多个基因在肝癌诊断中的联合应用制造技术

本发明专利技术公开了多个基因在肝癌诊断中的联合应用。本发明专利技术用于联合诊断的基因包括ASB13、PCYOX1、RAB3IL1。肝癌组织中ASB13、PCYOX1、RAB3IL1表达上调，差异具有统计学意义。利用ROC曲线分析基因诊断效能显示多基因联合导致AUC值大大提升，表明本发明专利技术的多基因联合具有更好的诊断敏感性和特异性。更好的诊断敏感性和特异性。更好的诊断敏感性和特异性。

【技术实现步骤摘要】
多个基因在肝癌诊断中的联合应用


[0001]本专利技术涉及疾病诊断领域，更具体地，本专利技术涉及多个基因在肝癌诊断中的联合应用。

技术介绍

[0002]原发性肝癌(primary carcinoma of liver，以下简称肝癌)是我国常见的恶性肿瘤之一。据20世纪90年代统计，我国肝癌的年死亡率为20.37/10万，在恶性肿瘤死亡顺位中占第2位，在城市中仅次于肺癌；农村中仅次于胃癌。由于血清甲胎蛋白(AFP)的临床应用和各种影像学技术的进步，特别是AFP和超声显像用于肝癌高危人群的监测，使肝癌能够在无症状和体征的亚临床期作出诊断，加之外科手术技术的成熟，以及各种局部治疗等非手术治疗方法的发展，使肝癌的预后较过去有了明显提高。
[0003]原发性肝癌的临床病象极不典型，其症状一般多不明显，特别是在病程早期。通常5cm以下小肝癌约70％左右无症状，无症状的亚临床肝癌亦70％左右为小肝癌。症状一旦出现，说明肿瘤已经较大，其病势的进展则一般多很迅速，通常在数周内即呈现恶病质，往往在几个月至1年内即衰竭死亡。临床病象主要是两个方面的病变：
①
肝硬化的表现，如腹水、侧支循环的发生，呕血及肢体的水肿等；
②
肿瘤本身所产生的症状，如体重减轻、周身乏力、肝区疼痛及肝脏肿大等。
[0004]在世界任何地区都同样发现，任何原因导致的慢性肝病都可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。流行病学和实验研究均表明病毒性肝炎与原发性肝癌的发生有着特定的关系，目前比较明确的与肝癌有关系的病毒性肝炎有乙型、丙型和丁型3种。其中以乙型肝炎与肝癌关系最为密切，近年HBsAg阴性肝癌数增加与丙型肝炎有关，而前苏联则以丁型为多。我国肝癌患者中约90％有乙型肝炎病毒(HBV)感染背景。其他危险因素包括酒精性肝硬化、肝腺瘤、长期摄入黄曲霉素、其他类型的慢性活动性肝炎、Wilson病、酪氨酸血症和糖原累积病。
[0005]目前常用的用于肝癌诊断的方法包括如下方式：
[0006]1、实验室检查
[0007](1)肝癌标志物的检测近年来用于肝癌检测的血清标志物主要有：
①
甲胎蛋白(AFP)及其异质体；
②
各种血清酶，如γ谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ(GGT
‑Ⅱ
)、碱性磷酸酶同工酶Ⅰ(ALP
‑Ⅰ
)、醛缩酶同工酶A(ALD
‑
A)、岩藻糖苷酶(AFU)、抗胰蛋白酶Ⅰ(AAT)、5
’
核苷酸磷酸二酯酶同工酶V(5
’‑
NPD
‑
V)、丙酮酸激酶同工酶(M2
‑
PyK)、谷胱甘肽S
‑
转移酶(GST)等；
③
异常凝血酶原；
④
铁蛋白与酸性铁蛋白。其中AFP的诊断价值最大。对于AFP阴性肝癌的诊断，以上几种血清标志物联合应用，具有一定的诊断价值。
[0008]2、其他辅助检查
[0009](1)超声检查；(2)计算机X线体层扫描(CT)；(3)磁共振显像(MRI)；(4)肝动脉造影；(5)放射性核素显像；(6)肝穿刺活体组织检查。
[0010]但是利用血清标志物诊断肝癌的缺陷是不敏感，利用其它辅助检查诊断肝癌的缺
陷是不能在疾病早期作出诊断，耽误病情。要想提高肝癌的治愈率关键在于在发病早期即可作出精确的诊断，为此本申请研究的目的是在基因水平上寻找能够用于肝癌诊断的早期分子标志物。

