加、删减、取代，仍然与SEQIDNO.19所示的核苷酸序列具有相同功能的核苷酸序列；
优选地，所述BtcrtYB基因具有SEQIDNO：20所示的核苷酸序列，或通过一个或者几个碱基的增加、删减、取代，仍然与SEQIDNO.20所示的核苷酸序列具有相同功能的核苷酸序列。
10.根据权利要求5或6的酵母细胞，所述酵母细胞为YLK-pHXT1-BT2菌株，其菌株分类命名为酿酒酵母HEC-YLK9I-07，于2020年11月18日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：M2020754。
11.一种用于调控酵母外源基因表达的方法，所述方法包括利用权利要求1-4任一项的GAL调控系统或利用权利要求5-10任一项的酵母细胞进行外源基因的表达。
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【专利技术属性】
技术研发人员：谢文平，蔡燕丰，姚红涛，郭振权，万丹，鲍素敏，
申请(专利权)人：宜昌东阳光生化制药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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