技术实现思路

[0011]本专利技术目的之一在于提供一种在检测敏感性高、特异性强的肝癌诊断的标志物。
[0012]本专利技术的进一步的目的在于提供一种检测敏感性高、特异性强的肝癌的诊断试剂/试剂盒。
[0013]本专利技术还有一个目的在于提供一种肝癌的诊断系统。
[0014]本专利技术首次提供了一种分子标志物组合，该分子标志物组合的检出量与肝癌具有极高的对应关系。
[0015]具体地，本专利技术提供了一种肝癌诊断的标志物，所述标志物包括ASB13、PCYOX1。
[0016]在本专利技术的一个实施例中，所述标志物包括ASB13、PCYOX1、RAB3IL1。
[0017]本专利技术还提供了前面所述的标志物的检测试剂。
[0018]进一步，所述检测试剂包括检测所述标志物的mRNA表达量的试剂、检测所述标志物的蛋白表达量的试剂。
[0019]更进一步，所述检测试剂包括荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段、偶联抗体。
[0020]本专利技术还提供了前面所述的检测试剂的检测产品。
[0021]进一步，所述检测产品包括试剂盒、芯片、试纸、高通量测序平台。
[0022]更进一步，所述试剂盒包括qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒和电化学发光检测试剂盒。
[0023]本专利技术还提供了一种肝癌的诊断系统，所述诊断系统包含：
[0024]检测构件：所述检测构件用以检测前面所述的标志物的表达量；
[0025]结果判断构件：所述结果判断构件用于根据所述检测构件所检测的所述标志物的表达量的结果，输出肝癌患者疾病结果。
[0026]进一步，所述的标志物的表达量包括所述标志物的mRNA表达量、所述标志物的蛋白表达量。
[0027]作为一种可以选择的实施方式，所述结果判断构件含有输入模块、分析模块和输出模块；输入模块用于输入所述标志物的表达量；分析模块用于根据所述标志物的表达量，分析出肝癌患者疾病风险结果的可能性；输出模块用于输出分析模块的分析结果。
[0028]作为一种可以选择的实施方式，所述检测构件包括qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、电化学发光检测试剂盒、qPCR仪、免疫印迹检测装置、流式细胞仪、免疫组化检测装置、ELISA检测装置、电化学发光检测装置。
[0029]某些实施例中，本专利技术的检测产品或诊断系统所针对的样品为组织、体液或排泄物。
[0030]其中一个实施例中，所述组织为肝组织。
[0031]某些实施例中，所述体液为血液、细胞外液、组织液、淋巴液、脑脊液或房水。
[0032]作为一种优选的实施方式，所述体液为血液。
[0033]作为一种更为优选的实施方式，所述体液为血浆。
[0034]某些实施例中，所述排泄物为痰、唾液、尿液或粪便。
[0035]产品中包括的引物可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。
[0036]本专利技术的检测产品或诊断系统中的抗体，可以使用任何结构、尺寸、免疫球蛋白类别、起源等的抗体或其片段，只要它结合靶蛋白质即可。本专利技术的检测产品中包括的抗体或其片段可以是单克隆的或多克隆的。抗体片段指保留抗体对抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝癌诊断的标志物，其特征在于，所述标志物包括ASB13、PCYOX1；优选地，所述标志物包括ASB13、PCYOX1、RAB3IL1。2.如权利要求1所述的标志物的检测试剂；优选地，所述检测试剂包括检测所述标志物的mRNA表达量的试剂、检测所述标志物的蛋白表达量的试剂；优选地，所述检测试剂包括荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段、偶联抗体。3.包含权利要求2所述的检测试剂的检测产品；优选地，所述检测产品包括试剂盒、芯片、试纸、高通量测序平台；优选地，所述试剂盒包括qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒和电化学发光检测试剂盒。4.一种肝癌的诊断系统，其特征在于，所述诊断系统包含：检测构件：所述检测构件用以检测权利要求1所述的标志物的表达量；结果判断构件：所述结果判断构件用于根据所述检测构件所检测的所述标志物的表达量的结果，输出肝癌患者疾病结果；优选地，所述的标志物的表达量包括所述标志物的mR...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，宋宏涛，
申请(专利权)人：青岛泱深生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：